利用RPS6启动子实现凝血因子的稳定表达

目的：筛选得到更优启动子,为血友病基础研究和基因治疗提供更有力的工具。方法：用生物信息学方法分析高丰度表达持家基因的启动子,遴选潜在候选启动子;构建GFP报告基因载体,以EF1α启动子为对照,考察新型启动子载体的包装效率及报告基因的转录和活性;装载F9基因,考察候选启动子的活力。结果：筛选得到最具潜力的RPS6启动子;RPS6pro-LV和EF1αpro-LV在慢病毒包装上没有差异,二者病毒滴度一致。在293T细胞中,RPS6proLV和EF1αpro-LV的转导效率、平均荧光强度与慢病毒剂量成正比。两种启动子在不同类型细胞中的转导效率均呈现293T>HEL>MSC的规律;相较于EF1αpro-LV,RPS6pro-LV在MSC细胞中具有更高的荧光强度;对感染两种启动子病毒的HEL细胞进行长期培养,发现RPS6pro-LV具有更稳定的活性。K562细胞RT-q PCR、Western blot及细胞培养上清FIX活性（FIX∶C）检测结果显示,EF1α-F9、RPS6-F9组FIX表达均高于空载对照组,EF1α-F9与RPS6-F9组之间FIX表达量无显著差异。结论：经筛选...     

老年人社区卫生服务需求调查

目的 探讨老年人社区卫生服务需求状况及影响因素.方法 通过整群抽样,对南昌市小金台社区60岁及以上老年人进行问卷调查,分析老年人卫生服务需求状况及影响因素.结果 老年人常就诊的医院以三级医院为主,占75.4%,去社区卫生服务机构就诊的仅占3.5%;对卫生服务需求表示不需要的占38.3%;年龄、职业、家庭人均月收入、医疗费用支付形式是影响卫生服务需求的主要因素.结论 应加大社区卫生服务的宣传力度,提高老年人对社区卫生服务的认知度和接受程度,建立有效的老年人养老机制和医疗保障制度.     

山东省55例血友病A患者基因检测及分析

目的 分析山东省55例血友病A(HA)患者基因突变类型,探讨HA发病机制。 方法 采用LD-PCR法检测山东省55例HA患者凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因的内含子22倒位突变,阴性者采用高通量测序法检测FⅧ基因的26个外显子,并与人类基因突变数据库比对。 结果 55例HA患者中内含子22倒位突变20例,其他35例共检测到28种突变类型,其中3例同时检测出2种突变,有6例未检测到基因突变。共发现c.2034_2062del、c.6052_6058del、c.6046_6047del、c.1009+1G>T、c.2997dupA、c.4001delT、c.1334T>A、c.1493G>A、c.557A>T等9种未被报道过的新突变。 结论 FⅧ基因突变是导致HA的根本原因。重型血友病患者中最常见的突变类型为内含子22倒位突变。编码区突变最常见的突变类型为错义突变。新发现的9种新突变丰富了基因突变谱,为探讨HA发病机制提供了基础。     

阿帕替尼联合替吉奥二线治疗晚期胃黏液腺癌观察

摘 要 目的：观察靶向药物阿帕替尼联合替吉奥二线治疗晚期胃黏液腺癌的疗效和安全性。方法: 二线治疗晚期胃黏液腺癌患者48例随机分为观察组和对照组各24例。对照组单用替吉奥方案化疗,观察组在对照组基础上加用甲磺酸阿帕替尼治疗。观察其不良反应及客观疗效。结果: 观察组客观有效率（ORR）为54.1%,疾病控制率（DCR）为83.3%;对照组ORR和DCR分别为33.3%和54.2%,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。两组药品不良反应均较轻,差异无统计学意义（P>0.05）。结论: 阿帕替尼联合替吉奥二线治疗晚期胃黏液腺癌近期疗效好,不良反应可耐受。     

高血压性多发脑出血2例

脑出血占急性脑血管病的1/5～1/3,其中80%以上有高血压病史,出血多为单发,多发性出血在临床上甚为少见,现将我院2005年9月～2007年2月收治的2例脑内多发出血患者的临床资料进行回顾性分析,现报道如下。     

鞍区生殖细胞瘤1例报告

1　病例介绍患者 ,女性 ,13岁 ,多饮多尿 4年伴双眼视力下降 ,视物不清月余 ,既往无眼痛、头痛、四肢抽搐、明显性格改变及二便失禁。体检 :右眼视力 0 .15 ,右眼颞侧偏盲。 MRI:蝶鞍扩大 ,鞍内及鞍上类圆形异常信号影明显强化 ,信号不均 ,边缘尚清楚 ,范围 3.3cm× 3.1cm,与颈内动脉紧邻 ,但动脉留空影存在。 CT:双眼环光完整 ,鞍区内见一类圆形高密度影 2 .9cm× 3.0 cm ,影像学考虑鞍区占位病变。全麻下行右眶上眉弓锁孔入路鞍区肿物切除术 ,术中见鞍区巨大占位 ,右侧视神经受压变性 ,左侧视神经受压 ,肿瘤呈暗红色 ,包膜完整 ,质软 ,…     

