硼替佐米耐药多发性骨髓瘤细胞株KM3/BTZ的建立

目的   建立人多发性骨髓瘤耐硼替佐米的细胞株,并对其生物学特性及耐药机制进行初步探讨。方法   采用浓度梯度递增法,以人多发性骨髓瘤KM3细胞株为亲本,建立耐硼替佐米的多发性骨髓瘤细胞株,绘制生长曲线,并计算倍增时间;MTT法鉴定耐药细胞株的耐药性;RT-PCR方法检测MDR-1在亲代和耐药细胞株中的表达情况。结果   成功建立耐硼替佐米的多发性骨髓瘤细胞株KM3/BTZ,耐药倍数为19.7倍。与亲代细胞相比,耐药细胞株倍增时间延长（P＜0.05）。多药耐药相关基因MDR-1未参与耐药性的发生。结论   成功建立人多发性骨髓瘤耐药细胞株KM3/BTZ,耐药性稳定,为研究耐药机制及逆转耐药提供了理想的模型。     

超声-微波协同萃取灵芝多糖最佳工艺研究

目的 获得超声-微波协同萃取灵芝多糖最佳工艺.方法 以苯酚-硫酸法测定灵芝多糖的含量,用正交试验考察灵芝多糖的最佳提取工艺.结果 灵芝多糖的最佳提取工艺是提取温度75℃、料液比1:10、浸提时间30min,在此条件下灵芝多糖的提取率为0.95%.结论 利用超声-微波协同萃取灵芝多糖省时,提取率高,该方法为提取灵芝多糖提供了新途径.     

40例形态学和免疫学分型不一致的急性白血病分析

选用一组国产敏感特异的McAb,采用APAAP桥联免疫酶标组化染色技术对40例形态学和免疫学分型不一致的急性白血病进行了分析。结果表明,32例形态学难以分类或虽能分类但与免疫学分型不同的急性白血病均有明确的细胞系列特异性标记表达。其中B-ALL14例、T-ALL1例、ANLL2例、同时表达T和B系相关分化抗原的双标-ALL 11例、HAL4例,同时表达淋巴和髓系相关的特异性标记。有8例未测到任何标记抗原,归属于急性未分化型白血病。     

抗人胸腺细胞单克隆抗体2G_2B_2和2G_2C_2的制备及特性鉴定

用杂交瘤技术制备２株单克隆抗体（单抗）２Ｇ２Ｂ２、２Ｇ２Ｃ２。经研究发现,它们主要与胸腺细胞、脐血及ＰＨＡ激活的外周血单个核细胞等反应;免疫组化显示其主要作用于皮质胸腺细胞;与造血系统中分化早期的瘤细胞、骨髓瘤细胞等反应阳性率较高。生物学特性鉴定结果提示,单抗均属免疫球蛋白ＩｇＧ１亚类,腹水效价达１：１２８０００,所识别抗原分子量为４５／４６ＫＤａ,无抗原调变作用。故２Ｇ２Ｂ２、２Ｇ２Ｃ２是类似ＯＫＴ１０的抗ＣＤ３８单抗,但竞争抑制结果表明三者分别作用于不同的抗原决定簇,即２Ｇ２Ｂ２、２Ｇ２Ｃ２是两个抗ＣＤ３８新单抗。     

再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞HLA—DR抗原及CD57抗原的表达

利用ＡＰＡＡＰ桥联免疫酶标技术，对４２例再生障碍性贫血（ＡＡ）患者外周血淋巴细胞进行了ＨＬＡ－ＤＲ抗原及ＣＤ５７抗原检测。结果发现ＡＡ患者外周血ＨＬＡ－ＤＲ＾＋细胞明显高于正常对照组，ＣＤ５７＾＋细胞却较正常对照为低，这种异常经ＡＴＧ、ＧｓＡ等免疫抑制剂治疗后可得到纠正。本研究的结果表明ＨＬＡ－ＤＲ＾＋细胞的增多及ＣＤ５７＾＋细胞的减少在ＡＡ的发病机理中可能起着重要作用。     

鼠抗人CD3T淋巴细胞单克隆抗体治疗再生障碍性贫血免疫调节作用的临床观察

目的探讨特异性细胞免疫抑制剂鼠抗人CD3T淋巴细胞单克隆抗体(CD3单抗)治疗再生障碍性贫血(再障,AA)的机制及疗效.方法22例AA患者中位年龄26岁,其中重型再障(SAA)15例,慢性再障(CAA)7例.既往未经特殊治疗12例,既往治疗无效的10例中,已加用环孢素(CsA)≥3个月7例.CD3单抗给药方法5 mg静脉滴注,每天1次,连用10d为1疗程.采用APAAP法测定T细胞表面抗原的表达;应用ELISA法测定外周血单个核细胞培养上清中细胞因子的含量.结果随访3～22个月,有17例骨髓象明显好转,外周血白细胞平均升高1.61×109/L,中性粒细胞升高0.77×109/L,血红蛋白升高42g/L,血小板升高45×109/L(P均＜0.01).其中,6例基本治愈,7例缓解,4例明显进步,总有效率为77.27%,5例无效;T淋巴细胞亚群的变化CD4/CD8比值由1.20±0.41上升至1.44±0.39、HLA-DR的表达率由(32.1±14.7)%下降至(14.6±5.3)%(P均＜0.01);体外培养患者外周血单个核细胞分泌下列淋巴因子含量的中位数值(U/ml)肿瘤坏死因子α(TNFα)、干扰素γ(IFNγ)与白细胞介素-2(IL-2)分别由252、796和94降至146、524和48(P均＜0.01).不良反应单抗治疗期间,全部病例均发热,6例出现胸闷、呼吸困难,但治疗期间无1例死亡.结论与其他常用的免疫抑制剂相比,CD3单抗治疗AA疗效快、有效率高且安全性较好,其免疫调节作用特异性强.     

非何杰金淋巴瘤患者基因克隆性标记的研究

对非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）２５例、良性反应性淋巴结细胞增生１０例，在单克隆抗体免疫学分型的基础上，用体外基因扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排。结果表明，ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分析有助于从分子水平上确定肿瘤细胞的来源及其分化阶段，是恶性淋巴瘤可靠的分子克隆性标记，对鉴别诊断良、恶性淋巴结肿大疾病有重要的临床应用价值。     

恶性阻塞性黄疸患者外周血T淋巴细胞亚群及可溶性白细胞介素Ⅱ受体含量...

采用单克隆抗体免疫酶标技术及双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定了３６例阻塞性黄疸患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群及可溶性白细胞介素Ⅱ受体。结果显示恶笥阻塞性黄疸患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群处于紊乱状态，Ｔ４细胞减少，Ｔ８细胞增多，Ｔ４／Ｔ８降低；ＳＩＬ－２Ｒ含量增加，与良性细胞阻塞性黄疸组相比，有显著性差异。