无机砷对Chang肝细胞活性氧的诱导和核转录因子表达的影响

目的 研究亚砷酸钠(NaAsO2)对Chang肝细胞中活性氧(ROS)的诱导以及对核转录因子Nrf2的活化作用.方法 体外实验采用0～10μmol/L NaAsO2溶液对Chang肝细胞染毒2、6、12和24 h.分别用流式细胞仪和免疫印记实验(Westernblot)技术检测细胞内ROS含量和Nrf2蛋白的表达.结果 2.5lμmol/LNaAs02溶液染毒6h、5.0Ixmol/LNaAsO2 溶液染毒2、6、12、24 h的平均荧光强度的相对比值均高于对照组,差异有统计学意义(P(0.05或P＜0.01);且ROS的产生量随着NaAsO2溶液浓度的升高而增多.5.0 μmol/L NaAsO2溶液染毒12 h、5.0 μmol/L NaAsO2溶液染毒2、6、12 h的核转录因子Nrf2蛋白表达均强于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);且核转录因子Nrf2蛋白表达的活化具有时间相关性,即在NaAsO2溶液染毒12 h时核转录因子Nrf2蛋白表达的活化出现高峰,而后逐渐降低至正常水平.结论 无机砷能够诱导Chang肝细胞内ROS的生成和增强核转录因子NIf2蛋白的表达.     

顺铂肾毒性的实验研究

选择雄性昆明种小鼠,经腹腔连续注射顺铂5d。观察不同剂量顺铂对小鼠的毒作用及其停药后不同时间的转归。结果可见顺铂引起小鼠体重下降、肾脏器系数和肾损伤指标的异常,并呈剂量依赖关系。给予3.0～4.0mg的顺铂可产生明显的肾损伤。顺铂所致肾损伤在停药后可缓慢恢复。     

砷暴露母子砷代谢特点及DNA损伤差异

目的通过尿中各种形态砷水平，探讨高砷暴露下儿童砷代谢特点；测定尿中8-羟基脱氧鸟苷（8-O-HdG）水平。初步探讨砷暴露对儿童DNA的损伤情况；并比较砷暴露对儿童与成人的不同影响。方法以氢化物发生．冷原子捕获．原子吸收分光光度法测定尿中各种砷化物的含量；以试剂盒法测定尿8-OHdG水平。结果砷暴露组妇女和儿童尿中无机砷（iAs）、二甲基砷（MMA）、甲基砷（DMA）及总砷（tAs）水平均显著高于对照组；砷暴露母子间，子女尿中iAs、DMA、tAs及DMA／tAs水平显著高于其母亲，而MMA／（MMA＋DMA）显著低于其母亲。母子间8-O-HdG水平差异无统计学意义。结论高砷暴露下，儿童二甲基化能力高于成人，DNA氧化损伤与成人相比不明显。     

香烟烟雾的氧化应激效应及褪黑素的干预作用

目的通过体外实验了解香烟烟雾作用下细胞的氧化应激状况,并了解褪黑素对这种状况的影响。方法选择(200±20)g雄性Wistar大鼠,无菌采血并分离淋巴细胞。用pH值7·2的磷酸盐缓冲液(PBS)作为吸收液制备0·2支/毫升的水溶性香烟烟雾溶液(CSS),并以终浓度8×10-3支/毫升的香烟烟雾溶液作用于细胞。前期试验中用0·05和0·1mmol/L褪黑素预处理香烟烟雾作用的细胞,发现0·1mmol/L的褪黑素增加细胞活力的作用比0·05mmol/L强,因此作为后续试验的干预浓度。实验中以RPMI1640为培养液,在37℃、体积分数5%CO2的条件下孵育细胞。实验设对照组、褪黑素作用组(MLT组)、香烟作用组(CSS组)、褪黑素与香烟共同作用组(MLT+CSS组)。用0·1mmol/LMLT对MLT和MLT+CSS组细胞预处理2h后,在CSS和MLT+CSS组细胞中加入香烟烟雾溶液,再孵育2h。用AlamarBlue摄入法检测细胞活力,彗星试验检测DNA损伤,Nitrite法测定SOD活性,TBA荧光法测定脂质过氧化水平(LPO),考马斯亮蓝G250测定蛋白质水平以校正SOD及LPO值。结果CSS组彗星尾长以及LPO水平均高于对照组,SOD活性低于对照组,差异显著。与CSS组相比,MLT+CSS组细胞活力增加,DNA损伤减轻,SOD活性增强,LPO水平降低,差异显著。结论体外实验中,8×10-3支/毫升的香烟烟雾溶液处理细胞出现氧化应激反应。0·1mmol/LMLT能增强细胞活力,增加SOD活性,减轻脂质过氧化和DNA损伤,有效拮抗CSS的氧化损伤作用。     

地方性砷中毒

地方性砷中毒是指由于长期饮用含高砷地下水,或暴露于燃用高砷煤,引起以皮肤色素沉着或(和)脱失、掌跖角化等皮肤改变为主要表现,同时伴有中枢神经系统、周围神经、血管、消化系统等多方面症状的全身性疾病。地方性砷中毒多为慢性中毒,是地方病中发现历史最短、了解最少的一种地方病。由于其危害不只限于摄入砷的一段时期,在中止摄入后,仍可持续较长时间,尤其砷可引起恶性肿瘤等,因此引起广泛关注。1病因和分类地方性砷中毒可分为饮水型和燃煤污染型。饮水型最常见,燃煤型仅见于我国的某些地方。饮水型是由于饮用高砷水,直接由消化道摄入过…     