MECANISMES MOLECULAIRES IMPLIQUES DANS L＇ALTERATION DU PHENOTYPE DES CELLULES EPITHELIALES TUBULAIRES PAR LES CALPAINES EXTRACELLULAIRES

Objectif Rechercher les mecanismes moleculaires par lesquels des calpaines extracellulaires affectent l＇adherence et la mobilite des cellules epitheliales HK-2 derivees du tubule proximal humain. Mdthodes Western blot pour detecter le clivage des chaines α des integrines; dosage radioimraunologique pour mesurer V AMP cyclique intraceUulaire; fluorescence-activated cell sorting （FACS） pour tester l＇apoptose cellulaire. La morpholo- gie des ceUules HK-2 a ete observee et photographiee. Rdsultats （ 1 ） L ＇ exposition des ceUules HK-2 a la calpaine μ n＇a pas entratne de clivage des chaines α3 et αV des integrines; （2）V exposition des cellules HK-2 -2 la calpaine μ entrafnait une augmentation progressive de V accumulation intraceUulaire d＇ AMP cyclique（ P 〈 O. 05） qui etait associee une resistance ceUulaire a Vapoptose（ P 〈 O. 05 ） ; （3）Vaddition d＇un inhibiteur pharmacologique de la protdine kinase A （ PKA ） prevenait totalement les modifications d＇ adherence et de mobilite cellulaires induites par calpaine μ. Conclusion Les calpaines externalieses peuvent modifier V adherence et la mobilite ceUulaires via un mecanisme qui implique V accumulation d＇ AMP cyclique et 1＇ activation de la PKA. Par ces mecanismes, les calpaYnes externalisees pourraient jouer un role dans Vinduction de la reparation au cours de l＇insuffucance renale aigue.     

CAP联合甲羟孕酮治疗晚期乳腺癌25例疗效观察

乳腺癌的早期发现，早期诊断和早期治疗，使乳腺癌患者的生存率明显提高，但对于晚期乳腺癌患者的治疗，包括在检查时确诊的和在治疗后恶化进展的病例的有效治疗，仍是我们基层医院和经济相对滞后的广大西部边远地区的医生所面临的实际问题。     

888例急诊创伤病例调查分析

目的了解急诊创伤的病例分布特点,对致伤原因、创伤部位及创伤评分进行分析。方法对1999年3月24日～4月23日就诊的急诊机械性创伤患者进行调查。对创伤程度根据AIS85(损伤严重度评分)及ISS(简明损伤标准)评分。结果男女之间的创伤构成比有显著性差异(X     

肤阴洁杀菌性能的实验观察

洗必泰是一种低毒消毒剂,现广泛用于日常皮肤粘膜消毒和卫生保健,肤阴洁是以洗必泰配以中草药组成,我们在实验室对其杀菌效果进行了观察,现将结果报告如下. 1 方法 1.1 菌悬液制备试验前,分别将大肠杆菌(8099),金黄色葡萄球菌(ATCC6538),白色念珠菌(10231), 第3～14代划线接种于斜面培养基上,培养18～24h后取出,用磷酸盐缓冲液(pH 7.2～7. 4,简称PBS)洗下,制成菌悬液,置4℃冰箱中备用. 1.2 中和剂选择试验试验分6组.1组:消毒剂+菌悬液 ;2组:(消毒剂+菌悬液)+中和剂;3组:中和剂+菌悬液; 4组:中和产物+菌悬液;5组:菌悬液对照;6组:未接种培养基对照.结果以第1组不长菌或有远少于第2组菌数生长,第2组有菌生长,且菌数≥100 cfu*ml-1,第3、4、5组菌数相似且组间误差率≤10%,第6组无菌生长,可判为中和剂适宜. 1.3 杀菌试验试验为悬液定量杀菌法,试验时取5 ml消毒剂加0.1 ml菌悬液,混匀,作用至预定时间后取 0 .5 ml加入0.45 ml中和剂中,作用10 min后,取0.5 ml终样液于平皿中一式两份,倾注培养基后置恒温箱中培养48h后观察结果,计算杀灭率. 1.4 稳定性试验将消毒剂连同原包装置54℃恒温箱中14 d 后取出,于存放前后分别测定该消毒剂对大肠杆菌的杀灭效果.