幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白抗体水平与胃癌的相关性

目的 探讨幽门螺杆菌(HP)中性粒细胞激活蛋白(NAP)抗体水平与胃癌的相关性.方法 应用ELISA方法,对正常人和HP感染患者外周血中的NAP抗体水平进行检测,并用PCR方法检测HP临床菌株中nap基因存在状况.结果 所有检测的HP临床菌株中都存在napA基因;正常人血清中NAP抗体阳性率为42.6%;胃癌患者血清HP-NAP抗体阳性率为97.5%,明显高于胃溃疡患者92.9%和慢性胃炎患者85.7%的抗体阳性率;胃癌患者NAP抗体水平明显高于胃炎患者,但与胃溃疡患者无明显差异;NAP抗体水平与患者年龄无明显相关性.结论 NAP抗体水平与胃癌有一定相关性,提示NAP蛋白可能有致胃癌的作用.本研究为HP相关性胃癌的致病机制、诊断和疫苗研究提供基础.     

RelB shRNA慢病毒感染小鼠骨髓树突细胞的免疫学效应观察

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溴甲酚紫法测定血清白蛋白临床实用性评价

目的 对溴甲酚紫(BCP)法测定血清白蛋白(ALB)进行方法学评价，探讨其测定结果与传统溴甲酚绿(BCG)法的可转换性。方法 测定BCP法的线性范围、批内与批间变异系数、回收率及临床常见干扰因素对其干扰程度，比较测定结果与BCG法的差异。结果 BCP法测定ALB线性范围可达10～80g／L，批内与批间变异系数分别为0．95％和3．03％，平均回收率为99．4％，252μmol／L的胆红素、4％的Trilitid、4g/L的血红蛋白对其无明显干扰。应用BCP法比传统BCG法平均约低6．0g／L，但两者高度相关(y=1．08x 5．98)。结论 BCP法是一种较BCG法更为特异的测定ALB的方法，利用回归方程可方便地将其转换成BCG法的测定结果，使临床应用这两种方法测定ALB的结果具有可比性。     

临床生物化学检验实验课的教学体会

临床生化实验课被列为医学检验专业本科生的必修主干科目,为提高教学质量,以适应当代医学教育的需要,其关键是要保证实验课的开出率,选择实验内容,重视实验教学各环节。学生通过多练,培养其动手能力;设计综合实验,培养学生科研思维创新能力。     

临床实验室试剂智能化管理的开发及应用

目的通过直接采集仪器主控系统中试剂使用过程的数据和信息,优化原有试剂管理流程,实现试剂的智能化管理。方法利用计算机编程技术、数据库技术进行仪器对接、开发智能化试剂管理系统。结果直接从检测仪器获取试剂的使用数据和信息,包括试剂的批号、使用时间、失效时间、使用数量、对应检测的样本信息等。将使用的试剂信息与检测的样本信息对应。将试剂批号更换或定标后的质控或样本比对数据传输至系统。可直接计算试剂的实际测试数和使用效率。实时查询和统计显示检测仪器的试剂余量,生成需补充的试剂清单。结论该系统不仅实现试剂采购、出入库、使用、查询、统计等信息化管理,而且样本与试剂的溯源同试剂使用的全过程实现无缝连接,达到省时、高效、精准的试剂智能化管理。     

Olympus AU5400生化分析仪的测定误差及对策

目的测定Olympus AU5400模块式生化分析仪各分析系统间的误差,探讨用酶校准品校正仪器以减少其系统误差的可行性。方法由同一单元内、外圈,不同单元的同圈比色杯组成相应系统测定新鲜混合血清8项生化指标的批内精密度并比较其差异;再分别用3种酶校准品对系统进行校正,比较校正前后5项酶活性测定结果的差异和实际K值与理论K值的差异。结果AU5400的内、外圈的批内精密度均较好,变异系数CV为0.47%～1.59%。不同单元同圈比色杯测定8个项目的相关系数（r）为0.992～1.000,6个项目测定结果的差异均有统计学意义（P〈0.01）。经酶校准品校正后,肌酸激酶（CK）、γ-谷氨酰基转移酶（GGT）与碱性磷酸酶（ALP）测定结果差异无统计学意义（P〉0.05）。乳酸脱氢酶（LDH）测定的比例误差由4.0%减小至0.7%;而丙氨酸氨基转移酶（ALT）比例误差和恒定误差均有所减小。同一单元内、外圈测定8个项目的结果高度相关（r=0.998～1.000）;4个项目的结果差异有统计学意义（P〈0.001）。经酶校准品校正后,ALT、GGT及LDH的结果差异均无统计学意义（P〉0.05）,而ALP的比例误差和恒定误差均有所减小,但差异仍有统计学意义（P〈0.001）。不同酶校准品校正后的实际K值相差最大可达32.7%。结论AU5400的4个分析系统测定不同项目时,可产生较明显的比例误差和/或恒定误差;采用酶校准品进行校准后,大部分酶学项目的误差会显著减小,但少数项目的系统误差并不一定能完全消除。     

慢病毒载体介导的小鼠骨髓树突状细胞RelB基因沉默

目的: 利用慢病毒载体沉默小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因, 建立RelB基因低表达的骨髓致耐受DC, 为自身免疫病的防治提供新方法.方法: 设计小鼠RelB基因干扰的靶序列R5, 合成并克隆到慢病毒载体上, 与慢病毒的包装材料在293FT细胞中包装成病毒颗粒, 收集病毒上清, 测定病毒滴度, 然后包装慢病毒感染DC, RT-PCR和免疫荧光方法检测, 灰度扫描并用软件分析RelB基因的表达水平, 未成熟DC作对照组, 选择T6包装病毒为RNAi的阴性对照.结果: RT-PCR和免疫荧光方法发现R5病毒感染的DC RelB基因表达水平与未成熟DC基因表达水平接近, 低于成熟DC的表达水平(P<0.05), 而实验对照T6组病毒感染的DC其RelB基因表达水平高于未成熟DC(P<0.05)和R5病毒转染DC组(P<0.05).结论: 小鼠骨髓DC表达的RelB基因被慢病毒载体有效沉默, 有望成为DC免疫治疗的新载体.     

真菌通用引物结合高分辨熔解曲线分析检测鉴定常见曲霉菌

目的探索一种能够快速检测鉴定临床常见侵袭性曲霉菌病原的新型分子生物学方法。方法以真菌核糖体RNA基因的内转录间隔区2为靶基因,在5.8S、28S rRNA基因上设计泛真菌通用引物,扩增临床常见曲霉菌。同时用新生隐球菌基因组DNA、人基因组DNA及临床常见细菌基因组DNA进行引物特异性检测。将通用真菌引物扩增产物进行高分辨熔解曲线分析。以新鲜提取的烟曲霉基因组DNA为模板按照1∶10的比例梯度稀释,进行敏感性检测。检测7个浓度梯度的烟曲霉基因组DNA。结果设计的真菌通用引物可以扩增临床常见的4种曲霉菌及新生隐球菌,但与人基因组DNA和临床常见细菌基因组DNA无扩增反应,检测限可低至1.5 pg/μl,且4种曲霉菌及新生隐球菌扩增产物的熔解曲线不同。该方法敏感性和特异性均较好。结论利用真菌通用引物的扩增产物结合高分辨熔解曲线分析可以达到检测鉴定临床常见4种曲霉菌的目的,此方法对侵袭性曲霉菌的快速检测鉴定具有重要意义。