SEP、TES-MEP、EMG监测技术在胸椎结核患者行结核病灶清除及植骨内固定术中联合应用的价值

目的:探讨SEP、TES-MEP、EMG监测技术在胸椎结核患者行结核病灶清除及植骨内固定术中联合应用的价值.方法:选取2013年5月~2015年11月在本院行手术治疗的胸椎结核患者44例,所有患者术中均行经头颅电刺激运动诱发电位(TES-MEP)、体感诱发电位(SEP)和自发肌电图(EMG)监测,根据患者手术前后MEP和SEP波幅降低程度分组,比较不同分组患者术后神经功能恢复情况的差异,分析SEP、TES-MEP、EMG监测在其手术中的应用价值.结果:44例患者术后cobb角(17.69±7.25)低于术前(31.08±12.14),术后血沉(ESR)(20.19±6.13)低于术前(43.47±25.52),且差异具有统计学意义;根据患者手术前后ASIA分级,术后患者的神经功能与术前相比明显得到改善,且差异具有统计学意义;44患者手术后3个月影像学评价为优者29例,良者9例,尚可者6例;术后6个月时所有患者的影像学评价优良率达100%;术后3月MEP波幅降低程度<50%者的神经功能恢复优良率(91.43%)高于MEP波幅降低程度≧50%者,SEP波幅降低程度<50%者(96.97%)大于SSEP波幅降低程度≧50%(54.54%),且差异具有统计学意义;术中3例患者出现下肢肌肉肌电反应,均即时提醒医生避免刺激神经根,3例患者术后均未见明显的神经功能损伤.结论:术中TES-MEP和SEP波幅变化程度与术后神经功能恢复情况密切相关,TES-MEP、SEP、EMG监测可及时提醒医生进行脊髓功能和神经根的保护.     

Survivin在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与Bcl-xl蛋白表达的关系

目的：研究卵巢上皮性肿瘤中Survivin、Bcl-xl基因蛋白的表达及其相关性。方法：应用免疫组化SP法检测48例恶性肿瘤组织、20例良性卵巢肿瘤、10例正常卵巢中Survivin和Bcl-xl蛋白表达情况。结果：卵巢上皮性癌组织中Survivin蛋白表达率为60．42％，显著高于良性卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢组织的表达率20％及0（P〈0.01）；卵巢上皮性癌组织中Bcl-xl蛋白表达率为56．25％，也显著高于良性卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢组织的表达率15％及0（P〈0.01）。Survivin蛋白表达与卵巢上皮性癌的临床分期及组织学分级有关，与病理学类型、淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。Survivin蛋白表达与Bcl-xl蛋白的表达有显著相关（P〈0.01）。结论：Survivin基因可通过抑制癌细胞凋亡，对卵巢上皮癌的发生和发展起作用：Survivin基因可能与凋亡相关基因Bcl-xl在卵巢上皮癌的发展中起协同作用。     

人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立

目的研究C57BL／6J—HBV转基因小鼠的繁育规律,并从DNA、RNA、蛋白质、病毒学角度对该品系转基因小鼠进行综合分析。方法C57BL／6J-HBV转基因小鼠以两种不同的交配方式进行繁殖,利用PCR法对每一世代仔鼠检测其阳性率。利用RT—PCR和real-time PCR对转基因小鼠肝组织中的HBV DNA进行定性和半定量检测并对HBV基因在转基因小鼠中的转录特征进行分析。利用血清ELISA和Western Blotting方法,分析HBV病毒抗原在转基因小鼠中的表达和分泌特征。结果两种交配方式窝产仔数和离乳数存在显著性差异（P〈0．05）,互交后代小鼠的阳性率高于回交后代。4只乙型肝炎病毒转基因小鼠分别与正常C57BL／6J鼠杂交进行传代,其阳性率始终保持在40％～50%,表明C57BL／6J-Tg（AlblHBV）44Bri／J型HBV已稳定整合表达,并能可靠地遗传给下一代。转基因小鼠的肝组织可稳定表达的病毒抗原并可分泌入血。结论该转基因小鼠可长期稳定高表达HBV病毒抗原,可应用于乙型肝炎病毒相关研究。     

