“参与式”教学在神经病学教学中的应用思考

将"参与式"教学法融合入传统的课堂教学方法中,对提高神经病学教学质量有裨益。同时对可能存在的制约"参与式"教学方法实施的因素提出了解决办法。     

fmr1基因敲除小鼠中间神经元发育研究的新方法

目的：通过杂交技术获得能表达GAD67-GFP的fmr1基因敲除小鼠模型。方法：fmr1基因敲除（fmrl—ko）雌性小鼠（X—X-）和GAD67-GFP敲入基因杂合雄性小鼠（2＋2-）杂交。鼠尾巴提取基因组DNA,用PCR方法鉴定所有子代基因型。对杂交后代小鼠进行行为学观察,并行脑组织切片观察绿色荧光蛋白在γ-氨基丁酸能神经元的表达。结果：PCR方法证实通过杂交繁殖出四种基因型小鼠：同时带有杂合fmrlko及GAD67-GFP位点的雌性小鼠（X＋X-／2＋2-）、带有纯合fmr1—ko及GAD67-GFP位点的雄性小鼠（X—Y／2＋2-）、不带有GAD67-GFP的雌性和雄性小鼠（X＋X-／2-2-,X—Y／2-2-）。观察发现X—Y／2＋2-小鼠具有fmr1-ko小鼠类似的行为学表现,同时在显微镜下观察到X—Y／2＋2-小鼠脑组织切片有发绿色荧光的GABA神经元。结论：该杂交小鼠成功表达了GAD67-GFP,为研究γ-氨基丁酸能神经元在脆性X综合征发病机制中的作用提供-种可靠的模型。     

采用PCR方法检测Fmr1基因敲除小鼠的基因型

目的为Fmr1基因敲除小鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法设计两对引物扩增野生型Fmr1基因和Fmr1缺陷突变基因的DNA片段,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度,并将所得基因型结果与经典的western blot方法比较。结果野生型仅在800bp处有一条条带,突变纯合子仅在500bp处有一条条带,杂合子则在500bp和800bp处出现两条条带。用PCR方法获得的Fmr1基因分析结果与经典的western blot方法获得的结果完全一致。结论用PCR方法分析Fmr1基因敲除鼠的基因型具有快速、简单、廉价和适用的特点。     

Parry-romberg综合征的临床及影像学特征——文献复习并1例报告

目的探讨Parry-romberg综合征的临床及影像学特征,以提高对本病的认识。方法对一例Parry-romberg综合征患者的临床、头部CT、MRI影像学进行分析,并对患者进行随访。结果患者以癫痫起病,左侧面部萎缩,头部CT可见左侧枕叶钙化灶,头部MRI示左侧基底节、颞枕叶白质片状T1低信号T2高信号,MRI梯度回波T2＊示左侧多发小点状病灶提示微出血,随访发现患者左侧面部萎缩进行性加重,头部MRI可见原有脑部病灶处小圆囊性改变。结论Parry-romberg综合征是一种少见病,可以合并神经系统症状,临床表现结合影像学有利于诊断。     

FMR1基因敲除小鼠海马组织中microRNA-125b和microRNA-132的表达

目的 检测FMR1基因敲除小鼠海马组织中microRNA-125b(miR-125b)和miR-132表达水平,探讨脆性X智力低下蛋白(FMRP)缺失是否通过改变其转录后表达影响树突棘发育.方法 取FVB近交系雄性1周龄FMR1基因敲除型(K0)和同龄野生型(WT)小鼠各3只,取海马组织标本,应用microRNA芯片技术和荧光定量实时PCR检测miR-125b和miR-132的表达.结果 microRNA芯片检测显示,1周龄WT与KO小鼠海马组织miR-125b和miR-132的荧光值比较,差异无统计学意义(miR-125b:4 919.295±431.981比4 997.578±141.402;miR- 132:244.289±31.125比238.517±62.275,均P＞0.05);荧光定量实时PCR检测显示,miR-125b和miR-132的相对表达量差异亦无统计学意义(miR-125b:11.45±0.32比11.55±0.43;miR- 132:18.28±0.34比18.50±0.40,均P＞0.05).结论 脆性X综合征树突棘发育不良与miR-125b和miR-132的转录后表达水平无关.