外源性谷胱甘肽对慢性砷暴露小鼠尿砷代谢及氧化应激的影响

目的探讨给与谷胱甘肽(GSH)及其拮抗剂——丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对慢性砷暴露小鼠体内砷代谢及氧化应激的影响。方法将SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、单纯染砷组(50 mg/L亚砷酸钠)、GSH干预组(50 mg/L亚砷酸钠+400 mg/kg GSH)和BSO(50 mg/L亚砷酸钠+600mg/kg BSO)干预组,除对照组小鼠饮用蒸馏水外,其余各组均饮用含50 mg/L亚砷酸钠的水溶液连续染毒30周,然后给予400 mg/kg GSH或600 mg/kg BSO,用蒸馏水配制GSH和BSO水溶液,每天两次腹腔注射,连续2 d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定尿液各形态砷水平,用DTNB及试剂盒法分别测定全血及肝脏中GSH和总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果 GSH干预组小鼠尿中二甲基胂(DMA)、DMA含量构成比、二甲基化率(SMR)及总砷含量高于单纯染砷组(P<0.05),而BSO干预组各形态砷、DMA含量构成比、一甲基化率(FMR)、SMR及总砷含量均低于单纯染砷组(P<0.05);单纯染砷组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于对照组(P<0.05)。给予GSH干预后,肝脏和血液GSH和T-AOC水平均高于单纯染砷组(P<0.05)且与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。BSO干预组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于其他各组(P<0.05)。结论外源性GSH干预可以增强砷暴露小鼠的砷甲基化能力,增加砷从尿液中的排出,拮抗砷所致的GSH和T-AOC水平下降,从而减少了砷对机体造成的氧化损伤。     

氟对MC3T3-E1细胞矿化能力的影响

目的探讨氟对小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞矿化的影响。方法在4×104个/孔的MC3T3-E1细胞培养液中加入0～10-4mol/L的氟化钠,于培养第14、28天,采用茜素红染色法检测矿化结节的形成情况。结果染毒14天,各氟化钠染毒MC3T3-E1细胞OD值间比较,差异均无统计学意义。与对照组相比,染氟28天时,10-7、10-6mol/L氟化钠染毒组MC3T3-E1细胞OD值较高,10-4mol/L氟化钠染毒组MC3T3-E1细胞OD值较低,差异均有统计学意义(P0.05)。且随着氟化钠染毒剂量的升高,MC3T3-E1细胞OD值呈先升高后降低的趋势。结论低浓度氟化钠(10-7～10-6mol/L)可促进MC3T3-E1细胞的矿化,而高浓度氟化钠则可抑制MC3T3-E1矿化结节的形成。氟对成骨细胞矿化过程起双向调节作用。     

饮水砷暴露和糖尿病关系的Meta分析

[目的]探讨饮水砷暴露与糖尿病是否有相关性.[方法]检索纳入国内外有关饮水砷暴露与糖尿病关系的文献4篇,采用Meta分析的方法,应用随机效应模型和固定效应模型进行综合的定量分析,计算合并OR值及OR值的95%CI,利用倒漏斗困法定性评价发表性偏倚.[结果]暴露组的糖尿病患病率高于非暴露组(OR=2.84,95%CI为1.90～4.23);男性暴露组比非暴露组糖尿病的患病率高(OR=3.15,95%CI为1.12～8.88);女性暴露组比非暴露组糖尿病的患病率高(OR=2.54,95%CI为2.45～2.65).由于Meta分析结果不符合要求,未进行倒漏斗图分析.[结论]饮水砷暴露可能会引起糖尿病的高发,饮水砷暴露可能是糖尿病的危险因素之一.     

饮水砷暴露对子代大鼠脑GAD和GABA-T mRNA表达的影响

目的探讨砷暴露对子代大鼠中枢神经系统氨基酸递质代谢酶的影响。方法雌性大鼠于受孕后第6天开始以自由饮水方式分别暴露0、10、50、100mg／L的NaAsO2水溶液，连续染毒直到仔鼠出生后第42天，分别于仔鼠出生后0、28、42d取皮质、海马进行谷氨酰胺脱羧酶（GAD）和γ-氨基丁酸转移酶（GABA—T）mRNA表达检测。结果仔鼠出生后第0天，各染砷组脑组织GAD65、GAD。mRNA表达均未发生变化，GABA—T mRNA表达水平也未发生明显改变。在出生后第28天，100mg／L染砷组仔鼠海马的GAD65和皮质的GAD。mRNA表达水平升高，而50mg／L染砷组仔鼠皮质的GABA—T mRNA表达下降。出生后第42天．100mg／L染砷组仔鼠皮质、海马的GAD65 mRNA表达均增强，海马的GAD。mRNA表达也增强，而GABA—T mRNA表达水平未见明显变化。结论从胚胎到出生后连续的饮水砷暴露能够使GAD。GAD。mRNA表达增强，从而可能会导致脑组织中相关神经递质水平发生改变，引起中枢神经功能紊乱。