HCV反向点杂交基因分型方法的建立

目的利用反向点杂交技术建立HCV基因分型新方法。方法在HCV5’端非编码区（5’NCR）设计引物和分型探针（1．2．3．6型）,采用反向点杂交分型技术对53例HCVRNA阳性（浓度均在102～107IU／mL之间）血清进行分型,并以基因序列分析作为金标准,对新方法的敏感性、特异性和重复性进行评价。结果反向点杂交基因分型新方法检出的基因型有52例：1b型32例占60．38％,2a型4例占7．55％,6a型8例占15．09％．3b型8例占15．09％;未检出的基因型有1例,用基因序列分析也未能确定型别（失败的原因应是该HCVRNA扩增产物浓度偏低2．24×10^2IU／mL）。本研究的方法敏感性为98．1％,特异性为100％,随机抽取20份标本再次检测的结果与前次检测的结果完全一致,重复性好。结论相对现有的型特异性PCR分型、基因芯片、核酸序列分析等各种方法,反向点杂交技术用于HCV基因分型是一种准确有效和简便经济的方法。     

脑原发性淋巴瘤免疫组化及形态定量研究

对 7例原发性中枢神经系统淋巴瘤 (Primarycentralnervoussystemlymphoma ,PCNSL)进行免疫组化及病理形态定量研究。方法　对瘤组织采用常规石蜡包埋切片、HE染色及LSAB免疫组化染色 ,光镜观察。另选取病变典型的切片应用HPIAS - 10 0 0彩色图像分析系统对肿瘤细胞核的形态进行定量测定。结果　 7例均为B细胞淋巴瘤 ,共中大裂 -无裂细胞型 4例 ,小淋巴细胞型 2例 ,小裂细胞型 1例。各型淋巴瘤与对照组之间除椭圆度外 ,其余形态学参数均有非常显著性差异 (P <0 .0 0 1)。 3组淋巴瘤两两间比较显示大裂 -无裂细胞型与小裂细胞型、大裂 -无裂细胞型与小淋巴细胞型除个别指标、多数参数两两间有非常显著性 (P <0 .0 0 1)或显著性差异 (P <0 .0 5) ;小淋巴细胞型与小裂细胞型间 ,面积等效体积、等效圆直径、长径、短径、形状因子、矩形度、实面积 7项参数有显著性差异。其余 8项参数无显著性差异。结论　采用形态定量的方法能对PCNSL做出准确的诊断 ,对于PCNSL的某些组织学分型能够提供客观的、准确的和定量的依据 ,因而具有十分重要的意义。     

单管多重PCR技术快速检测五种性传播疾病的病原体研究

目的 建立一种能同时检测淋球菌(NG)、人型支原体(MH)、生殖支原体(MG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)5种病原体的单管多重PCR方法 .方法 以荧光定量PCR技术加另一种检测技术作为金标准,对单管多重PCR技术检测五种性传播疾病(STD)病原体的敏感性、特异性、准确性和重复性进行了评价.结果 该法的敏感性、特异性和符合率分别为10-9fg/μl、100%、97.8%,20份临床标本连续5 d的重复性好.结论 单管多重PCR技术为检测STD提供了一种新的方法 .     

食管癌病理学研究的新进展(一)

食管癌在我国较多见，其研究对于肿瘤的治疗及预后都具有重要意义。笔者对食管癌病理学研究新进展做一概述。     

脾脏原发性恶性淋巴瘤免疫组化及p53蛋白表达的研究

目的:复习文献对14例脾脏原发性恶性淋巴瘤(PrimaryLymphomaofSpleen,PLS)进行免疫组化的研究,并检测其p53的表达情况。方法:对瘤组织采用常规石蜡包埋、切片、HE染色及SP两步法免疫组化染色,光镜观察。结果:免疫组化染色14例瘤细胞均表达CD45阳性,13例B细胞性均表达CD20阳性,其中B-小淋巴细胞淋巴瘤(3/14例),可表达CD43、CD79α和bcl2阳性;脾边缘区B细胞淋巴瘤(4/14例),可表达CD79α、IgM、ALK阳性,IgD弱阳性;淋巴浆细胞样淋巴瘤(2/14例),表达CD43、CD79α、bcl2、IgM阳性,IgD阴性;弥漫性大B细胞淋巴瘤(4/14例),表达ALK阳性,CD30、CD3弱阳性。1例周围T细胞淋巴瘤,无其他特征型(1/14例),表达CD45Ro、CD3阳性,CD30弱阳性。14例PLS中6例(42.9%)表达p53阳性,而21例慢性增生性脾炎对照组中仅1例(5%)表达p53弱阳性,两组间有显著差异(P<0.05)。结论:PLS较罕见,免疫组化染色对其诊断,鉴别诊断及分型具有重要的意义。PLS多为B细胞型,普遍认为与脾脏白髓中B细胞恶性变有关。PLS中可有p53异常蛋白表达,其预后较脾脏继发性恶性淋巴瘤及其它恶性肿瘤为好。     

