抗人血管生长素噬菌体基因工程抗体文库的筛选及可溶性抗体的制备

目的 制备高活性的可溶性抗人血管生长素噬菌体基因工程抗体。方法 采用ＥＬＩＳＡ等方法从文库中筛选高活性的抗体,再通过大肠杆菌ＨＢ２１５１使其以可溶性抗体形式表达,结果 获得了可溶性抗人血管生长素噬菌体基因工程抗体,结论 建立一种制备抗人血管生长素抗体的方法,该抗体在肿瘤的临床治疗上具有广阔的应用前景。     

有限切开间接复位治疗简单胫骨平台骨折:应用C型臂X线机透视与关节镜监视两种方法的比较

目的 探讨应用C型臂X线机透视和应用关节镜监视对简单胫骨平台骨折有限切开间接复位治疗的效果比较.方法 采用有限切开间接复位技术治疗58例简单胫骨平台骨折,其中31例在C型臂X线机透视下完成(C型臂组),27例在关节镜监视下完成(关节镜组).比较两种治疗方法在手术时间、软组织合并伤、术后早期并发症、内固定失败、膝关节功能(Hohl和Lcuk膝关节评分)等指标的差异.结果 两组患者手术时间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者术后早期并发症、内固定失败、膝关节功能评分等指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 对简单胫骨平台骨折行有限切开间接复位固定在应用C型臂X线机透视和应用关节镜监视指导下均能取得良好的治疗效果.C型臂X线机透视指导下复位结合有限切开间接复位内固定技术仍是治疗简单胫骨平台骨折的主要治疗手段,特别适合在不具备关节镜设备的县级以下基层医院开展.应用关节镜指导操作较应用C型臂X线机透视指导操作要相对复杂,手术时间长,需要专门训练.     

血管内皮生长因子受体KDR的靶向制剂的制备

目的：研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ(KDR)有特异结合活性的小肽,做为KDR靶向药物的先导物质的应用。方法：从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆,挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5,梯度ELISA、阻断实验和竞争结合实验测定小肽在体外与KDR的结合活性。将P5与生物素(NHS-d-Biotin)、BSA化学偶联,ELISA法和细胞免疫组化实验检测偶联物与KDR的结合活性。结果：化学合成的小肽P5在体外能特异结合KDR,Kd=168．6nmol／L,约是KDR与配体血管内皮生长因子(VEGF165)亲和力的1／30,P5能阻断VEGF165与KDR的结合活性,但不能竞争VEGF165与KDR的结合活性。将P5作为导向物质化学合成的P5-BSA-Biotin,在体外同样具有与KDR和细胞表面KDR分子结合的特性。结论：化学合成的小肽P5有望作为先导分子,在以KDR为靶点的肿瘤靶向治疗中得到应用。     

基于CT图像建立的小儿枢椎齿状突病理性骨折三维数字化模型

背景：在进行寰枢椎椎弓根内固定过程中,由于儿童的骨骼局部解剖结构复杂及椎弓根结构常存在变异,且置钉时极易损伤椎动脉或脊髓,导致严重后果。目的：基于CT扫描图像建立精确的小儿枢椎齿状突病理性骨折数字化模型,评估其在临床诊断及内固定治疗中的应用效果。方法：将1例2岁枢椎齿状突病变患儿的CT扫描结果导入三维建模Simpleware软件中进行三维重建,用逆向工程与快速成型原理制作个体化的骨骼模型实物并经树脂后处理,利用该模型指导内固定治疗。结果与结论：成功建立了小儿寰枢椎及齿状突的三维立体模型,可直接观察病变部位,精确测量置钉入点、角度及其他数据,对内固定方案设计起到了良好的指导作用,从而提高了寰枢椎椎弓根内固定治疗的安全性和准确性。     

人源性Fab段噬菌体抗体库的构建及抗人β1-AR抗体克隆的筛选

目的构建人源性Fab段噬菌体抗体库并筛选抗人β1-AR抗体克隆.方法通过RT-PCR从抗人β1-AR抗体阳性的扩张性心肌病(DCM)患者的外周血淋巴细胞中扩增出人IgG重链Fd段和κ、λ两轻链基因片段,将其克隆入噬粒pComb3中,构建人源性Fab段噬菌体抗体库,并利用噬菌体表面显示技术,以人β1肾上腺素受体细胞外第二环26肽(β1-ARECⅡ)为抗原肽,对此抗体库进行淘筛富集.结果成功地构建了库容量为1.4×106的人源性Fab段噬菌体抗体库,从此抗体库中筛选到了特异性抗人β1-AR Fab段噬菌体抗体阳性克隆.结论利用噬菌体抗体库技术可以获得表达抗人β1-AR抗体的重组克隆.     

