血清浓度对高原体外肝细胞培养的影响

目的了解在高原环境条件下血清对培养肝细胞生长的影响,初步确定进行体外肝细胞培养的适宜血清浓度。方法采用已适应本地环境的成年家兔肝细胞进行体外单层培养,在常规RPMI1640培养基的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0%、2%、10%及20%),观察培养细胞形态、数量及培养上清中白蛋白和尿素水平变化。结果无血清组始终未见明显细胞贴壁及增殖,其他组细胞均于接种4 h开始贴壁,8 h开始增殖,10%血清组和20%血清组细胞均于6 d生长满瓶,并形成均匀的单层,而2%血清组细胞则于8 d生长满瓶;2%血清组的细胞数量峰值明显低于10%血清组和20%血清组;除无血清组外,培养上清中白蛋白和尿素水平均呈现显著升高,其中10%血清组和20%血清组的白蛋白及尿素峰值水平明显高于2%血清组。结论在高原环境条件下,体外培养肝细胞的生长、增殖及其生物学功能维持明显依赖于常规基础培养基中添加的血清浓度;对于普通肝细胞培养实验而言,10%血清浓度较为适宜。     

高原体外生物型人工肝装置的构建与初步评价

目的在高原环境条件下构建体外生物型人工肝装置,通过在线运行初步评价其安全性和稳定性,为应用于治疗急性肝衰竭实验研究提供依据。方法采用已适应本地环境的健康长白仔猪2头,雌雄不限,体质量分别为29.5 kg和31.0 kg。建立经颈外静脉至下腔静脉/颈外静脉插管组合血路,以驱动泵、血流管路、辅助加热器及含有培养肝细胞的生物反应器构建生物型人工肝装置,于体外血液循环中持续转流8 h,观察实验前后动物的一般状态、心率、血常规、尿常规及血液生物化学指标改变,有无出血倾向发生,血流管路凝血情况及培养肝细胞活性的变化。结果分离所得肝细胞量为2.72×109,肝细胞纯度为93%,肝细胞活率为96%。体外血液循环实验后,动物未出现明显不良反应,心率无显著改变,血常规、尿常规及血液生物化学指标均正常,未见出血倾向;血流管路凝血不明显;反应器内培养肝细胞活率,实验前后分别为(87.33±2.08)%和(84.67±3.79)%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论该方法构建的高原体外生物型人工肝装置较为稳定、可靠,动物耐受性好。     

肾盂输尿管离断法锥状成形术治疗先天性肾积水64例报告

先天性肾积水主要发生于肾盂输尿管连接部,其常见原因有输尿管狭窄、扭曲、高位连接、迷走血管等［‘］,由于梗阻隐匿致临床发病早晚不一,早期及时手术及选用合适的手术方法可较好地保护肾功能。我院自199o年1月一1997年6月共收治先天性肾积水64例,手术效果良好,现报告如下。1资料与方法1．1临床资料本组患者共cd例,其中男42例,女22例,年龄9－48岁,平均29岁。主要症状为单侧或双侧腰部胀痛sl例,肉眼血尿15例,肾绞痛12例,腰腹部们及包块8例,无症状而在体检时B超发现5例,伴发肾结石13例,马蹄肾2例。主要的诊断方法有B超启脉肾…     

一氧化氮在内毒素血症肝损害发病中的作用

目的：了解一氧化氮（nitric oxide,NO)在急性内毒素血症肝损害发病中的作用。方法：采用内毒素（脂多糖LPS）腹腔内注射,观察大鼠血清NO产物、ALT、AST及LDH水平变化和肝组织结构改变情况。结果：LPS给药后,大鼠血清NO产物、ALT、AST及LDH水平均呈LPS剂量依赖型升高,肝组织结构明显改变,并且NO产物水平与ALT、AST及LDH水平和肝组织病变程度平均积分均呈正相关。结论：在急性内毒素血症肝损害发病中,NO可能具有重要作用。并且血清NO产物水平可能作为该肝损害发生的早期观察指标之一。     

