可分泌性胰高血糖素样肽1融合蛋白cDNA克隆的构建

目的:为了探讨体内分泌表达胰高血糖素样肽1(GLP-1)治疗2型糖尿病的可行性,构建可分泌表达胰高血糖素样肽1的cDNA克隆。方法:实验于2005-09/2006-04在西安华广生物工程公司实验室进行。采用非对称互补引物/膜板法,体外合成两端含有酶切位点的胰高血糖素样肽1的cDNA片段,通过用NaeI和XhoI内切酶消化从NT4cDNA克隆中获取NT4的信号肽和前导序列,通过T4连接酶连接构建分泌表达胰高血糖素样肽1的cDNA克隆。该克隆的特点是确保信号肽酶识别点的正确性。结果:测序证实克隆的胰高血糖素样肽1的cDNA与GeneBank提供的序列完全一致;经限制性内切酶物理图谱方法证实已经成功地将胰高血糖素样肽1cDNA重组到含NT4的信号肽和前导序列下游。DNAsis软件分析结果表明该克隆编码具有信号肽酶识别点的NT4-GLP-1融合蛋白。结论:成功构建了能够分泌表达胰高血糖素样肽1的融合蛋白的cDNA克隆。     

亚低温与重型脑损伤病人外周血NSE关系的临床研究

目的研究亚低温对重型颅脑损伤病人外周血神经元特异性烯醇化酶(NSE)的影响以及亚低温对重型颅脑损伤病人的神经保护作用。方法将24例重型颅脑损伤病人分为亚低温组(12例)和对照组(12例)。前者进行亚低温治疗,对照组不进行亚低温治疗,其它治疗措施与亚低温组相同,于术前、术后次日、术后3d、术后7d均抽取外周血测NSE含量。结果亚低温组第3d和第7d的NSE分别为(33·33±9·44)和(20·11±5·09)ng/ml,明显低于对照组(40·47±6·00)和(33·63±6·23)ng/ml(P<0·05和P<0·01)。结论通过亚低温治疗能抑制NSE的释放,对重型颅脑损伤病人的神经元细胞和神经内分泌细胞继发性损害有保护性作用,在临床上值得推广应用。     

DNA序列分析法对新的B（A）型等位基因的检测分析

目的：对一ABO血型血清学定型违反一般血型遗传规律的家系进行研究,探讨B（A）血型的鉴定方法和新的B（A）型等位基因检测方法。方法：用血清学血型方法、PCR-SSP法和ABO基因第6及第7外显子直接测序的方法对B（A）血型和B（A）型等位基因进行检测。结果：该家系中血型血清学定型为AB型的成员DNA序列分析测定基因型为B（A）/O型,而PCR-SSP法检测AB型成员的基因型为O/O型。结论：应采用DNA序列分析法才能准确测定汉族人群中B（A）血型,而用PCR-SSP法检测可能引起误诊。     

孕妇剖宫产前后凝血4项与产后出血的相关性探讨

目的探讨孕妇剖宫产前后凝血四项指标的变化与产后出血的相关性。方法对48例剖宫产产后出血（出血量≥500ml）的孕妇及30例正常（出血量〈500ml）剖宫产孕妇作对照，采用日本Sysmex CA-6000全自动血凝分析仪检测剖宫产前后的凝血酶原时间（PT）／国际标准化比值（PT-INR）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（FIB）四项指标。结果48例剖宫产产后出血孕妇与30例对照组比较发现：孕子剖宫产前后PT／PTINR、APIT、TT明显高于对照组（P〈0．05），而FIB明显低于对照组（P〈0．05）；产后出血组PT／PT-INR、APTT产前明显高于产后（P〈0．05），FIB产前明显低于产后（P〈0．05），TT产前产后差异无显著性（P〉0．05）。结论凝血功能障碍是引起孕妇剖宫产产后出血的重要因素，在产前及分娩过程中，及时监测各项凝血指标对预测、预防和治疗产妇产后出血有重要意义。     

