pEGFP-bFGF重组质粒转染成骨细胞的条件优化

目的：旨在优化碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)重组质粒转染成骨细胞的条件以获得较高效率，为进一步研究bFGF基因转移在骨组织工程的应用提供基础。方法；将带有EGFP的bFGF重组质粒转染成骨细胞，改变DNA，脂质体的量以及转染时间，在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率。结果：在24孔培养板中，2μL脂质体介导1μg重组质粒转染10h既可获得较满意的转染效率。结论：通过优化转染条件可提高转染效率，可炒下一步基因工程细胞移植提供基础。     

重组人胱抑素C的原核表达及鉴定

目的 构建重组人胱抑素C(cystatin C,Cys C)的原核高效表达质粒,诱导表达并纯化获得Cys C重组蛋白.方法 根据大肠埃希菌编码蛋白的特性设计Cys C编码基因序列,人工合成目的 基因克隆至pET-22b(+)表达载体中,测序及酶切鉴定正确后诱导其在大肠埃希菌BL21中表达,所获得的包涵体蛋白经亲和层析纯化后采用SDS-PAGE及Western印迹鉴定.结果 酶切结果证实构建的表达质粒结构正确;测序结果显示克隆的基因序列所编码的蛋白与GenBank中的CysC氨基酸序列相符;SDS-PAGE及Western印迹结果证实获得的重组CysC融合蛋白分子量约为16 kD,经Ni2+亲和层析纯化获得纯度大于90 %的目的 蛋白.结论 建立了重组人Cys C的原核高效表达系统并获得了Cys C重组蛋白.     

重组恶性疟多表位杂合蛋白在大肠杆菌中的表达

将化学合成的恶性疟原虫保护性抗原复合基因 ( HGFSP)与表达载体 p RSET重组并转化大肠杆菌BL2 1 ,工程菌经 IPTG诱导后 ,HGFSP得到高效表达。 SDS- PAGE结果显示表达产物以非融合、可溶性的形式表达 ,分子量为 2 3k Da,占总菌体蛋白的 2 3.65%。Dot- ELISA和 Western- blot分析表明表达产物具有免疫原性。     

星形细胞瘤中Livin的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨一种新的凋亡抑止蛋白Livin在人脑星形细胞瘤中的表达及其对瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别采用免疫组织化学和原位细胞凋亡检测法检测人脑胶质瘤细胞中Livin、PCNA蛋白的表达和凋亡细胞,结合胶质瘤病理分级分析其相关关系。结果随着人脑胶质瘤WH0病理分级的增高,Livin、PCNA的表达强度明显升高（P〈0.05）,细胞凋亡率也明显升高（P〈0.05）,其中高度恶性组（WHO分级Ⅲ、Ⅳ级）均显著高于低度恶性组（WHO分级I、Ⅱ级）（P〈0.05）;随着Livin表达强度的增高,PCNA表达强度及细胞凋亡率均增高,但PCNA的表达比细胞的凋亡有更明显的增高趋势。结论人脑星形细胞瘤中Livin、PCNA的表达强度和细胞凋亡率异常升高;星形细胞瘤的发生和演变可能与Livin、PCNA及细胞凋亡的综合作用密切相关。     

低剂量尿激酶治疗急性冠状动脉综合征临床观察

目的：观察一次性中等剂量尿激酶（UK）治疗急性冠状动脉综合征（ACS）的临床效果。方法：将ACS患者48例随机分为常规治疗组（对照组）及常规治疗联合UK组（UK组）,观察其疗效。结果：同对照组相比,UK组明显优于对照组,且无明显副作用,差异有统计学意义。结论：中等剂量尿激酶一次性使用治疗ACS疗效显著,适合于基层医院开展应用。     