慢性硬膜下血肿的诊治策略

目的观察慢性硬膜下血肿临床病例的诊治效果,减少误诊率。方法对210例慢性硬膜下血肿临床病例采取了颅骨钻孔引流、小骨瓣剖颅血肿清除术,术后充分补液,小剂量甘露醇使用,观察疗效。结果住院时间最短8d,最长82d,平均为16d,随访3个月～2年,171例生活能自理,39例需要人照顾。结论早期CT或MRI检查可明显降低误诊率,颅骨钻孔引流、小骨瓣剖颅血肿清除术是慢性硬膜下血肿病例有效的治疗手段。     

对输尿管石街96例处理体会

我们于１９８９年５月至１９９８年５月采用ＰＮ—Ⅲ型肾结石体外碎石机治疗尿路结石２２６７例,其中９６例体外震波碎石（ＥＳＷＬ）术后出现超过输尿管长度三分之一的石街,现将其处理经过报告如下。资料与方法１－１－一般资料　男５２例,女４４例;年龄２２～７０岁;鹿角状结石者４２例,不完全铸状结石者３９例,输尿管结石１５例;其中１例巨大结石为６ｃｍ×９ｃｍ大小,ＥＳＷＬ术后石街形成最长者１３．５ｃｍ,最短者７ｃｍ。　　１－２－治疗方法输尿管石街形成后,我们采用冲击波再次冲击石街治疗,取俯卧位,冲击次数１００…     

图像分析法用于膀胱癌细胞DNA定量分析及其临床意义

定量分析膀胱癌细胞ＤＮＡ含量，为临床量化膀胱癌的异型性提供依据。方法以５μｍ石蜡切片ＤＮＡ染色，将该病理切片于图像分析仪上测定出膀胱癌细胞的ＤＮＡ含量，随访对应患者的生存与复发。结论图像分析法用于膀销癌细胞ＤＮＡ定量分析可有效地判断膀胱癌的异型性特点，可提高对膀胱癌恶性程度，预后及复发的认识。     

高原现场大鼠肝细胞的体外长期培养

[目的]在高原环境条件下初步建立体外肝细胞长期培养的一种方法。[方法]将体外分离的大鼠肝细胞以3×105/孔接种于用胶原包被的12孔塑料培养板内,总体培养时间为30 d,动态观察培养细胞形态、细胞数量及培养上清中总蛋白、白蛋白和尿素水平变化。[结果]细胞接种4 h开始贴壁,8 h开始增殖,6 d生长满瓶,形成均匀的单层;4 d细胞数量明显增多,8 d最多,达35.2×105/孔,然后细胞数量渐减少;14 d培养细胞胞浆内开始出现颗粒状物质和空泡,20 d培养细胞开始出现细胞脱壁现象,培养液中漂浮细胞增多;培养上清中总蛋白、白蛋白和尿素水平均呈现显著升高,其达峰值时间分别为10、8和10 d,然后渐降低,培养结束时仍然高于培养2 d时的水平。[结论]在高原环境条件下,体外长期培养肝细胞生长、增殖及其生物学功能良好,可以应用于高原肝脏生理及病理生理等相关方面的研究。     

高原体外肝细胞分离方法的研究

目的:探索高原环境下动物肝细胞的体外分离方法。方法:采用胶原酶体外两步灌流法先进行肝叶灌流,再将所得肝组织悬液分别置37℃温育不同时间,对比观测肝细胞产量、存活率、纯度及细胞接种后生长情况的差异。结果:未经温育组及温育10min、30min、60min组肝组织悬液的肝细胞产量分别为0.85、2.67、3.84和4.29×105/g湿重肝组织;肝细胞存活率分别为97.6％、96.9％、88.3％及71.5％;肝细胞纯度分别为96.2％、95.4％、96.7％及 95.8％;前两组细胞贴壁生长和增殖情况较好,后两组则较差。结论:在高原环境下先采用肝叶体外两步灌流后冉行胶原酶短时间(10min左右)温育处理是一种既可获得较满意的细胞活性,同时又可显著提高细胞产量的分离肝细胞方法。     

PM-2080K液压手术床控制失灵的检查处理

PM-2080K型液压手术床,是由日本MURANAKA生产,该手术床由PLC(可编程序控制器)控制,它可在被手术者不动的情况下,通过手持控制器,控制床面上下、前后运动,左右摇动,使其呈左侧位或右侧位,还可控制使某部分床面隆起,以利手术.由于供电过压故障致使该机损坏,动作均失灵.