脐血间充质干细胞体外诱导分化潜能的研究

近年来的研究认为,间充质干细胞(MSCs)是中胚层发育的早期细胞,具有很强的自我更新能力,可体外大量扩增,并至少能分化成3种中胚层结缔组织,已被用作组织工程的种子细胞.本研究试图在体外从脐血单个核细胞(MNCs)中分离培养MSCs,研究其生物学特性及分化潜能,现报告如下.     

支气管哮喘患者血清细胞因子的测定及意义

目的:探讨白细胞介素(IL)-12、13、16和RANTES(regulateduponactivationnormalTcellexpressedandsecreted)在支气管发病机制中的作用。方法:收集38例急性发作期哮喘患者、22例缓解期哮喘患者以及15名正常人的血清,用ELISA法测定IL-12、IL-13、IL-16和RANTES水平。结果:与正常人比较,无论是急性期还是缓解期哮喘患者,血清IL-12水平明显低下(P<0.01)、且急性期低于缓解期(P<0.01);IL-13、IL-16和RANTES水平明显升高(P<0.01),且急性期高于缓解期(P<0.05或0.01)。急性发作期哮喘患者经治疗后IL-12水平明显升高(P<0.01)、但仍低于正常水平(P<0.01);IL-13、IL-16水平明显下降(P<0.01),但仍高于正常水平(P<0.01),而RANTES则降至正常水平。此外,血清IL-12、IL-13、IL-16和RANTES水平之间密切相关(P<0.05或0.01))。结论:IL-12、IL-13、IL-16和RANTES参与哮喘的发病过程,其中IL-13、IL-16和RANTES对哮喘气道炎症具有正调节作用,IL-12对哮喘气道炎症具有负调节作用。     

混合脐血移植中HLA差异对植入的影响

目的 探讨HLA不同差异混合脐血移植的可行性和植入特性。方法 分别将2份人HLA半相合或不相合混合脐血输入经亚致死量照射后的严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠，观察两组脐血在SCID小鼠体内的植入状况及造血和免疫功能重建特性。结果 两组混合脐血均可在受鼠体内植入，形成供－受混合嵌合体，并能重建多系造血，植入率差异无显著性（P＞0．05），且未见明显不良反应。用多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸（PCR－SSO）探针检测人HLA－DQB1基因发现，在多数受鼠体内只用多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸（PCR－SSO）探针检测人HLA－DQB1基因发现，在多数受鼠体内只有1份脐血植入，该份脐血为体外集落形成能力较高者，HLA半组合组有3例出现来自供－受三者的多嵌合体。结论 HLA相合及不合混合脐血移植可重建SCID小鼠造血和免疫功能，HLA相合程度不同的混合脐血移植与植入率无明显相关性，但相合程序较高者，似易于2份脐血同时植入。     

尾加压素Ⅱ对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及细胞外信号调节激酶1/2蛋白磷酸化的影响

目的 研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖及细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)蛋白磷酸化的影响,探讨肺动脉高压肺血管重塑的可能机制.方法 采用消化法培养大鼠PASMC,WST-8测定不同浓度UⅡ诱导的大鼠PASMC的增殖活性及ERK1/2特异性抑制剂PD98059对UⅡ诱导的大鼠PASMC增殖活性的影响.Western blot法检测不同浓度UⅡ诱导的PASMC胞内ERK1/2蛋白磷酸化水平及PD98059对UⅡ诱导的ERK1/2蛋白磷酸化的抑制作用.结果 UⅡ在一定浓度范围(10-9～ 10-7mol/L)能浓度依赖性提高大鼠PASMC的增殖活性,并且能促进细胞内ERK1/2蛋白磷酸化.PD98059可阻断UⅡ诱导的PASMC增殖及PASMC胞内ERK1/2蛋白磷酸化.结论 UⅡ可促进大鼠PASMC增殖,ERK1/2通过磷酸化在其中发挥重要作用.     

