tMfn2基因抑制血管平滑肌细胞增殖的作用与机制

目的 比较线粒体融合素基因2(Mfn2)和去除穿膜区序列的大鼠线粒体融合素基因2(tMfn2)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用,探讨tMfn2基因对VSMCs增殖的影响及其相关的信号通路.方法 用携带tMfn2基因和Mfn2基因的重组腺病毒(Adv-tMfn2和Adv-Mfn2)感染VSMCs,检测tMfn2蛋白和Mfn2蛋白在细胞中的表达水平;细胞计数法、四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测VSMCs的增殖;流式细胞术检测tMfn2基因对VSMCs周期的影响;Western blot分析各组磷酸化ERK1/2和磷酸化Raf-1蛋白表达水平的变化;采用方差分析对数据进行统计学处理.结果 Adv-tMfn2和Adv-Mfn2感染VSMCs后能有效表达出相应蛋白;细胞计数和MTT结果显示,tMfn2和Mfn2均使VSMCs增殖受到明显抑制(P<0.01),且前者较后者抑制效果更明显(P<0.01);流式细胞术结果表明tMfn2和Mfn2使多数VSMCs停滞于G0/G1期,细胞比例为(88.01±4.38)%和(67.43±6.21)%,可见tMfn2基因对细胞剧期的影响更明显(P<0.01).进一步研究表明tMfn2比Mfn2更能降低磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和磷酸化Raf-1(p-Raf-1)的表达水平(P<0.01).结论 与Mfn2基因相比,tMfn2基因更能显著抑制VSMCs增殖,使细胞周期停滞于G0/G1期.这一作用主要通过抑制Ras-Raf-ERK1/2信号通路,下调磷酸化Raf-1蛋白表达,进而抑制ERK1/2的磷酸化而实现.     

兔桡骨临界骨缺损模型的制备

背景：各种原因造成的骨折和骨缺损导致的骨不连一直是临床骨科修复的一大难题,相关产品质量的检验需要标准的骨缺损模型,然而骨缺损的临界长度至今仍无定论。 目的：建立兔桡骨骨缺损模型,以确定兔桡骨临界骨缺损长度。 方法：将18只雄性新西兰大白兔,随机分为6组,在双侧桡骨中段分别做12,13,14,15,16,17 mm的缺损,伤口缝合包扎但不固定。 结果与结论：大体标本和放射学观察显示,3个月内12,13,14,15,16 mm组的缺损均有修复完整的情况,但17 mm组无一例修复。组织学结果显示12,13,14,15,16 mm组缺损修复区有骨小梁与骨基质的形成、骨再生和再血管化、髓腔不同程度再通以及成骨细胞,17 mm组可见成骨细胞,破骨细胞,但未见骨再血管化和髓腔再通。故兔桡骨临界骨缺损长度为17 mm。     

颈动脉超声检测对老年高血压病的观察与研究

目的　探讨颈动脉粥样硬化程度与老年高血压病各级之间的关系。方法　用超声多普勒对 6 6例老年高血压病患者(Ⅰ级组 2 1例 ,Ⅱ级组 2 2例 ,Ⅲ级组 2 3例 )与 2 2例健康者行颈动脉超声检测。结果　高血压病组颈动脉内膜中层厚度 (CAIMT)随高血压病情加重而逐步增厚。颈总动脉内径 (CADIA)随高血压病情加重而逐步扩大 ,但Ⅰ级组与对照组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。对照组与高血压病三组斑块检出率依次为 5 .6 4 %、15 .5 7%、5 1.36 %、92 .85 % ,四组之间有显著性差异 (P <0 .0 1)。高血压病Ⅱ级组、Ⅲ级组收缩期峰值流速 (SPV)、舒张末期流速 (EDV)降低 (P <0 .0 5 ) ,血管阻力指数 (RI)、血管搏动指数 (PI)明显增高(P <0 .0 1)。结论　CAIMT增厚 ,CADIA扩大 ,粥样斑块形成 ,SPV、EDV降低 ,RI、PI增高是老年高血压病动脉硬化的可靠指标。早期检测和发现高血压病引起的动脉粥样硬化损害有助于预防并发症和指导治疗。     

力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原相关因子表达的影响

目的探讨力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原表达的影响。方法根据不同的处理方法将C2C12细胞分成对照组、EGTA、A23187、钙调蛋白抑制剂calmidazolium chloride、钙调蛋白(calmodulin)、一氧化氮合成酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、硝普钠(SNP)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-2抑制剂1、重组肝细胞生长因子(HGF)、抗HGF抗体、肝细胞生长因子受体C-met和抗C-met处理组。用Western blot法检测不同处理条件下NuRD脱乙酰酶复合物可重构成分(Mi-2)、组氨酰-tRNA合成酶(HRS)、DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)和Ku-70蛋白的表达变化。结果与对照组相比,A23187、calmodulin组、SNP、重组HGF组、重组C-met处理后,自身抗原表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),EGTA、calmidazolium chloride、L-NAME、抗HGF兔多克隆抗体、抗C-met兔多克隆抗体处理后,自身抗原蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。MMP-2组的自身抗原蛋白水平表达与对照组相比无显著性差异(P0.05)。结论细胞外钙离子和钙调蛋白、L-NAME和SNP、HGF、C-met参与介导成肌细胞自身抗原的表达。     