联合输注冰冻单采血小板与新鲜冰冻血浆治疗急性大出血的比较

严重创伤急性大出血患者失血量大、病情危重,输血抢救是主要方法之一。但短期内输入大量晶体盐、人造胶体及库存红细胞,会引起稀释性血小板和凝血因子减少,导致凝血功能障碍而难于止血。因新鲜血小板在(22±2)℃轻振荡保存有效期短,采集检验费时,不能满足临床危重患者急救需要。我们采用冰冻单采血小板与新鲜冰冻血浆(FFP)联合输注(部分病例加冷沉淀),报告如下。1资料与方法1.1临床资料:35例患者输注悬浮红细胞>10U时,随机分为输注冰冻单采血小板组(冰冻单用组,17例)与冰冻单采血小板联合FFP输注组(冰冻联合组,18例),其中男21例,女14例;…     

免疫印迹法检测血清抗Sa抗体方法的建立

目的建立抗Sa抗体的检测方法，研究抗Sa抗体对类风湿性关节炎(RA)的诊断意义。方法通过3组正交试验选择免疫印迹法检测抗Sa抗体的最适条件，并用该法检测RA、其他自身免疫病及健康人血清，用免疫胶乳凝集法检测血清中的RF。结果抗Sa抗体对RA的敏感性为42.7%，特异性为100%；RF对RA的敏感性为72.0%，特异性为79.2%。结论抗Sa抗体对RA的特异性高于RF与RF结合使用有利于RA的明确诊断。     

妊娠高血压综合征患者血清对内皮细胞 CD226分子表达和PDGF黏附分子的研究

目的探讨妊娠高血压综合征(PIH)患者血清对体外培养的内皮细胞表达CD226的影响,和CD226分子与PDGF表达的相关性。方法用间接免疫荧光染色结合流式细胞术分析观察妊高征患者血清对于体外培养人血管内皮细胞表达CD226的作用以及该血管内皮细胞和活化血小板黏附后CD226表达百分率的变化,用ELISA定量检测不同条件下活化血管内皮细胞分泌的PDGF,进一步探讨CD226分子和PDGF在妊高征血管内皮损伤中的作用。结果①妊高征患者血清刺激血管内皮细胞表达CD226百分率明显高于对照组(P<0·001)。②活化血管内皮细胞和活化血小板孵育后,血管内皮细胞表达CD226百分率明显降低(P<0·05)。③妊高征患者血清刺激血管内皮细胞分泌PDGF的量明显高于对照组并呈时间依赖性(P<0·001),与活化血小板作用后,分泌PDGF的量更进一步升高(P<0·005)。结论①患者体内存在某种非正常刺激因素,使血管内皮细胞敏感性增强,更易于活化。②PIH患者血清活化的血管内皮细胞与活化血小板孵育后表达CD226的百分率明显降低,提示CD226分子直接或间接参与了妊高征血管内皮细胞和血小板的黏附。③CD226与PDGF的表达有时段相关性。活化血管内皮细胞分泌PDGF增多,并与CD226表达的时间基本一致,提示其可能与CD226一起参与了妊高征形成的相关病理生理机制。     

亚低温对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶和血糖的影响

目的 研究亚低温对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和血糖的影响.方法 66例重型颅脑损伤患者随机分为治疗组和对照组,对照组除了不进行亚低温治疗外其他治疗方法与治疗组相同,分别于治疗前和治疗第3、5、7天测外周血NSE和血糖,3个月时进行GOS预后评分.结果 治疗组治疗后外周血NSE和血糖与对照组比较差异有统计学意义,GOS预后评分明显优于对照组(P＜0.05).结论 亚低温能降低重型颅脑损伤患者血清NSE和血糖,对神经元细胞起到良好的保护作用.以NSE和血糖作为量化指标,在一定程度上能反映亚低温的疗效并预测预后.