哮喘患者肺泡巨噬细胞血栓素 A_2 前列环素、肿瘤坏死因子α、白介素 8、10 的释放及药物调节

测定２６例哮喘患者血浆及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）ＴＸＢ２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α、ＴＮＦα、ＩＬ－８、ＩＬ－１０的水平，并对其肺泡巨噬细胞（ＡＭ）进行加药培养。结果显示，哮喘患者血浆、ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＮＦα、ＩＬ－８水平明显高于正常人，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α与正常人无差异，ＢＡＬＦ中ＩＬ－１０水平低于正常人。患者ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＮＦα水平与其ＦＥＶ１、Ｖ５０呈负相关。ＡＭ加入不同的药物培养后，与空白组比较，抗原组ＴＸＢ２、ＴＮＦα的释放增加；治疗浓度氨茶碱组ＴＮＦα释放下降，ＩＬ－１０的释放增强；地塞米松组ＴＸＢ２、ＴＮＦα的释放下降。ＩＬ－１０的释放增强；红霉素组ＴＮＦα、ＩＬ－８的释放下降。提示ＴＸＢ２、ＴＮＦα、ＩＬ－８在哮喘发病中起重要促炎作用，ＩＬ－１０起抗炎作用，氨茶碱、地塞米松、红霉素具有抑制巨噬细胞分泌促炎因子的作用，而抗原具有激发ＡＭ分泌促炎因子的作用。     

TPO和TGFβ1在儿童ITP发病中的意义

目的 :研究调控特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患儿巨核细胞和 (或 )血小板生成的细胞因子的变化。方法 :采用定量夹心酶联免疫测定技术检测 40例ITP患儿血清中的正向调节因子血小板生成素 (TPO)和负向调节因子转化生长因子 (TGF) β1 水平。结果 :①ITP患儿血清TPO水平与正常儿童相比仅轻度升高 (P =0 .0 65) ,但其中部分患儿 (55 % )的TPO浓度显著高于正常对照 ,其骨髓巨核细胞数较TPO正常组显著降低 (P=0 .0 0 7) ,绝大部分激素治疗效果较差 (P <0 .0 0 1 ) ;②再生障碍性贫血 (AA)患儿的血清TPO水平显著高于ITP患儿 (P <0 .0 0 1 ) ,且两组患儿TPO水平之间没有重叠 ;③ITP患儿血清TGF β1 水平显著高于正常对照(P <0 .0 0 1 ) ,而AA患儿的血清TGF β1 水平与对照组相比差异无显著性意义 (P =0 .51 2 ) ,但显著低于ITP患儿 (P <0 .0 0 1 )。结论 :检测ITP患儿的TPO及TGF β1 水平对其发病机制研究、鉴别诊断及治疗方法的选择均有重要价值     

脐血红细胞免疫功能的研究

测定了脐血红细胞免疫Ｃ３ｂ受体花环率，免疫复合物花环率，血清红细胞Ｃ３ｂ花环促进率，血清红细胞Ｃ３ｂ花环抑制率和肿瘤红细胞免疫花环率。结果表明：脐血红细胞免疫复合物花环率明显高于成年人，血清红细胞Ｃ３ｂ花环促进率和肿瘤红细胞免疫粘附花环率明显低于成年人，脐血红细胞Ｃ３ｂ受体花环率和Ｃ３ＢＳ     

自体骨髓移植治疗非何杰金淋巴瘤4例

晚期诱导化疗失败或复发的非何杰金淋巴瘤(NHL),常规化/放疗疗效很差,治愈机会为0～1％。我们应用自体骨髓移植治疗4例小儿难治性NHL取得较好疗效,报告如下。     

脐血移植重建同种异基因小鼠免疫造血系统的研究

目的探讨脐血移植重建同种异基因纯系小鼠免疫造血系统的可行性,建立一种新的研究脐血移植的方法.方法孕20d的C57BL/6小鼠(H-2b)经剖腹产取出胎盘和胎鼠,分离出脐血单个核细胞(MNC),1×106个MNC经尾静脉注入致死量照射的BALB/c小鼠.1月后,用抗H-2Db单克隆抗体检测嵌合体的存在.用混合淋巴细胞培养和皮肤移植检测特异性的免疫耐受.结果未移植的对照组3周内全部死亡.移植组75%存活并形成稳定的不全嵌合体.体外混合淋巴细胞培养和体内皮肤移植发现受鼠对供者的组织和细胞产生了特异的免疫耐受.结论小鼠脐血有足够的造血干细胞,能重建同种异基因小鼠的免疫造血系统而不引起明显移植物抗宿主病(GVHD),这一模型可用于研究临床脐血移植中遇到的问题.