去甲斑蝥素不依赖钙调蛋白磷酸酶信号通路抑制高糖刺激肾小管上皮细胞细胞外基质的表达

目的:在证实去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)能减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾间质纤维化和抑制高糖刺激的肾小管上皮细胞细胞外基质表达的基础上,观察NCTD对高糖刺激的肾小管上皮细胞钙调蛋白磷酸酶(calcineurin,CaN)通路的影响,探讨NCTD抗DN肾小管间质纤维化与其抑制CaN的关系。方法:常规培养人肾小管上皮细胞(HK-2),转染CaN siRNA,细胞分五组:(1)正常糖组(D-glucose5.5mmol/L);(2)高糖组(HG,D-glucose30mmol/L);(3)高糖+CaN siRNA组;(4)高糖+CaN siRNA+NCTD(5mg/L)组;(5)高糖+NCTD(5mg/L)组。采用Western-blot、免疫荧光和实时定量PCR,观察NCDT对HK-2细胞CaN/NFAT通路的影响,明确CaN siRNA的干扰效果。采用Western blot,检测NCTD对转染CaN siRNA后的HK-2细胞纤维连接蛋白(FN),胶原蛋白IV(Collagen IV,Col IV)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。结果:高糖可促进HK-2细胞CaNmRNA及蛋白的表达,NCTD可在基因及蛋白水平抑制CaN的表达(P0.05)。免疫荧光发现CaN下游活化T细胞核因子(NFATc)在正常对照组中存在于胞质,高糖刺激后细胞核内开始表达,高糖刺激30min后发生明显的核转位,NCTD能在一定程度上抑制核转位的发生,并能减少高糖刺激后核内NFATc蛋白的表达。转染CaN siRNA后,高糖刺激后HK-2细胞中CaN mRNA以及蛋白表达均降低,而FN,Col IV以及TGF-β1蛋白水平表达都明显增强(P0.05)。NCTD可抑制转染CaN siRNA后高糖刺激的HK-2细胞FN,Col IV和TGF-β1的表达。结论:NCTD能下调肾小管上皮细胞CaN表达,阻断CaN/NFATc信号通路;但NCTD抑制高糖刺激后肾小管上皮细胞细胞外基质的表达,与其阻断CaN/NFATc信号通路无关。     

RANTES及其受体CCR5基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

糖尿病肾病(DN)的确切发病机制至今尚未完全阐明,除与糖尿病的病程、代谢控制不良及血流动力学改变有关外,遗传易感性已经被证实是DN发生的一个重要因素[1].我们在研究RANTES基因启动子G403A多态性与2型DN关系的基础上[2],研究同一人群CCR5基因启动子区G59029A基因多态性与2型DN的相关性,及初步探讨RANTES G403A及其受体CCR5 G59029A基因多态与2型DN的相关性.     

RANTES及其受体CCR5基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

糖尿病肾病(DN)的确切发病机制至今尚未完全阐明,除与糖尿病的病程、代谢控制不良及血流动力学改变有关外,遗传易感性已经被证实是DN发生的一个重要因素[1].我们在研究RANTES基因启动子G403A多态性与2型DN关系的基础上[2],研究同一人群CCR5基因启动子区G59029A基因多态性与2型DN的相关性,及初步探讨RANTES G403A及其受体CCR5 G59029A基因多态与2型DN的相关性.     

IgA肾病患者扁桃体CD4+CD25+T细胞及J链mRNA阳性IgA细胞与临床病理的关系

不少学者认为IgA肾病(IgAN)与扁桃体自身免疫反应有一定联系.IgAN患者扁桃体CD4+CD25+T细胞减少和分泌J链mRNA阳性IgA细胞增多,且CD4+CD25+T细胞数与J链mRNA阳性IgA细胞数呈负相关[1].我们分析其与临床病理的关系.     

儿童ANCA相关性血管炎并肾脏Ⅳ型胶原缺失并胡桃夹现象1例

ANCA相关性系统性血管炎在男性儿童中少见,而且同时伴有肾脏Ⅳ型胶原缺失合并胡桃夹现象的病例国内外未见相关报道,临床上对其血尿来源判断容易误诊,故现将该病例报告如下.     

