2009~2012年杭州地区甲型H1N1流感病毒HA与NA基因的进化分析

摘要：目的：研究杭州地区2009年至2012年甲型H1N1流感病毒血凝素（HA）与神经氨酸酶（NA）的基因进化特征,分析该病毒的遗传变异和抗原的分子水平转变。 方法：用RT-PCR分别扩增甲型H1N1流感病毒HA基因和NA基因片段并进行测序,用DNAMAN和MEGA 4.0生物信息学软件对HA和NA基因序列进行进化分析。 结果：建立的RT-PCR可成功检测HA(C)、HA(D)和NA基因,遗传进化分析结果表明,杭州地区甲型H1N1流感病毒的HA与NA氨基酸序列的亲缘系数与WHO推荐的病毒株及国内代表株的同源性均为98.9%~100%;三维构象结果表明,HA编码的蛋白质有5个位点发生改变,而NA编码的蛋白质仅发生2个位点改变。 结论：2009年至2011年杭州地区甲型H1N1流感病毒HA和NA基因序列与世界范围内流行的病毒参考株具有高度同源性,但HA与NA蛋白质表位存在某些氨基酸位点的改变。     

2011-2012年杭州市手足口病的病原构成及肠道病毒71型的分子流行病学特征

目的 探讨杭州市手足口病病原谱构成及其肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)的分子特征。 方法 采集210例疑似手足口病感染者的粪便标本及其相关临床资料,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)方法进行初步检测,利用RT-PCR扩增部分EV71和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16, Cox A16)阳性样本VP1基因区并测序分析。 结果 荧光定量RT-PCR检测表明,210例疑似感染者的粪便中, EV71、Cox A16 和其他肠道病毒的阳性率分别为60.95%(128/210)、21.43%(45/210)和9.05%(19/210)。10株EV71病毒VP1区核酸序列与JX509922、JX509924、JX509926、JX509927、 JX509928和 JX509929的同源性最高为95.7%~98.0%,且均属于EV71中 C4a亚型。 结论 EV71和Cox A16是杭州市儿童手足口病的主要病原体。因此加强EV71和Cox A16的监测特别是EV71的检测,有助于更好地预防和控制手足口病。     

手足口病患儿大便中病毒核酸检出时间观察

目的 观察手足口病患儿大便中肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)的持续存在时间;探讨手足口病患儿肠道排毒时间与病情严重程度的关系.方法 对113例EV71、CoxA16感染的手足口病患儿进行随访,每隔4～7d收集1次大便标本,用荧光聚合酶链式反应(PCR)法进行病毒核酸检测,直至大便病毒核酸转阴为止.并用Kaplan-Meier生存分析法进行分析.结果 113例患儿中,EV71阳性者65例,CoxA16阳性者44例,混合感染者4例.EV71组患儿在第1、4、6、10周的大便病毒核酸阳性率分别为100％、48.1％、17.2％、0;CoxA16组患儿在第1、4、6周的大便病毒核酸阳性率分别为95.5％、53.8％、0.两组大便病毒核酸阳性率的分布差异无统计学意义(x2=0.18,P＞0.05).EV71普通型组患儿在第1、4、6周的大便病毒核酸阳性率分别为100％、23.5％、0;EV71重症组患儿在第1、4、6、10周的大便病毒核酸阳性率分别为100％、62.4％、26.0％、0.EV71普通型组和重症组大便病毒核酸阳性率的分布差异有统计学意义(x2=5.689,P＜0.05).结论 手足口病患儿大便中病毒可存在较长的时间:EV71持续最长时问为10周;CoxA16持续最长时间为6周.感染EV71的手足口病患儿的肠道排毒持续时间与病情轻重相关.     

垃圾场附近饮用水污染情况分析

为了解垃圾场对居民生活饮用水水质影响,于2001年4月对长春市某垃圾场附近居民的饮用水卫生情况进行了调查,现将结果报告如下:1 现场调查情况 垃圾场位于长春市宽城区兴隆山镇团结村附近,距最近居民点约300m,距最远居民点(团结村8队)约1000m。在垃圾场与团结村之间有堤坝相隔,垃圾场西侧约50m处有“小白河”流过,居民区距小白河约350m。“小白河”水主要为上游居民和企业排放的污水、附近地表泾流及垃圾渗沥液汇入形成的水流,最后流入伊通河。     