重组质粒pEGFP-ING4的构建及其对MCF-7细胞凋亡的影响

目的检测ING4(inhibitor of growth 4)对MCF-7细胞凋亡的影响。方法从人胎盘总RNA中克隆人ING4基因,构建其真核表达质粒pEGFP-ING4转染MCF-7细胞表达ING4后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;荧光定量RT-PCR检测ING4、NF-κB、caspase-3、IL-8、Bcl-2及Bax基因的表达。结果构建的重组质粒转染可见目的蛋白融合表达,与对照相比MCF-7细胞凋亡率增高;ING4、caspase-3及IL-8基因的表达上调,NF-κB与Bcl-2/Bax基因的表达下调。结论成功从人胎盘组织克隆了ING4基因并构建其真核表达质粒在人MCF-7细胞中表达;ING4在人MCF-7细胞中能引起凋亡相关基因的改变并促进MCF-7细胞的凋亡,这为进一步研究ING4的抗肿瘤机制奠定了基础。     

高精度快速成型模型的制作精度及其体外细胞毒性

背景：快速成型技术在手术模拟与组织工程研究的应用日益广泛,而现场手术模拟和术前指导对模型的精度要求非常高,且在术中使用模型应要求其对人体无毒性。 目的：评估不同后处理方法快速成型模型的成型精度及其细胞毒性。 方法：采用选择性激光烧结技术制作标准圆柱体样品模型,并经浸蜡或树脂处理后,测量模型的高度和底面直径,评估其成型精度。然后采用噻唑蓝法研究不同后处理的模型件对小鼠成纤维细胞L929和小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的毒性作用。实验分为石蜡处理组、树脂处理组、阴性对照组(未处理模型)、空白对照组(新鲜培养基)及阳性对照组(体积分数5%的DMSO),培养2 d后,490 nm处测量吸光度,并计算其相对增殖率和评价细胞毒性等级。 结果与结论：浸蜡、树脂处理后的模型以及模型原件的精度为95%~97%,误差为0.5~1 mm。模型浸提液培养L929和MC3T3-E1细胞2 d后,各实验组的细胞相对增殖率均大于80%,石蜡处理后的快速成型模型对L929和MC3T3-E1有较低的毒性作用,而树脂处理和未处理的模型对这两种细胞均无毒性作用,细胞毒性均为0~1级。     

利用转移包皮瓣修补大面积阴囊缺损1例

患者男,32岁,于2005年7月旧于某医院行男性节育手术.术后第2天,阴囊肿胀、痒、剧痛,伤口内渗出黄色液体,第4天变为紫黑色、伴寒战、高热,第9天转入我院治疗.查体:一般情况尚可,阴囊前部皮肤坏死,脱落,辜丸精索裸露,分泌物恶臭,阴茎包皮过长.诊断为节育术后阴囊坏疽.     

挥发性酚和亚硝酸盐曲线的稳定性研究

基层疾病预防控制中心所承担的检测工作面广、工作量大,对于日常工作中的定量检测,大都是利用工作曲线来进行的。在进行原子吸收和色谱分析时每次都要进行标准系列的测定,以保证结果的可靠。但在常规的比色分析中,往往并不能做到每次分析都做工作曲线,而是同一项目同一批试剂共用一条曲线,这就要考虑到曲线的稳定性。     

心理干预对边远哨所战士心理健康的影响

目的 :观察心理干预对边远哨所战士心理健康的影响 ,为部队心理卫生保健提供依据。方法 :采用艾森克个性问卷 (EPQ)对边远哨所战士进行个性测定 ,定期对战士进行心理干预 ,采用症状自评量表(SCL - 90 )在干预前后进行心理卫生状况调查。结果 :与全军常模比较 ,边远哨所战士EPQ的P分、N分较高 ,E分较低 ,差异有显著性 (P <0 0 5,P <0 0 1 ) ,L分差异无显著性 (P >0 0 5)。心理干预前SCL - 90各因子分均较军人常模高 ,差异有显著性 (P <0 0 1 ) ;干预后SCL - 90除偏执外 ,其余各因子分与干预前比较明显降低 ,差异有显著性 (P <0 0 5,P <0 0 1 ) ,与军人常模比较无显著性差异 (P >0 0 5) ;心理干预前SCL - 90总分与EPQ量表的N分、P分及E分相关。结论 :边远哨所战士存在较多的心理问题 ,心理干预能有效提高战士心理健康水平