托品烷生物碱生物合成与代谢工程研究进展

托品烷生物碱是医药史上最古老的一类药物,常用的有莨菪碱（或其外消旋体阿托品）和东莨菪碱,它们都具有显著的抗胆碱活性,在现代临床上应用相当广泛。目前,市场上托品烷生物碱的供应完全依赖植物提取,但药源植物中生物碱含量往往较低,培育高含量托品烷生物碱的药源植物成为领域内共同追求的目标,利用生物技术提高发根或植株中托品烷生物碱含量成为次生代谢领域的研究热点。近10年来,托品烷生物碱的生物合成分子生物学研究取得了重要进展,代谢工程也获得了大量研究成果,本文对这两方面的研究进展进行综述,并对存在的关键问题和未来研究方向进行分析和展望。     

组织细胞坏死性淋巴结病误诊1例

女，28岁，因头昏，乏力0.5a，反复发热20d入院。0.5a前无明显诱因出现头昏，周身乏力，在当地某医院诊断为轻度贫血，给予门诊治疗，症状无好转。23d前因急性阑尾炎在当地医院行阑尾切除术，术后3d出现发热，t37.5-40℃左右，应用药物（药物不详）后体温仍反复，并伴纳差，1个月来体重下降10kg。门诊以高热待查收入。     

红景天苷的生物合成途径及生物技术研究进展

红景天苷是景天科红景天属植物最为重要的药效成分,由于其具有多种重要的药用功效而成为当今天然产物研究的热点之一。在全面总结前人研究成果的基础上,综述了红景天苷生物合成可能的3条途径:苯丙烷类代谢途径、酪氨酸脱羧代谢途径和酪氨酸转氨代谢途径;利用红景天组织培养、细胞培养和其他生物进行红景天苷生物合成的方法:以及基因克隆与遗传转化在红景天苷生物合成中的作用与研究现状等相关内容。最后展望了相关研究工作的发展前景。     

植物表达载体在三分三发根中的高效表达

目的建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法。方法由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统。将植物高效表达载体pCAMBI-A1304 导入经过“disarmed”改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌。取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根。选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养。经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304 是否整合到三分三发根基因组内。结果建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304 质粒共转化率达到32%。结论该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础。     

滇藏五味子化学成分研究

 目的 研究滇藏五味子（ Schisandra neglecta A.C. Smith ）的化学成分。 方法 用硅胶柱色谱、制备 HPLC 和制备 TLC 进行分离,通过理化性质和光谱数据进行结构鉴定。 结果 从滇藏五味子的茎藤中分离得到 9 个木脂素和 1 个三萜酸,分别是乙酰戈米辛 R （Ⅰ）、五味子酚乙（Ⅱ）、（ - ） - 戈米辛 L₁ （Ⅲ）、苯甲酰戈米辛 P （Ⅳ）、顺芷酰戈米辛 P （Ⅴ）、戈米辛 R （Ⅵ）、南五味子素（Ⅶ）、南五味子酸（Ⅷ）、表戈米辛 O （Ⅸ）、戈米辛 O （Ⅹ）。 结论 所有化合物均首次从该植物中分离得到。     

托品烷类生物碱生物合成分子生物学与代谢工程

莨菪碱和东莨菪碱属于托品烷类生物碱,是重要的抗胆碱类药物。托品烷类生物碱生物合成分子生物学和代谢工程一直是植物次生代谢工程研究的热点。随着植物功能基因组学和代谢组学的发展,托品烷类生物碱生物合成研究取得重要进展。重点对托品烷类生物碱生物合成途径、功能基因和代谢工程研究进展进行综述,并对可能存在的问题以及应用前景进行展望。     

大花红景天尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA的克隆及分析

目的 克隆大花红景天Rhodiola crenulata尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA,并利用生物信息学对其编码区与启动子进行分析。方法 以大花红景天为样品,采用优化的CTAB法提取大花红景天基因组DNA,并利用hiTAIR-PCR技术经过3次步移获得大花红景天UDPGT（RcUDPGT）基因DNA序列,并利用生物信息学对其进行分析。结果 克隆得到RcUDPGT基因的DNA序列2 977 bp,其中包含1 499 bp的编码区域（包括82 bp的内含子序列）和1 500 bp的编码区5’上游侧翼域序列（包括启动子区域）。生物信息学分析证明该序列为UDPGT基因且与其他植物UDPGT同源,具有亲水性且定位于细胞质中,三级结构预测表明该基因编码的蛋白具有UDPGT功能结合位点。启动子分析表明其存在光响应、厌氧响应、热响应、低温响应、压力与防御响应和花色素苷合成响应元件等。结论 克隆的RcUDPGT基因结构完整,具有典型的功能结合位点,为红景天分子生物学与代谢工程研究提供参考。     

大花红景天尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA的克隆及分析

目的 克隆大花红景天Rhodiola crenulata尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA,并利用生物信息学对其编码区与启动子进行分析.方法 以大花红景天为样品,采用优化的CTAB法提取大花红景天基因组DNA,并利用hiTAIR-PCR 技术经过3次步移获得大花红景天UDPGT (RcUDPGT)基因DNA序列,并利用生物信息学对其进行分析.结果 克隆得到RcUDPGT基因的DNA序列2 977 bp,其中包含1 499 bp的编码区域(包括82 bp的内含子序列)和1500 bp的编码区5,上游侧翼域序列(包括启动子区域).生物信息学分析证明该序列为UDPGT基因且与其他植物UDPGT同源,具有亲水性且定位于细胞质中,三级结构预测表明该基因编码的蛋白具有UDPGT功能结合位点.启动子分析表明其存在光响应、厌氧响应、热响应、低温响应、压力与防御响应和花色素苷合成响应元件等.结论 克隆的RcUDPGT基因结构完整,具有典型的功能结合位点,为红景天分子生物学与代谢工程研究提供参考.     

2型糖尿病治疗中低血糖性神经精神症状16例

1998~2003年,我科共收糖尿病治疗中低血糖所致的神经精神症状16例,现临床分析如下。1　临床资料1 1　一般情况　本组中男性 9 例,女性 7 例;年龄50~81岁,平均 64 岁;均为 2 型糖尿病患者,病程2~17年,长期使用降糖药物治疗。其中口服优降糖10例(包括消渴丸 3 例,同时口服二甲双胍 4 例),美吡哒3例,普通胰岛素皮下注射3例;并存冠心病6例,高血压 9 例,慢性支气管炎、肺气肿、肺心病2例,高脂血症8例。1 2　临床表现　16例均急性起病,就诊时间0 5~12 h,就诊时神经精神症状包括昏迷 5 例,嗜睡3例,躁动不安、多语 8 例。其中有一过性轻度心悸、…     

紫杉醇前体生物合成途径及生物技术研究进展

紫杉醇因其特殊的抗肿瘤作用成为当今天然产物研究的热门方向。综述了紫杉醇前体的生物合成途径及途径上的酶和基因;利用红豆杉愈伤组织和细胞培养生产紫杉醇的方法;前体饲喂提高细胞紫杉醇产量、通过内生真菌发酵生产紫杉醇及红豆杉遗传转化获取优质药源等相关研究。最后提出代谢工程策略是可能解决紫杉醇药源缺乏的理想途径。