浙江省急性腹泻患儿中肠道病毒检测分析研究

目的 探讨浙江省急性腹泻患儿的常见病毒组成.方法 采集5岁以下（≤5岁）急性腹泻患儿的811份粪便标本,采用ELISA方法检测A组轮状病毒（RV）,应用多重PCR方法同时检测B/C组RV、诺如病毒（NoV）、札如病毒（SaV）、肠道腺病毒（AdV）、星状病毒（AstV）,并利用RT-PCR对RV的阳性标本进行G、P分型.结果 811份粪便样本中,RV、NoV、SaV、AdV 及AstV总的阳性比例分别为25.52%、18.37%、4.44%、2.71%和1.23%;65份（8.01%）混合感染标本中以RV和NoV混合感染所占比例最大（56.92%）; 116份RV的G/P分型中,G3型（37.93%）、G1型（32.75%）和P[8]型（57.76%）是RV的优势型别,且G3/P[8]（27.59%）是混合感染最主要的组合.结论浙江省五种常见腹泻病毒及其混合感染的流行状况,为临床治疗和疾病监测提供参考价值.     

苏州大学附属第一医院2010～2011年细菌耐药性监测分析

目的分析苏州大学附属第一医院2010和2011年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法采用Kirby-Bauer(K-B)法对临床分离菌进行药敏试验,结果按CLSI 2010年版标准判断并采用WHONET 5.5软件进行数据分析。结果两年共分离细菌12 991株,其中革兰阳性菌3 100株(24.0%),革兰阴性菌9 891株(76.0%)。MRSA和MRCNS检出率分别为65.3%(581/889)和89.7%(979/1 091),未检测到万古霉素、利奈唑胺耐药株,粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为1.5%和4.3%。2010年大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌的产ESBLs率分别为67.0%、49.0%和30.0%,2011年则分别为66.1%、54.6%和37.6%。肠杆菌科细菌对亚胺培南仍保持较高的敏感率(>96%)。鲍曼不动杆菌的耐药率很高,仅对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低,为36.7%,亚胺培南耐药率>70%。铜绿假单胞菌对阿米卡星耐药率最低,为16.8%,其次是环丙沙星和头孢哌酮/舒巴坦(20.3%和20.8%),对亚胺培南耐药率为39.7%。结论 2010～2011年我院分离的细菌以阴性杆菌为主,细菌多重耐药性严重,万古霉素耐药肠球菌和碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌有增多趋势,应引起重视。     

组胺脱羧酶基因多态性与脑血管疾病相关性研究

脑血管疾病是目前世界性的多发病和常见病，具有致残率高、复发率高、死亡率高及并发症多等特点。全世界有40个国家脑血管疾病占死因的前三位，与冠心病、恶性肿瘤合称当每世界的三大死因。其发病之快、恢复之慢、死亡之多、致残之重，给人们带来巨大的身心痛苦和经济损失。因此，对脑血管病的防治研究变得特别重要。     

胃肠直针连续三层吻合分析

我院自1970年1月至1990年6月。对2425例胃次全切除,胃空肠吻合及246例单纯胃肠吻合,共计2671例患者,一直使用直针连续三层吻合,术后观察,效果良好,现总结如下。     

2007—2017年中国甲型H3N2流感病毒HA基因特征分析

摘要：目的：回顾性分析2007—2017年我国人感染季节性甲型H3N2流感病毒血凝素（hemagglutinin, HA）的分子特征,为我国甲型H3N2流感病毒的防控和疫苗的研发提供科学依据。 方法：从全球共享禽流感数据库（the global initiative on sharing avian influenza data, GISAID）中下载中国2007—2017年人感染季节性甲型流感病毒H3N2亚型毒株HA基因序列,利用MEGA7.0生物学信息软件分析其HA的分子特征。 结果：2007—2017年,中国甲型流感病毒H3N2亚型共1 991例,总体上病毒株数呈逐渐递增趋势。HA序列分析表明,甲型H3N2流感病毒的亚型存在多样性且多种亚型共存,3C.2a.1系的病毒株自2010年起逐年增多,2016年起成为最主要的流行优势株。1系、2系、3A系、3B系、3C.1系、3C.2系、3C.2a系、3C.2a.1系、3C.3系、3C.3a系和3C.3b系的同源性分别为94.0%～100.0%、96.7%～100.0%、94.3%～100.0%、94.9%～100.0%、94.6%～100.0%、95.4%～100.0%、95.1%～100.0%、93.3%～100.0%、97.5%～100.0%、95.3%～100.0%和94.6%～100.0%。HA蛋白关键位点N121K、G/R142K出现变异,268株发生N121K突变且主要来源于2017年的毒株,358株发生G/R142K突变且主要来源于2016年和2017年的毒株。 结论：甲型H3N2流感病毒的亚型存在多样性,多种亚型共存且不同年份间的优势流行株存在差异,这些将有助于疫苗的研发和疾病的防控。