小鼠药理性月经模型中孕酮撤退激活NF-κB状态研究

目的:研究在小鼠药理性月经样模型中,阻断孕酮作用后子宫内膜组织崩解过程中核转录因子NF-κB激活状态。方法:切除卵巢后小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮处理模拟月经样出血,取部分子宫组织采用免疫组织化学、蛋白质印迹方法检测米非司酮处理(即孕酮撤退)后不同时期NF-κB激活及NF-κB上游信号分子的表达。结果:免疫组化结果显示,阻断孕酮作用后NF-κBp65显著入核,p50入核不明显。蛋白印迹实验显示,p50和p65蛋白发生了核浆转移,在孕酮撤退12h后核蛋白中表达量最高。NF-κB诱导性激酶、磷酸化IKK-β、磷酸化IκB-α在阻断孕酮作用后的各个时期都有表达,且各时相表达均有差异。结论:孕酮撤退可能通过NF-κB诱导性激酶、磷酸化IKK-β,继而磷酸化IκB-α通路激活NF-κB。     

低氧和低氧诱导因子在月经样小鼠模型中对子宫内膜崩解的作用

目的 探究低氧和低氧诱导因子(HIF1A)在小鼠子宫内膜崩解过程中的表达及作用.方法 构建药理性小鼠月经样模型.根据月经样小鼠给药处理方式不同分为4组:(1)PW-CoCl2-组(n=5):孕酮(P4)维持,不添加二氯化钴(CoCl2);(2)PW-CoCl2+组(n=6):P4维持,CoCl2给药;(3)PW+CoC...     

金属基质蛋白酶在月经发生中的作用

子宫内膜在精确的雌激素和孕激素的作用下,经历了增殖,分化以及在分泌晚期孕酮撤退情况下的子宫内膜周期性的崩解、脱落以及其后的再生修复过程。子宫内膜的快速崩解脱落现象是月经发生的显著特征。孕酮撤退是引发月经发生的始动因子,金属基质蛋白酶则是最终作用因子。金属基质蛋白酶（MMP）为水解酶,其家族成员众多。将对金属基质蛋白酶结构种类、剪切与活化、调节以及其在月经发生中灵长类和小鼠月经样模型中子宫内膜中的定位、表达与酶活进行阐述。     

ANGPTL8在大鼠着床后雌激素短暂缺乏胎盘中的表达及其对人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的 研究血管生成素样蛋白8(ANGPTL8)在着床后雌激素缺乏下对胎盘和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能的影响.方法 在大鼠妊娠6.5 d～8.5 d(GD 6.5～GD 8.5)时按照每只0.16 mg·kg-1·d-1的剂量给实验组(n=20)灌胃来曲唑建立着床后短暂雌激素缺乏模型,对照组(n=20)予以相同...     

ATF6在转基因敲除鼠人工诱导蜕膜化模型中的研究

目的 利用小鼠人工诱导蜕膜化模型，探讨转录活化因子6(ATF6)在小鼠子宫内膜中的作用机制。方法 构建繁育野生型(Atf6^+/+)和ATF6敲除型(Atf6^-/-)小鼠，并构建小鼠人工诱导蜕膜化模型。雌鼠交配后见阴栓第1天记为Day 1。Day 4进行诱导蜕膜化，蜕膜化后48 h和72 h(即Day 6和Day 7)收集小鼠子宫进行相应指标检测，实时荧光定量PCR方法和蛋白质免疫印迹法检测Atf6 mRNA与蛋白质在蜕膜化子宫中的表达情况；免疫组织化学方法检测野生型(Atf6^+/+)和ATF6敲除型(Atf6^-/-)小鼠人工诱导蜕膜化模型中ATF6和催乳素(PRL)在子宫中的阳性信号表达情况。收集人子宫内膜生理周期中不同时相子宫内膜组织，进行石蜡包埋切片，免疫组织化学方法检测ATF6在子宫内膜中的阳性信号表达情况。结果 与小鼠未蜕膜子宫相比，Day 6和Day 7蜕膜化子宫中的Atf6 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),细胞核内的蛋白水平也显著增高(P<0.05);Day 7时子...     

时钟基因Cry1与Bmal1在小鼠子宫内膜生理性修复过程中的表达研究

目的 以小鼠月经模型为基础，探究时钟基因Cry1与Bmal1对小鼠月经期子宫内膜生理性修复过程的影响。方法 通过建立小鼠月经样生理性修复模型，利用苏木素伊红(HE)染色法进行组织形态学观察；利用免疫组织化学(IHC)染色法观察CRY1与BMAL1蛋白在小鼠月经样修复模型中的表达定位；进一步利用蛋白免疫印迹杂交(Western blot)检测CRY1与BMAL1蛋白的表达水平。结果 孕酮撤退后24～48 h子宫大体颜色逐渐变淡，子宫直径由粗逐渐变细。HE染色结果显示，孕酮撤退后24 h蜕膜化区域大部分细胞坏死崩解，且随着时间推移，子宫内膜厚度增加，子宫腔面出现再上皮化，腺体数量明显增多；48 h时，子宫内膜修复完整，基本恢复到正常子宫形态。IHC染色结果显示，CRY1和BMAL1蛋白的阳性染色定位于细胞质和细胞核中，主要集中在细胞核，且阳性信号随着孕酮撤退时间呈现一定差异。Western blot检测结果显示，孕酮撤退24 h后，子宫内膜CRY1蛋白表达显著降低(P<0.05),40 h时表达量相对更低，出现低谷。孕酮撤退后32 h子宫内膜BMAL1蛋白的表达量相对更低，显著低于2...