珠子参ISSR-PCR反应体系的建立及优化

目的建立珠子参的ISSR-PCR适宜扩增反应体系和程序,为其深入研究奠定基础。方法采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取珠子参总DNA,并用正交设计实验对其ISSR反应体系条件进行筛选及优化。结果提取的基因组DNA纯度和完整性较好,A260/A280值在1.8².0之间,DNA无降解现象,可满足ISSR-PCR扩增要求。珠子参ISSR分析的最适反应体系为:在20μL PCR反应体积中,含10ng模板DNA、0.20mmol·L-1dNTPs、1.5μmol·L-1引物、3U TaqDNA聚合酶、2μL10×PCR Buffer、3mmol·L-1 Mg2+。扩增程序为:95℃预变性5min,94℃变性30s,58℃退火30min,72℃延伸1min,循环40次,72℃延伸10min。由此可获得带型丰富和清晰可辨的DNA指纹图谱。结论建立的ISSR-PCR反应体系可用于研究珠子参的遗传变异和遗传多样性。     

不同产地南五味子质量分析研究

通过对我省不同产地南五味子样品挥发油、木脂素的含量测定及色谱鉴别分析。结果表明,不同来源的南五味子样品质量存在一定差异。     

指纹图谱结合响应面法研究醋制南五味子炮制工艺

目的 优化南五味子醋制的炮制工艺.方法 以南五味子指纹图谱共有色谱峰峰面积的综合评分为指标,采用3因素3水平的Box-Behnken响应面实验设计,考察加醋量、闷润时间、蒸制时间不同因素对醋蒸南五味子炮制工艺的影响,优选最佳炮制工艺.结果 采用Design Expert 8.05软件对数据进行分析,建立综合评分与影响因子的多元二次回归方程.多元二次回归方程预测南五味子醋制最佳炮制条件为每100 g药材加醋量为28.10 g,闷润时间1.95h,蒸制时间3.90 h.结论 采用优选的炮制工艺能从整体化学成分角度保证醋制南五味子炮制质量.为制定其饮片的质量标准和临床应用提供依据.     

珠子参饮片质量标准研究

目的:建立珠子参饮片质量标准。方法:采用性状、显微、TLC进行定性鉴别,高效液相色谱法测定人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa的含量。同时测定了水分、灰分和酸不溶性灰分等。结果:对四川、云南、贵州等省区所产珠子参饮片中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量进行测定,结果显示,各样品中人参皂苷Ro平均含量为7.19%,竹节参皂苷Ⅳa的平均含量为3.16%。结论:本法操作简便、稳定性好,可用于珠子参饮片中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量测定;制定的质量标准规范,结果准确。     

不同产地珠子参生药鉴定研究

目的 对珠子参西北主产区的陕西和西南产区的贵州所产的珠子参药材进行生药鉴定研究,为该药材及其同属药用植物的鉴别及进一步开发研究提供依据.方法 运用性状和显微鉴别方法对珠子参药材进行鉴定研究.其中显微鉴别分别对根茎的节和节间横切面、粉末的显微特征进行了描述.结果 对两个不同产区珠子参的性状和显微特征进行了详细描述,并附有相应的组织、粉末的显微彩色图谱.结论 不同产区珠子参药材的性状及显微特征有一定差异.     

珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定

目的 建立高效液相色谱法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量.方法 供试品用60%乙醇超声提取40min,滤过,取续滤液作为供试品溶液;高效液相色谱仪测定峰面积.色谱柱:Inertsil ODS-sp(5μm,4.6 mm×150 mm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(35:65);柱温:30℃;流速:1.0 ml/min;检测波长:203 nm.结果 珠子参中竹节参皂苷Ⅳa与其他组分分离良好,保留时间12.5 min.竹节参皂苷Ⅳa对照品线性范围1.007 6～10.076μg,r = 0.999 9,平均回收率为103.46%,RSD为0.81%.结论 该法操作简便,方法 稳定性,分离度好,灵敏度高,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定.     

长春七滴丸制备工艺研究

目的优选长春七滴丸的制备工艺。方法通过试验,选择适宜的基质、药物与基质配比、滴制温度和冷却液温度。以光滑圆整度和丸重变异系数为评价指标,对滴距、滴口径及滴头厚度和滴速等因素进行正交试验,优选最佳制备工艺。结果最佳工艺为A1B2C3,即滴距为6cm、滴口径为3/4.5(mm/mm)、滴速为50d.min-1,聚乙二醇-6000与聚乙二醇-4000的比例为10:1,药物与基质配比1:2,滴制温度为70℃,冷却液温度为5～10℃。结论本法工艺简单、可行、稳定、重现性好,符合2005年版《中国药典》对滴丸制剂的要求。     

长春七的生药鉴定研究

目的 对陕西习用中草药长春七药材进行生药鉴定研究,为该药的进一步深入研究与开发利用提供依据。方法运用性状、显微和薄层色谱方法对该药材进行鉴定研究。结果得出长春七的性状、显微和薄层色谱特征,绘制了组织、粉末的显微详、简图。结论为长春七资源学研究、进行准确鉴定及进一步研究提供有益的基础资料。     

HPLC法同时测定维血宁中3种化学成分的含量

目的：建立同时测定维血宁中虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷及大黄素含量的方法。方法：应用HPLC法测定,色谱柱：Kromasil C18 Column（4．6min×250mm,5μm）;流动相：乙腈-0．1％磷酸溶液,梯度洗脱;流速：1．0mL·min-1;柱温：30℃;检测波长：288nm。结果：虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷和大黄素的线性范围分别为0．09-0．72μg（r=0．9984）、0．4825-3．86μg（r=1．0000）、0．2675-2．14μg（r=1．0000）;平均加样回收率分别为98．9％（RSD％=2．8％）、99．6％（RSD％=0．16％）、98．1％（RSD％=0．44％）。结论：该方法同时测定维血宁中的虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷和大黄素的含量,简便易行、准确、重复性好,可为维血宁的质量控制研究提供-种可靠的参考方法。     

不同产地珠子参中多糖的含量测定

目的建立珠子参多糖的含量测定方法,并比较不同产地珠子参中多糖含量的差异。方法采用水提醇沉法对珠子参中多糖进行提取、纯化,采用蒽酮-硫酸比色法对不同产地珠子参中多糖进行含量测定,并对测定结果进行聚类分析。结果在0.0057 mg/mL~0.0190 mg/mL葡萄糖浓度C与吸光度A线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.55%,RSD 2.2%,不同产地的珠子参多糖含量在3.26%~9.36%,不同产地珠子参多糖存在差异。结论本试验建立的珠子参中多糖含量测定方法简便、稳定、可行,不同产地珠子参中多糖含量的差异较大,该结果为珠子参中多糖质量控制和相关产品的开发利用提供了理论依据。