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背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。
目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。
设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成。
材料:L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供。α-MEM培养基为美国Gibco公司产品。
方法:复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14 d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成。将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1×106/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜。换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h。设立2组,实验组的板孔内加入含1×10-7 mol/L胰岛素的HEPES缓冲液(136 mmol/L NaCl,4.7 mmol/L KCl,1.25 mmol/L MgSO4,1.2 mmol/L CaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20 mmol/L HEPES,pH 7.4)孵育1 h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1 h。弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1 mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100 μL,孵育10 min后取出置于冰板上快速回收上清。
主要观察指标:考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度。
结果:诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构。使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3 h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似(P > 0.05);使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组(P < 0.05)。
结论:诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。 相似文献
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目的:检测化脓性结核病患者外周血和病灶处脓液T淋巴细胞亚群分类,探讨化脓性结核病患者免疫状态。方法:对30例结核病组患者外周血标本和病灶处脓液标本各30份应用流式细胞仪在单个核细胞水平检测T淋巴细胞亚群分类;选取20例健康体检者外周血标本20份作对照。结果:结核病组外周血中CD4^+淋巴细胞百分含量低于对照组,CD8^+淋巴细胞百分含量高于对照组,2组比较差异有统计学意义(P〈0.01);结核病组病灶处CD4^+淋巴细胞数高于对照组(P〈0.01),CD8^+淋巴细胞数与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:化脓性结核病的发生与T淋巴细胞亚群失衡有关,表现为外周血中CD4^+细胞数量减少,而局部病灶中CD4^+细胞增加。 相似文献
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目的:探讨腰大池置管持续外引流联合法舒地尔治疗蛛网膜下腔出血(SAH)的临床疗效。方法:按入院先后顺序将38例蛛网膜下腔出血患者随机分为两组,对照组采用隔天行腰椎穿刺脑脊液置换治疗,治疗组采用早期腰大池置管持续外引流联合法舒地尔治疗。结果:治疗组总有效率较对照组高(P<0.05);头痛缓解时间缩短(P<0.05);脑脊液恢复正常时间缩短(P<0.05);脑血管痉挛和脑积水的并发症发生率减少(P<0.05);再出血的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:早期腰大池置管持续外引流结合法舒地尔较传统方法治疗蛛网膜下腔出血,在预防脑血管痉挛、缓解头痛、防止脑积水等方面取得良好临床疗效。 相似文献
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通过复习肝段划分的历史演变过程及其研究进展,总结了影像学在不同轴向的切面上肝段划分的解剖标志,以期为临床工作中肝脏病变的准确分段及手术切除平面的精确定位提供有价值的资料. 相似文献
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目的:为发生于肝左内叶和右前叶的肝占位性疾病治疗提供超声解剖资料。方法:随机选取健康成人61例(男42,女19),利用彩色多普勒超声诊断仪经腹途径获取各断面超声声像图,并观察测量。结果:Ⅳa亚段内门静脉分支仅见1种类型;Ⅳb亚段内门静脉分支见2种类型,分别占62.30%、37.70%;右前叶门静脉分支见3种类型:a型占75.41%,b型占16.39%,c型占8.20%;左内叶两亚段间有48例可见肝静脉属支走行,占78.69%,其中肝中静脉属支占95.83%,肝左静脉属支占4.17%;右前叶两亚段间有54例可见肝静脉属支走行,占88.52%,其中肝中静脉属支占92.59%,肝右静脉属支占7.41%。结论:在超声水平,进一步证明右前叶两亚段间及左内叶两亚段间存在肝静脉属支,并可作为相邻两亚段间分界的解剖学标志。 相似文献
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目的利用64层螺旋CT三维重建技术观察肝脏门静脉右前支分支类型及亚段的解剖标志,为肝段划分提供准确的影像学依据。方法共165例腹部CT增强扫描资料,重组门静脉血管树,分析门静脉右前支分段的解剖标志并对右前支3级血管进行分型。结果 145例(87.9%)右前支门静脉3级分支之间存在一缺少血管的裂隙,此裂隙将右前支分为腹侧段和背侧段,其中42例腹侧段及背侧段分支间分别存在一缺少血管的裂隙,并再分为两个亚段;在这一裂隙中有一肝中静脉或肝右静脉走行。20例(12.1%)右前支分为上段和下段。右前支依据门静脉3级分支的不同分为5种类型,Ia型25.5%(42/165例);Ib型43.6%(72/165例);Ic型18.8%(31/165例);IIa型7.9%(13/165例);IIb型4.2%(7/165例)。结论 64层螺旋CT三维重建技术可以清晰显示门静脉右前支的分支类型及亚段解剖标志,为肝脏右前叶亚段手术提供可靠的影像学依据。 相似文献
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目的 探讨多层螺旋CT(MSCT)在输尿管变异及病变诊断中的应用价值.方法 回顾性分析51例输尿管变异或病变患者的MSCT检查资料,包括平扫、皮质期、实质期、排泄期扫描.对皮质期、实质期、排泄期的CT扫描图像分别重建,得到肾动脉、肾静脉、尿路图像.结果 51例患者中,外伤性输尿管破裂1例,先天性输尿管变异10例,输尿管结石14例,输尿管息肉2例,非特异性输尿管炎3例,输尿管结核3例,输尿管子宫内膜异位症1例,输尿管癌17例.所有患者均得到满意的肾动脉、肾静脉及尿路图像,图像诊断与病理结果或临床诊断符合.结论 MSCT可以得到优质图像,是输尿管变异及病变检查的首选方法. 相似文献