一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立

本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3’末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。     

鼠血管外膜涂抹雌激素抑制血管再狭窄

目的探讨局部应用雌激素对雌性去势大鼠血管成形术后再狭窄的影响及其作用机制.方法制作40只雌性大鼠去势模型,并在此基础上制作左颈总动脉血管再狭窄模型,将其随机分为去势组、去势 E(应用雌激素)组.雌激素由pluronic gelatine携带局部涂抹于实验组的血管外膜,观察不同时间点血管腔及血管壁的变化.结果PTA后7天、14天、28天,去势组血管狭窄指数最大,去势 E组与未去势组之间无显著性差异.血管成形术(PTA)后3天、7天、14天,去势组血管外膜细胞增殖指数最大,去势 E组与未去势组之间无显著性差异.结论用pluronic gelatine携带雌激素局部涂抹血管外膜是一种有效的血管再狭窄预防方法,其作用机制可能与雌激素干预血管外膜细胞的活化有关.     

采用定点突变PCR构建c-kit D816V突变的重组质粒标准品

目的构建含野生型c-kit基因第17号外显子片段以及含D816V突变型的重组质粒,用作检测c-kit基因D816V突变的阳性对照和阴性对照标准品。方法通过设计定点突变的克隆引物和野生型克隆引物,以健康人外周血基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增获得突变和野生型c-kit基因17号外显子片段,将其插入pEGFP-C1载体质粒中获得重组质粒,并通过酶切和测序鉴定重组质粒,通过紫外分光光度计检测标本的浓度和纯度。结果从健康外周血细胞基因组DNA中成功扩增得到野生型和定点突变的c-kit DNA片段,并将其插入到质粒载体pEGFP-C1中,构建的阳性和阴性对照质粒经酶切和测序鉴定与目的片段完全一致。阴性和阳性质粒标准品的浓度分别为140.1μg/ml和189.9μg/ml,其OD260/OD280值分别为1.821和1.802。结论成功构建了含野生型和D816V突变的c-kit重组质粒,为检测c-kit基因D816V突变提供阴性和阳性对照以及质控品。     

转录组测序分析融合基因在染色体核型正常髓系白血病诊断中的应用

目的:应用高通量转录组测序分析染色体核型正常的髓系白血病患者中可能存在的融合基因。方法:选择2017年5月至2019年1月南昌大学第一附属医院3例染色体核型正常并且常见融合基因阴性的髓系白血病患者为研究对象,通过高通量基因测序技术对患者骨髓单个核细胞进行转录组测序。采用Defuse软件分析转录组数据中的基因融合序列,用...     

用蝮蛇抗栓酶治疗脑血管性痴呆的临床观察

由于脑血管性痴呆造成的智能减退、偏瘫、失语、大小便不利、感觉减退等神经功能障碍，临床尚无有效治疗措施，我们应用蝮蛇抗栓酶（ＮＧＦ）治疗血管性痴呆３９例疗效满意。现总结如下。资料与方法１１自１９９２年５月至１９９６年８月我院收治的脑血管性痴呆７８例...     

妇血宁组分的研究Ⅲ、妇血宁组分3的理化性质

<正> 我们曾用SephadexG—100凝胶层析法将妇血宁分离为三种组分,其中组分3(F_3)有明显药理作用,现对其理化性质做进一步探讨。方法与结果一、纯化取SephadcxG—100分离妇血宁原粉所得     

潘生丁所致过敏反应1例

我院遇见潘生丁过敏反应1例,报告于下。 王某,女,37岁。因病毒性心肌炎,在门诊口服潘生丁治疗。第1天口服25mg,一日3次。每次服药后,有头昏,全身不适,心慌胸闷加重,但仍能坚持上班工作。次日,口服潘生丁50mg,服药后约1小时,突然头昏头晕,眼花耳鸣,恶心厌食,胸闷加重,畏寒发冷,全身发抖,卧床不起,于1979年3月     

菝葜化学成分与药理作用的研究进展

查阅近几年国内外有关文献并进行分析,对菝葜的化学成分及药理作用方面的研究做简单综述,为菝葜的进一步研究开发奠定基础。     

介入治疗肝脏巨大海绵状血管瘤

目的 探讨肝脏巨大海绵状血管瘤（HHCH）的介入治疗方法与疗效。材料与方法 治疗肝巨大绵状血管瘤14例,经导管注入超液化碘油和平阳霉素（PYM）混合乳剂,最后用明胶海绵颗粒适量栓塞肿瘤周围小血管。结果 所有病例术前肝动脉造影均显示“枝上挂果,早出晚归”的异常血管湖样改变。术后8例肿瘤明显缩小,异常血管湖消失。结论 采用超液化碘油和PYM混合剂加适量明胶海绵微粒联合栓塞是治疗肝巨大海绵状血管瘤较好的方法之一。