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目的 研究1 - 硝基芘(1 - nitropyrene, 1 - NP)对小鼠精母细胞株GC - 2的损伤效应及芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)信号通路的影响。方法 建立不同剂量1 - NP染毒的GC - 2细胞模型,采用CCK - 8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Western blot分析各组细胞DNA双链断裂损伤标志物γ - H2AX、DNA损伤反应通路蛋白以及AhR通路蛋白的表达。实时荧光定量PCR检测细胞色素450 (CYP)1a1和1b1 mRNA表达水平。结果 1 - NP处理可导致GC - 2细胞活性降低及G2/M期细胞比例升高,同时诱导γ - H2AX蛋白表达升高,DNA损伤反应及细胞周期G2/M期检测点蛋白ATM、Chk1、Cdc25c、Cdc2的磷酸化表达水平升高,Cyclin B1表达降低。1 - NP染毒也提高了GC - 2细胞中AhR核蛋白及下游靶基因CYP1A1的蛋白表达,提高了Cyp1a1和Cyp1b1的转录表达水平。结论 1 - NP暴露造成小鼠生精细胞的DNA损伤、细胞周期阻滞和细胞活性抑制,其效应可能与AhR信号通路的活化及对化学物的代谢活化有关。 相似文献
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目的探讨尼古丁抑制小鼠睾丸间质细胞株(TM3)睾酮生成中对线粒体的损伤作用。方法尼古丁染毒处理TM3细胞24 h,采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA检测培养液睾酮水平,NAO探针染色检测线粒体质量,荧光酶标仪检测ATP水平,QPCR方法检测线粒体DNA拷贝数,western blot分析线粒体相关蛋白及睾酮合成关键酶蛋白的表达。结果 TM3细胞活性随尼古丁染毒剂量增加而降低;与对照组细胞相比,尼古丁在1~10μM剂量范围内对细胞凋亡率无明显影响,但诱导细胞睾酮水平显著降低(P=0.022,P=0.009和P=0.007);同时细胞线粒体质量(P=0.038,P=0.008和P=0.007)、线粒体DNA拷贝数(P=0.045,P=0.032和P=0.008)以及细胞ATP水平(P=0.037,P=0.007和P=0.005)也随尼古丁染毒浓度的增加而呈降低趋势。线粒体生物合成相关蛋白PGC1-α(P=0.007、P=0.003和P=0.002)、SIRT1(P=0.043,P=0.009和P=0.004)、COX I(P=0.036和P=0.008)以及线粒体睾酮合成酶蛋白St AR(P=0.009,P=0.007和P=0.005)和CYP11A1(P=0.007和P=0.006和P=0.001)的表达均随染毒剂量的升高而降低。结论尼古丁可抑制睾丸间质细胞TM3的睾酮生成,其机制可能与诱导细胞线粒体损伤及线粒体睾酮合成酶的表达降低有关。 相似文献
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敖琳 《中国冶金工业医学杂志》2011,28(3):357-358
静脉采血检测血脂、血糖、肝肾功能等,是健康体检中很重要的项目之一,为使护士能够在有限的时间内完成每天的采血任务,且保证血标本质量,又不发生差错,我院体检中心自2008年开始, 相似文献
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胞质分裂阻滞微核试验法(cytokinesis block micronucleus test,cBMNT)是一种常见的微核试验法,近年来发展成为检测DNA损伤和错误修复、染色体不稳定、有丝分裂异常、细胞死亡和生长抑制的一种有效的细胞组学(cytome)检测方法。本文就CBMNT近年来的方法学及应用进展作一综述。 相似文献
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成年男性精子线粒体DNA拷贝数及完整性与精液参数的关联研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 分析成年男性精子线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数及完整性与常规精液质量参数的关联,探讨精子mtDNA相关指标在反映男性生育力中的作用.方法 采集161例参加男性生殖健康调查的志愿者的精液样本.采用计算机辅助精子分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)进行精液参数分析,Diff-Quick试剂盒染色检测精子形态.实时荧光定量PCR测定精子mtDNA拷贝数,长链PCR检测mtDNA完整性.结果 mtDNA拷贝数与常规精液参数包括精液体积、精子密度、精子总数、前向运动率、精子活率和精子正常形态率均呈负相关(r=-0.168、-0.452、-0.474、-0.189、-0.306、-0.235,P均<0.05).除精子前向运动率外,mtDNA完整性与其余常规精液参数均呈正相关(r =0.193、0.379、0.480、0.325、0.282,P均<0.05).采用多元线性回归分析调整混杂因素后,mtDNA相关指标与精子密度、精子总数、精子活率和正常形态率之间的相关性仍然存在.结论 mtDNA拷贝数和mtDNA完整性与常规精液质量参数之间存在关联,mtDNA相关指标可能是反映精子质量的生物标志物. 相似文献
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昆明山海棠对人白血病细胞HPRT位点的影响 总被引:9,自引:2,他引:9
目的:研究昆明山海棠对人白血病细胞HL-60HPRT位点的影响。方法:用THH水溶液对HL-60细胞进行浓度梯度染毒,不同时间点进行单细胞微孔接种,计数阳性克隆,测定接种存活率、克隆效率和突变频率。结果:THH染毒细胞的突变频率,在处理剂量3.35 ̄20.10mg/ml范围内,具有明显的剂量-反应关系。但随着THH的浓度增高至33.50mg/ml组,由于细胞存活率太低,细胞数不够最后接种要求,不能 相似文献