霉菌性阴道炎患者体内真菌分布、T淋巴细胞及相关细胞因子水平变化特点及意义

目的探讨霉菌性阴道炎患者体内真菌分布、T淋巴细胞及炎性细胞因子水平变化特点及意义。方法选取2017年1月—12月在我院治疗的霉菌性阴道炎患者182例作为观察组,同时选取女性健康志愿者110例作为对照组,检测2组受试者阴道分泌物中T淋巴细胞及细胞因子水平,同时对观察组阴道分泌物进行真菌培养。结果 182例患者中,病原菌以白色念珠菌为主,占43.41%;观察组阴道分泌物CD3~+、CD4~+和CD8~+T淋巴细胞水平分别为(52.12±10.45)%、(33.30±8.23)%和(25.10±9.22)%,明显低于对照组(P均0.05);观察组阴道分泌物IL-2、TNF-α和IFN-γ分别为(7.21±1.42)pg/ml、(17.90±4.55)pg/ml和(19.81±4.50)pg/ml,明显低于对照组(P均0.05),而IL-4和IL-10分别为(40.32±8.33)pg/ml和(25.66±4.33)pg/ml,明显高于对照组(P均0.05);复杂性霉菌性阴道炎患者阴道分泌物CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞以及IL-2、TNF-α和INF-γ水平明显低于普通霉菌性阴道炎患者(P均0.05),而IL-4和IL-10明显高于普通霉菌性阴道炎患者(P均0.05)。结论霉菌性阴道炎病原体以白色念珠菌为主,Th1/Th2细胞介导的细胞免疫参与了疾病过程。     

雾化吸入粉防己碱对博来霉素致肺纤维化大鼠的药效作用

目的 探讨雾化吸入粉防己碱对博来霉素诱导肺纤维化大鼠模型的药效作用。方法 将100只SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、粉防己碱（5 mg·mL^-1）雾化10、30 min（单次实际给药剂量为0.072、0.220 mg·^kg-1）组，每组10只，并采用气管注入博来霉素方法制备大鼠肺纤维化模型，造模24 h后雾化给药。连续给药第14、28 d，观察大鼠肺系数、肺功能，HE染色后观察肺组织病理，Masson染色后观察胶原纤维变化，天狼星红染色检测大鼠肺组织中I型与III型胶原纤维；并采用Western blotting检测肺组织中波形蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达；酶联免疫吸附（ELISA）法检测大鼠肺组织中羟脯氨酸（HYP）和纤连蛋白（FN）含量。结果 粉防己碱雾化后中位粒径为2.98 μm；给药28 d时效果更优，与模型组比较，雾化30 min组的气道阻力显著降低（P＜0.05），肺顺应性显著升高（P＜0.05），肺系数显著降低（P＜0.05）；肺泡炎症评分、肺纤维化评分显著降低（P＜0.05），I型和III型胶原纤维明显减少； Vimentin和TGF-β 1的表达显著下调（P＜0.01）；显著下调HYP和FN的水平（P＜0.05）。结论 雾化吸入粉防己碱具有抗大鼠肺纤维化作用，其中雾化给药28 d效果更优。     

咖啡酸分子烙印聚合物的制备及其在金银花抗炎作用评价中的应用研究

目的 制备咖啡酸分子烙印聚合物（MIP）并特异性地去除金银花提取物中的咖啡酸，考察咖啡酸去除前后金银花提取物抑制前列腺素E₂（PGE₂）释放的变化，从整体上评价其抗炎活性。方法 采用溶胶-凝胶法，以粒径为62~105 μm的二氧化硅微珠为载体、咖啡酸为模板分子、(3-氨丙基)三乙氧基硅烷为功能单体、四乙氧基硅烷为交联剂、四氢呋喃为溶剂，合成了咖啡酸MIP。以此MIP作为液相色谱固定相，以甲醇-乙酸（500∶1和9∶1）为流动相，特异性去除了金银花提取物中的咖啡酸。通过脂多糖刺激巨噬细胞RAW264.7释放PGE₂实验评价去除咖啡酸前后金银花提取物的抗炎作用。结果 溶胶-凝胶法制备的咖啡酸MIP能够从复杂体系中特异性地分离和富集微量的咖啡酸，对咖啡酸的容量因子和烙印效率分别为15.8和9.7，最终从金银花提取物2.6 g中分离了咖啡酸146 μg，纯度为92%，回收率为89%。金银花提取物和去除咖啡酸的提取物在质量浓度为100、200、400 μg·mL^–1时对脂多糖诱导的RAW264.7细胞释放PGE₂的抑制率分别为5.8%、35.6%、62.5%和5.4%、13.3%、57.5%，去除微量咖啡酸以后的提取物在3个质量浓度时的抑制率较金银花提取物均有所降低。结论 咖啡酸是金银花提取物抗炎活性的一个重要成分，咖啡酸分子烙印聚合物可以实现金银花提取物中微量咖啡酸的特异性分离，分子烙印技术能够在保证中药完整性的前提下评价中药的药理活性。     

痰热清注射液干预慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的蛋白组学研究

目的 研究痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）模型大鼠的治疗作用，同时采用串联质谱标签（tandem mass tags，TMT）定量蛋白质组学探讨其可能的作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松（4 mg/kg）组和痰热清注射液高、中、低剂量（4、2、1 g/kg）组，除对照组外，其余各组制备COPD模型，各给药组ip相应药物。连续给药90 d后，检测肺功能和肺泡灌洗液中细胞因子水平；采用苏木素-伊红和天狼猩红染色观察肺组织病理变化；通过TMT定量蛋白质组学分析对照组、模型组、痰热清注射液中剂量组大鼠肺组织差异蛋白。结果 与对照组比较，模型组大鼠自主活动和精神状态均有所降低，肺功能的顺应性降低（P<0.001），阻力增大（P<0.001），肺组织炎症细胞浸润，肺泡腔扩大，气道壁胶原纤维沉积，表明COPD模型制备成功。与模型组比较，痰热清注射液组大鼠肺功能明显得到改善（P<0.01、0.001），肺泡灌洗液中炎症因子水平明显降低（P<0.05、0.01、0.001）。蛋白组学分析结果显示，痰热清注射液中剂量组和模型组共有61个差异蛋白，差异蛋白与细胞的坏死、凋亡、自噬等信号通路密切相关。结论 痰热清注射液能够明显改善COPD模型大鼠的肺功能等症状，其机制与细胞的坏死、凋亡、自噬等信号通路密切相关。