3 547例慢性肾脏疾病患者分期及相关因素分析

目的:慢性肾脏病(CKD)是人类面临的主要健康问题之一,本研究调查了中南大学湘雅二医院肾内科CKD患者的分期情况及病因、年龄、性别等相关因素分析.方法:回顾性分析2003年1月到2008年12月6年间中南大学湘雅二医院肾内科收住的3 547例CKD3期及以上的第一次住院患者 (≥14岁)的资料,参照 NKF-K/DOQI指南的标准来定义CKD,按照简化的MDRD公式求eGFR[eGFR=186.3×血肌肝(SCr)-1.154×年龄-0.203×0.742(女性) mL/min·1.73 m2].记录患者的性别、年龄、住院号、病因及功能诊断、病程、收缩压和舒张压、血红蛋白、尿量、肾功能、血白蛋白、肾脏B超、治疗方式等项目,并进行统计分析.结果:(1)原发性肾小球疾病、高血压病和糖尿病是导致CKD的主要病因,分别占55.20%,14.55%和11.78%.6年间的病因构成无明显差异 (P＞0.05).但病因构成中慢性肾小球肾炎比例有所下降,而高血压肾病、糖尿病肾病的比例有所上升.(2)CKD3期到5期患者所占比例分别为11.59%,23.03%和65.38%.41～60岁的患者占CKD的39.24%,大于60岁的患者占CKD的36.88%.慢性肾小球肾炎患者的年龄常见于21～40和41～60岁年龄组.狼疮性肾炎患者年龄较轻,21～40岁占48.35%.高血压肾病和糖尿病肾病患者年龄较大,95%以上见于40岁以上患者.(3)梗阻性肾病、痛风性肾病多发于男性,而狼疮性肾炎以女性多见.(4)大多数 CKD患者伴贫血 (94.28%)和高血压 (56.91%),且随CKD病程进展,贫血、高血压发生率及严重程度增高 (P＜0.005).(5)CKD5期患者2 319例,926例行血透,181例行腹透.结论:CKD病因前3位依次为慢性肾小球肾炎,高血压肾病,糖尿病肾病.糖尿病肾病和高血压肾病的比例呈上升趋势.CKD3期到5期患者中以5期患者居多,老年人是CKD的高危人群.     

SARA在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的表达变化

目的：建立高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化模型,检测肾小管上皮细胞转分化过程中Smad锚着蛋白（Smad anchor for receptor activation, SARA）的表达变化。方法：采用Western印迹和实时定量PCR检测细胞波形蛋白（vimentin）、紧密连接蛋白（Zona occludens-1, ZO-1）、SARA蛋白及其mRNA表达水平。结果：30 mmol/L D-葡萄糖刺激后,HK-2细胞vimentin蛋白及其mRNA水平呈时间依赖性升高,而ZO-1蛋白及其mRNA水平呈时间依赖性下降,此变化在高糖刺激48 h时最为显著。同时,SARA蛋白及其mRNA表达水平呈时间依赖性下降。结论：高糖可诱导HK-2细胞发生转分化,SARA可能作为保护因子参与了这一过程。     

EMT在腹膜纤维化中的作用及意义

腹膜透析是终末期肾衰竭患者的主要替代治疗方法之一,具有操作简便、不需依赖机器等优点。长期腹膜透析患者可能发生腹膜炎、腹膜纤维化等并发症,导致腹膜超滤功能和转运功能的障碍,是制约腹膜透析发展的主要原因。近期关于上皮细胞间充质细胞转分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的研究为我们提供了新的突破口。本文就腹膜上皮细胞的转分化在腹膜纤维化中的作用作一综述。     

系统性红斑狼疮并隐球菌性脑膜炎1例报道

隐球菌性脑膜炎是系统性红斑狼疮（systemic lupus erythernatosus,SLE）较少见但严重的并发症,现报道1例。     

SiRNA-HDAC5 对非肥胖型糖尿病鼠组蛋白修饰异常的干预及其治疗作用

目的：通过小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)干预非肥胖型糖尿病(non-obese diabetic，NOD)鼠脾 CD4+ T细胞组蛋白去乙酰化酶5(histone deactylase 5，HDAC5)的表达，检测免疫、炎症及肾功能相关指标，评估siRNAHDAC5 对NOD鼠的治疗作用，探讨HDAC5与糖尿病肾病之间的关系。方法：随机将NOD鼠分为3组，在12周龄时分 别于尾静脉注射siRNA-HDAC5，siRNA-Control或生理盐水，于18，24和30周龄取样本检测，以血糖仪检测各组NOD 鼠血糖，ELISA检测尿白蛋白排泄率及血清细胞因子IL-1，IL-6，IL-18和TNF-α水平。实时定量PCR检测各组NOD鼠 CD4+ T细胞CD11a，CCR5以及CX3CR1 转录水平，Western印迹检测NOD鼠脾脏CD4+ T细胞HDAC5蛋白水平。结果： 与未干预对照组相比，HDAC5干预组小鼠血糖和尿白蛋白排泄率均显著降低，血清IL-1，IL-6，IL-18及TNF-α细胞因 子水平下降，脾CD4+ T细胞CD11a，CCR5以及CX3CR1明显降低。结论：阻断NOD鼠的HDAC5表达能减缓糖尿病鼠 肾损伤的发生和发展。