重组人血管生长素的鉴定

目的：为了鉴定自行制备的重组人血管生长素。方法：采用凝胶扫描法分析纯度;ELISA等方法检测特异性;鸡胚绒毛尿囊膜实验检测生物活性,并与商品化标准品进行免疫结合性的对比研究。结果：重组血管生长素纯度达96%,具有促进血管生长的生物活性;而且较标准品有理想的免疫结合性。结论：该重组人血管生长素可进一步的实验和临床应用研究。     

血清转铁蛋白受体检测在诊断妊娠缺铁性贫血中的应用

可溶性血清转铁蛋白受体 (serumtransferrinrecep tor,sTfR)是参与机体铁代谢的重要蛋白 ,能够反映细胞对铁的需要量 ,是检测人体缺铁性贫血的一个较新的指标。本实验室采用sTfR指标诊断妊娠妇女合并缺铁性贫血 ,以验证sTfR检测诊断妊娠合并缺铁性贫血的可行性 ,并对临床补铁作合理指导。1　资料与方法1.1　一般资料　在 2 0 0 1年 1～ 6月来我院产科正规产前检查的妊娠妇女中 ,随机选择妊娠合并贫血妇女30例 (贫血组 )和正常妊娠妇女 30例 (正常组 ) ,年龄2 4～ 30岁 ,平均 2 7岁 ,孕龄 32～ 36周 ,平均 34周 ,均未合并其它疾病。其标准…     

康复护理对腰椎间盘突出症的影响

目的探讨康复护理干预对腰椎间盘突出症患者的影响。方法对312例非手术治疗的腰椎间盘突出症患者随机分成对照组和观察组,每组各156例。对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗的基础上配合康复护理,6个月后观察其效果,观察两组患者疼痛症状好转情况。结果随访6个月,观察组治疗有效率为88.5%明显高于对照组的71.8%,差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者满意率、生活质量改善情况均高于对照组,复发率低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论康复护理能够提高腰椎间盘突出症的治疗效果,降低复发率,改善生活质量,具有较好的临床价值。     

自体骨髓加异体骨打压植骨治疗股骨头缺血性坏死56例分析

目的探讨自体骨髓加异体骨打压植骨治疗股骨头缺血性坏死的疗效。方法对近6 a来在忠县人民医院应用自体骨髓加异体骨打压植骨治疗股骨头缺血性坏死的56例患者进行分析。结果疼痛消失48例,疼痛缓解4例,疼痛缓解不明显4例。经1 a以上随访,Ⅱ期优良率100%,Ⅲ期早期优良率为72%。结论用自体骨髓加异体骨打压植骨治疗股骨头缺血性坏死具有创伤小、预防塌陷、降低病残率、延缓关节置换时间等优点,是缺血性坏死的一种较好的治疗方法,值得临床推广应用。     

高精度快速成型模型的制作精度及其体外细胞毒性

背景:快速成型技术在手术模拟与组织工程研究的应用日益广泛,而现场手术模拟和术前指导对模型的精度要求非常高,且在术中使用模型应要求其对人体无毒性。目的:评估不同后处理方法快速成型模型的成型精度及其细胞毒性。方法:采用选择性激光烧结技术制作标准圆柱体样品模型,并经浸蜡或树脂处理后,测量模型的高度和底面直径,评估其成型精度。然后采用噻唑蓝法研究不同后处理的模型件对小鼠成纤维细胞L929和小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的毒性作用。实验分为石蜡处理组、树脂处理组、阴性对照组(未处理模型)、空白对照组(新鲜培养基)及阳性对照组(体积分数5%的DMSO),培养2d后,490nm处测量吸光度,并计算其相对增殖率和评价细胞毒性等级。结果与结论:浸蜡、树脂处理后的模型以及模型原件的精度为95%～97%,误差为0.5～1mm。模型浸提液培养L929和MC3T3-E1细胞2d后,各实验组的细胞相对增殖率均大于80%,石蜡处理后的快速成型模型对L929和MC3T3-E1有较低的毒性作用,而树脂处理和未处理的模型对这两种细胞均无毒性作用,细胞毒性均为0～1级。