重组腺相关病毒介导的人血管内皮抑素基因治疗裸鼠子宫内膜异位症

目的 研究重组腺相关病毒介导的人血管内皮抑素(endostatin)基因对子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型的治疗作用.方法 构建携带人血管内皮抑素基因和增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组腺相关病毒载体rAAV2-endostatin-EGFP,,将2008年11-12月在天津医科大学第二医院妇科因子宫肌瘤行子宫全切除术的12例患者的子宫内膜种植于60只裸鼠的盆腹腔内,建立内异症裸鼠模型,1周后分为3组:治疗组20只,于异位病灶局部直接注射rAAV2-endostatin-EGFP;阴性对照组20只,于病灶局部直接注射空白载体rAAV2-EGFP;空白对照组20只,于病灶局部直接注射等体积的磷酸盐缓冲液.分别于给药后1、2、3周各开腹1次,观察裸鼠盆腹腔病灶,同时留取异位病灶组织,检测各组裸鼠异位病灶中人血管内皮抑素蛋白表达情况、腺体数、微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况;于给药后3周检测各组裸鼠血清中雌二醇、孕酮水平.结果(1)采用腹膜种植法建立内异症裸鼠模型,种植成功率达100%.给药1周后,治疗组裸鼠异位病灶平坦、中央下陷,光镜下可见腺体数减少,腺腔变窄,细胞稀疏、呈萎缩状态.(2)荧光显微镜下观察,给药后1、2、3周,治疗组裸鼠异位病灶组织腺体和间质内出现绿色荧光;而阴性对照组和空白对照组裸鼠异位病灶组织内未见绿色荧光.(3)各组裸鼠给药后1、2、3周的异位病灶内腺体数,治疗组分别为(7.8±1.9)、(7.0±1.5)和(5.5±1.7)个,均低于阴性对照组[分别为(10.1±1.7)、(10.2±2.0)和(9.8±2.4)个]和空白对照组[分别为(10.2±2.2)、(10.0±2.0)和(9.7±2.2)个],差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组裸鼠给药后1、2、3周的异位病灶内腺体数比较,差异也有统计学意义(P<0.05).(4)各组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶内的MVD,治疗组分别为(12.2±1.5)、(11.4±2.1)、(9.0±1.4)条,均低于阴性对照组[分别为(16.5±1.7)、(16.5±1.9)、(16.9±1.9)条]和空白对照组[分别为(16.2±1.6)、(16.0±1.6)、(16.3±1.7)条],差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶内MVD比较,差异也有统计学意义(P<0.05).(5)各组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶中VEGF的阳性率及表达强度,治疗组分别为35%、30%、25%和1.60±0.43、1.33±0.30、1.03±0.36,均低于阴性对照组(分别为80%、75%、85%和2.43±0.53、2.43±0.29、2.66±0.45)和空白对照组(分别为85%、90%、90%和2.36±0.53、2.64±0.57、2.53±0.52),差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组裸鼠给药后1、2、3周异位病灶中VEGF阳性率及表达强度比较,差异也有统计学意义(P<0.05).(6)给药后3周,治疗组裸鼠血清中的雌二醇、孕酮水平分别为(48±7)pmol/L、(61±8)nmol/L,分别与阴性对照组[分别为(50±9)pmol/L、(60±10)nmol/L]和空白对照组[分别为(48±7)pmol/L、(58±10)nmol/L]比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 携带人血管内皮抑素基因的重组腺相关病毒可抑制裸鼠内异症病灶的血管生成,从而抑制异位病灶的生长,而不影响体内生殖激素水平,抗血管生成基因治疗可能成为内异症治疗的新选择.     

干扰素γ与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EMs)是生育期妇女常见的良性疾患,发病率逐年增加.EMs的病因尚未完全明确.研究发现EMs患者腹腔液中的免疫细胞的变化最为明显,多种免疫细胞及因子的改变,对异位内膜的黏附、种植、增殖等各环节均起重要作用.干扰素(IFN)作为一种最早被发现的细胞因子,在人体免疫系统中起重要的调节作用.IFN-γ通过对各种免疫细胞、细胞因子及基因的调节在EMs的发生发展中起重要的作用.     