内质网应激与非折叠蛋白反应激活对骨骼肌纤维免疫行为的调控作用

目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)诱导的炎症环境中,骨骼肌纤维内质网应激(ERS)与非折叠蛋白反应(UPR)的激活对肌纤维免疫行为的调控作用。方法 体外培养的C57BL/6小鼠原代成肌干细胞,经马血清分化成多核肌管后分成以下10组：1.对照组;2.IFN-γ组;3.衣霉素(TM)组;4.毒胡萝卜素(TG)组;5.IFN-γ+4-苯基丁酸(4-PBA)联合处理组;6.IFN-γ+TG+4-PBA联合处理组;7.IFN-γ+4μ8c联合处理组;8.IFN-γ+TG+4μ8c联合处理组;9.IFN-γ+GSK2606414联合处理组;10.IFN-γ+TG+GSK2606414联合处理组,并进行对应的处理。利用Real-time PCR检测相关肌细胞因子基因水平;免疫荧光观察UPR关键分子：真核翻译起始因子2α(eIF2α)、肌醇需要酶1α(IRE1α)、转录激活因子6(ATF6)在肌纤维内的表达;Western blotting检测肌细胞相关免疫分子和肌细胞因子及UPR关键分子;Luminex分析肌纤维内促炎症的肌细胞因子的蛋白水平。结果 IFN-γ诱导的炎症环境中,肌纤维H-2K     

CDMNP-PEG-CD磁纳米颗粒诱导的骨骼肌反应性分析

目的　探讨SOMNP、CDMNP及CDMNP-PEG-CD磁性纳米颗粒置入小鼠骨骼肌所诱发的免疫反应性。 方法　以磁性Fe3O4与SiO2复合制备SOMNP, 将聚乙二醇（PEG）、环糊精（β-CD）分子链接SOMNP合成CDMNP,进一步添加聚假单胞烷（polypseudorotaxanes）合成CDMNP-PEG-CD磁性纳米颗粒。分别将3种纳米颗粒置入B6小鼠腓肠肌。组化染色、免疫荧光及FACS分析,分别评估不同置入时段SOMNP、CDMNP和CDMNP-PEG-CD纳米颗粒所诱发的肌毒性及肌内炎性渗出特征。 结果　SOMNP链接β-CD、PEG/β-CD及polypseudorotaxanes将限制纳米颗粒的肌内扩散,导致CDMNP和CDMNP-PEG-CD在肌内的滞留时间延长、材料邻近区肌细胞坏死、肌内单核/巨噬细胞聚集。较之CDMNP-PEG-CD, CDMNP纳米颗粒吸引更多T细胞进入肌组织。 结论　SOMNP、CDMNP及CDMNP-PEG-CD纳米颗粒均为潜在的体内免疫诱导物。polypseudorotaxanes修饰赋予CDMNP-PEG-CD纳米颗粒较好的体内相容性。     

兔桡骨临界骨缺损模型的制备

背景:各种原因造成的骨折和骨缺损导致的骨不连一直是临床骨科修复的一大难题,相关产品质量的检验需要标准的骨缺损模型,然而骨缺损的临界长度至今仍无定论。目的:建立兔桡骨骨缺损模型,以确定兔桡骨临界骨缺损长度。方法:将18只雄性新西兰大白兔,随机分为6组,在双侧桡骨中段分别做12,13,14,15,16,17mm的缺损,伤口缝合包扎但不固定。结果与结论:大体标本和放射学观察显示,3个月内12,13,14,15,16mm组的缺损均有修复完整的情况,但17mm组无一例修复。组织学结果显示12,13,14,15,16mm组缺损修复区有骨小梁与骨基质的形成、骨再生和再血管化、髓腔不同程度再通以及成骨细胞,17mm组可见成骨细胞,破骨细胞,但未见骨再血管化和髓腔再通。故兔桡骨临界骨缺损长度为17mm。     

急性重度毒鼠强中毒的抢救及护理体会

目的:探讨急性重度毒鼠强(tetramine)中毒的临床特点及抢救护理。方法:对60例毒鼠强中毒患者的临床资料进行回顾性分析。并观察护理效果。结果:60例患者在2周内临床症状基本消失,无并发症发生;住院时间7~21 d,平均14 d;治愈58例,占96.7%;死亡2例,占3.3%。结论:有反复呕吐、抽搐、昏迷症状及口服该药病史,可迅速做出诊断;迅速清除毒物、控制抽搐、解毒剂和血液灌流的应用及精心护理是抢救成功的关键。     

姜黄素对大鼠肺微血管平滑肌细胞周期和增殖能力的影响

目的探讨姜黄素对肺微血管平滑肌细胞增殖的影响,及其分子机制。方法原代SD雄性大鼠肺微血管平滑肌细胞的培养、鉴定、传代,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,RT-PCR检测mRNA的表达,Westernblot检测蛋白表达。结果姜黄素以浓度依赖的方式抑制肺微血管平滑肌细胞增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期。姜黄素处理后细胞内p21和p53的mRNA、蛋白水平表达增高、p300的蛋白表达以及p300介导的乙酰化H3和p53蛋白表达降低。结论姜黄素能够抑制肺微血管平滑肌细胞的增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期。其作用可能是通过下调p300活性和上调p53相关信号通路来实现的。     

慢性心力衰竭诊断与治疗新进展

慢性心力衰竭作为一种进展性临床综合征,严重威胁患者的生命,也给整个社会带来了沉重的经济负担。近年来,随着研究的不断深入,针对衰竭心肌生物学性质的新的诊断方法和治疗手段不断涌现。现结合近年来的循证医学证据和国内外的最新指南,综述了慢性收缩性心衰的诊疗进展,同时也简介了舒张性心力衰竭（射血分数正常的心力衰竭）的诊疗进展。