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目的利用TaqManReal—timePCR技术,建立Kadipiro病毒(KDV)实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank发表的KDV基因序列资料分析结果,在其第12片段基因区段设计KDV特异引物与探针,利用14株不同科属病毒核酸验证方法特异性,重复实验检验方法稳定性,利用体外转录的定量RNA标准品建立基因拷贝数定量分析模型。结果引物与探针具有良好的特异性,同一样品重复检测D值的变异系数均〈1.8%,定量分析模型的灵敏度为100拷贝/反应。结论建立了一种特异、灵敏、高效的KDV一步法TaqManReal-timePCR检测方法,为今后该病毒的监测与研究工作提供技术手段。 相似文献
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河南省唐河县分离到基因1型乙型脑炎病毒 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 从河南省唐河县采集的蚊虫标本中分离乙型脑炎病毒(JEV)并确定其基因分型及E基因区段氨基酸序列特征.方法对2004年采集蚊虫标本进行病毒分离,对新分离的乙脑病毒进行生物学、血清学及分子生物学鉴定.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离JEV的PrM、E区段核苷酸序列,测序后应用Clustal X软件做碱基配对分析,MEGA3.1完成病毒进化分析,GENEDOS(3.2)软件完成氨基酸位点分析.结果共采集3722只蚊虫标本,包括:库蚊、骚扰阿蚊、伊蚊及按蚊.从库蚊标本中分离到3株属于基因1型的乙脑病毒,E区段核苷酸和氨基酸与减毒活疫苗株SA14-14-2株的同源性分别为86.9%~87.7%,氨基酸同源性为95.2%~97.0%,存在12处共同的氨基酸位点差异.结论从河南省唐河县首次分离到基因1型的乙脑病毒.E基因与疫苗株相比有部分氨基酸差异,但现行疫苗株理论上可以保护新分离乙脑病毒. 相似文献
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目的在辽宁省采集蚊虫标本进行病毒分离,了解虫媒病毒分布情况。方法2008年夏季在辽宁省丹东和锦州市采集蚊虫标本,利用C6/36和BHK-21等细胞分离病毒;对新分离病毒利用血清学、分子生物学和生物信息学方法进行鉴定。结果在辽宁省丹东和锦州市共采集蚊虫标本3属5种9296只,包括库蚊属的三带喙库蚊、淡色库蚊,伊蚊属的刺扰伊蚊、背点伊蚊和按蚊属的中华按蚊。从蚊虫标本中共得到4株病毒分离物,其中1株为乙型脑炎(乙脑)病毒(丹东市的三带喙库蚊),2株为版纳病毒(锦州市的中华按蚊),1株为辽宁病毒和版纳病毒混合(锦州市的中华按蚊)。新分离乙脑病毒属于基因Ⅰ型乙脑病毒,E基因编码病毒毒力和抗原表位的位点未发生改变。结论在辽宁省再次分离到乙脑病毒,并首次证明辽宁省存在辽宁病毒。 相似文献
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西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)是一种蚊传虫媒病毒,1937年从非洲乌干达西尼罗地区一名发热土著妇女血液标本中分离并得名[1].此后在非洲、欧洲和亚洲中东地区的一些国家出现WNV感染病例,表现以发热为主的临床症状,为自愈性疾病[2].但是1999年该病毒首次在美国流行,仅1个月时间报道数十例WNV感染所引发的病毒性脑炎[3].随后WNV感染在美国的分布范围逐渐扩大并迅速扩散到美国大陆全境,至今已经有数万人染病并致上千人死亡[4]. 相似文献
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目的了解新型冠状病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)在无生命物品表面及不同温度下的存活状况。方法以"新型冠状病毒、环境、温度、表面、耐受力、活力、存活、稳定性、灭活、SARS-CoV-2、surface、inanimate、environments、environmental、matrices、factors、conditions、contact、personal protective equipment、transmission、stability、persistence、viability、survival、survivability、infectivity、transmission"为关键词, 检索中国知网学术论文数据库、万方数据库、维普数据库、PubMed、Web of Science、Cochrane Library、Embase, 检索日期为2020年1月1日至2022年6月15日。按纳入及排除标准筛选文献, 提取文献中数据后采用改良的MINORS量表进行文献质量评估, 采用RevMan5.4软件进行Meta分析, 采用Stata17.... 相似文献