P27,P73和CyclinD1蛋白在子宫内膜癌中表达的相关性

目的:探讨P27,P73和CyclinD1在子宫内膜癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组化SP法对14例正常增殖期子宫内膜、19例不典型增生内膜以及43例子宫内膜癌组织中P27,P73和CyclinD1蛋白的表达进行研究。结果:在子宫内膜癌中,P27表达降低或缺失,P73和CyclinD1表达明显增高,与正常增殖期子宫内膜和不典型增生内膜相比差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。P27的表达缺失、P73的过表达与组织学分级有关,CyclinD1的高表达与手术-病理分期有关。有肌层浸润者P27,P73和CyclinD1的表达与无肌层浸润者差异均有统计学意义(均P0.05)。有淋巴结转移者P73和CyclinD1均明显高表达。子宫内膜癌中,P27与CyclinD1呈负相关(r=-0.3627,P0.05),P73与CyclinD1呈正相关(r=0.3923,P0.05)。结论:子宫内膜癌中P27表达缺失,P73和CyclinD1过度表达,联合检测可能成为子宫内膜癌高危人群早期筛查、判断内膜癌的生物学行为及评估预后的参考指标。     

内皮抑素基因治疗裸鼠子宫内膜异位症对Ang-2/Tie-2的影响

目的:探讨内皮抑素对裸鼠子宫内膜异位病灶中血管生成素2(Ang-2)/酪氨酸蛋白激酶受体2(Tie-2)系统表达的影响.方法:采用腹膜种植方法建立子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型共60只.造模1周后,随机分成内皮抑素组、空病毒组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照3组,每组各20只,观察各组镜下子宫内膜组织学变化,并采用免疫组化法检测各组异位内膜组织Ang-2及Tie-2的表达情况.结果:成功建立裸鼠EMs模型.空病毒组和PBS组腺体增生明显,间质血管丰富;内皮抑素组腺体萎缩,间质血管减少.Ang-2、Tie-2均在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中表达,定位于细胞质.Ang-2在内皮抑素组的阳性率(40%)显著低于空病毒组(75%)和PBS组(80%)(均P＜0.05);Tie-2在内皮抑素组的阳性率(45%)显著低于空病毒组(80%)和PBS组(85%)(均P＜0.05).结论:内皮抑素对裸鼠EMs模型异位病灶中Ang-2/Tie-2血管生成途径有抑制作用,为其抗血管生成治疗EMs的临床应用奠定基础.     

应用荧光原位杂交法检测宫颈脱落细胞中hTERC基因的扩增

目的:研究荧光原位杂交技术(FISH)在检测宫颈脱落细胞hTERC基因扩增中的应用,探讨其用于辅助诊断宫颈上皮内瘤变(CIN)的可行性.方法:分别对80例CIN妇女和20例正常妇女的宫颈脱落细胞标本,应用FISH技术(TERC/CSP3DNA探针)检测人类端粒酶(TERC)基因,分析CIN中hTERC基因的扩增状况;并将FISH检测结果与人乳头瘤病毒(HPV)16/18型DNAPCR检测结果比较,观察其检测效果.结果:CIN1级组、CIN2级组、CIN3级组和正常对照组发生hTERC基因扩增的细胞所占百分比分别为(7.41±1.96)%、(10.46±1.58)%、(16.85±2.09)%和(4.10±1.71)%,差别有统计学意义(P<0.05);FISH技术和HPV16/18型DNA PCR检测CIN的敏感性、特异性、约登指数及粗一致性分别为66.3%、100%、0.663、73%和50.0%、85%、0.350、57%.结论:FISH技术检测有助于探索hTERC基因扩增,CIN组中,hTERC基因的拷贝数明显增加,且hTERC基因扩增随细胞学病变的严重程度加重而增加;FISH技术可用于CIN的辅助诊断,且其检测效果优于HPV检测.     

重度妊高征胎盘的形态计量学观察

为探讨妊高征胎盘形态计量学特点，应用图像分析系统对２９例重度妊高征（妊高征组）和２９例正常妊娠（对照组）的胎盘床血管的胎盘绒毛进行形态计量学检测。结果：妊高征组胎盘绒毛具有合体细胞结节、细胞滋养细胞增生、绒毛基底膜增厚、纤维素样坏死和血管合体细胞膜的绒毛与对照组相比差异显著（Ｐ〈０．０５）。妊高征组胎盘绒毛直径、周长和面积参数均显著低于对照组（Ｐ〈０．０５）。妊高征组胎盘床螺旋动脉妊娠生理性改变缺