2004年WHO泌尿系肿瘤分类中前列腺腺泡细胞癌的病理诊断及Gleason分级

前列腺腺泡细胞癌是分泌细胞起源的恶性上皮性肿瘤,为目前世界上第6位最常见的恶性肿瘤[1,2],也是男性第3位重要的肿瘤,占男性恶性肿瘤的9.7%.其死亡者占男性恶性肿瘤死亡者的5.6%,占所有恶性肿瘤死亡者的3.2%.     

人源性乳酸杆菌的生物学特征研究与优选

目的探讨人源性乳酸杆菌的生物学特征,并对分离的人源性乳酸杆菌进行优选。方法对43株产过氧化氢(H2O2)乳酸杆菌利用CH-50L细菌鉴定系统进行鉴定,测定其培养液的pH与H2O2浓度,并利用培养液进行抑菌试验。结果43株细菌中,有9株表现出一定的抑菌活性;有抑菌活性的乳酸杆菌培养液与无抑菌活性的培养液比较,其pH、H2O2浓度比较差异无统计学意义(P0.05)。结论乳酸杆菌对细菌的抑制作用主要依靠细菌素等生物活性物质,而乳酸及H2O2在抑菌活性中起到加强作用,不同菌株产生抑菌物质的种类或数量有差异。     

3台不同血常规分析仪检测结果的临床验证

目的 通过对该科室的3台不同型号的全自动血细胞分析仪的测定结果进行比对分析,评价这3台仪器的可比性是否达到临床要求。方法 用Sysmex 2100全自动血细胞分析仪作为参考仪器,Sysmex 1000i和雅培1800作为实验仪器,采用仪器原厂质控物及患者的新鲜抗凝血标本,在该实验室这3台仪器上连续检测40d,分析白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)和血小板(PLT)的检测结果。结果 3台仪器检测结果经F检验统计分析,差异无统计学意义(P>0.05),结果偏倚在1/2美国临床医学检验部门修正法规(CLIA′88)的最大允许误差范围内。结论 这3台仪器的检测结果具有可比性,能达到临床的要求。     

重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应中Toll样受体的变

背景：现已认识到Toll样受体的活化与器官移植后排斥反应的关系十分密切,Toll样受体与移植免疫也逐渐成为研究的热点问题。 目的：观察重组人白细胞介素10抗皮肤移植排斥反应中受体兔血清Toll样受体的变化。 方法：制备兔背部缺损模型,将受体家兔分为6组,重组人白细胞介素10低、高剂量组、环孢素A低、高剂量组、联合用药组和生理盐水组,分别于移植前1 d开始肌肉注射5,10 μg/(kg•d)重组人白细胞介素10,5,10 mg/(kg•d)环孢素A,5 μg重组人白细胞介素10+5 mg环孢素A,1 mL/d生理盐水,连续用药10 d。 结果与结论：各组移植后Toll样受体4,7,8,9水平均较移植前升高,移植后14 d达到高峰。移植后4,7 d生理盐水组Toll样受体4水平高于联合用药组(P < 0.05)。移植后7 d生理盐水组Toll样受体7高于其他各组(P < 0.05),Toll样受体8高于环孢素A高剂量组(P < 0.05)。各组移植不同时间点Toll样受体9水平差异无显著性意义(P > 0.05)。提示重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植反应中,Toll样受体4,7,8,9水平在皮肤移植后明显升高,当皮片排斥后达到高峰,之后逐渐下降,表明Toll样受体参与排斥反应过程。