应用Affymetrix全基因组芯片检测染色体7q36区域的DNA拷贝数突变

Objectives To refine the extent of a 7q36 duplication in a Chinese family with triphalangeal thumb-polysyndaetyly syndrome and syndactyly type Ⅳ using the Affymetrix SNP Array combined with quantitative real-time PCR (qPCR). Methods Genomic DNA was extracted and genotyped with the Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array 6.0. Copy number analysis was performed on the raw data using the Affymetrix Genotyping Console 3. 0. The qPCR assay was carried out using the AACT method to validate the duplication. Results With use of the combined approach, we were able to narrow down the breakpoint intervals from 113 kb and 33 kb to 5.4 kb and 1.8 kb, respectively. These allowed us to refine the extent of the 7q36 duplication from 291-437 kb to 379-387kb. Conclusion Screening with the Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array 6. 0 followed by the validation using qPCR is a reliable approach for high-resolution detection of copy number mutations.     

股骨髁上截骨术57例分析

儿麻后遗症病人中患有不同程度股四头肌麻痹极为常见,由于膝关节伸屈肌力失去平衡,以致屈膝挛缩发病率高,影响肢体功能,为此患者求治心切。近年来国内开展股骨髁上后倾截骨术逾万例,有效率94～96％。由于该术式符合生物力学原理,增强了膝关节稳定性,深受病人欢迎。但仍有不少并发症,有待改进。本组57例,有效率94.5％,出现并发症计:骨移位1例,屈膝明显受限2例,腓总神经牵拉反应2例,现分析如下:     

经尿道双极等离子电切术治疗高危良性前列腺增生症临床观察

目的探讨经尿道双极等离子电切术(PKRP)治疗高危良性前列腺增生症(BPH)的临床疗效以及安全性。方法回顾性分析辽宁省金秋医院2011年4月至2015年8月采用PKRP治疗的90例患者临床资料,观察患者术中生命体征、术后并发症、排尿等情况,比较患者治疗前、后前列腺质量、前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QOL)、最大尿流率(Qmax)、残余尿(RU)。结果所有患者术后均未发生低钠血症,平均手术时间(65.6±14.9)min;平均术中出血量(96.3±25.6)ml;平均住院时间(7.2±1.3)d。患者治疗后平均前列腺质量、IPSS评分、QOL评分以及RU分别为(40.2±12.4)g、(7.3±1.5)分、(1.2±0.5)分、(15.1±7.9)ml,均明显低于治疗前(61.8±32.1)g、(22.8±1.9)分、(6.8±1.3)分、(121.4±42.1)ml,治疗前、后各指标比较,差异均有统计学意义(P<0.01);治疗后Q_(max)为(19.4±3.6)ml/s,明显高于治疗前(6.9±2.1)ml/s,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PKRP治疗高危BPH,临床效果良好,手术安全性高,降低了电切综合征的发生率,值得临床推广应用。     

中国人并多指(趾)畸形家系中HOXD13基因突变及产前诊断

目的对中国山东一个并多指(趾)，又称Ⅱ型并指(趾)，畸形大家系进行致病基因突变的鉴定．确定中国人并多指(趾)畸形家系中是否存在HOXD13基因突变；通过检测突变HOXD13基因对高危胎儿进行产前基因诊断。方法根据家族史、临床体征和手足X线检查进行临床诊断；采集家系成员外周血标本及受检孕妇羊水和绒毛标本，常规提取基因组DNA；设计并合成1对特异引物，通过PCR扩增HOXD13基因第1外显子内多聚丙氨酸链编码序列；PCR扩增片段经琼脂糖凝胶电泳检测，异常扩增片段经TA克隆后测序鉴定；产前诊断中，通过PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检查HOXD13基因内及基因两侧共3个微卫星多态标记进行单体型分析。结果本家系4代54人，患者16人(男6人，女10人)；手足共同表现为：3／4完全并指伴软组织蹼内多指，4／5并趾伴软组织蹼内多趾．外显率为100％，表现度变异明显。上述表现符合典型常染色体显性并多指(趾)的表型特征。对家系中18人(患者9人)进行HOXD13基因分析，结果显示：全部患者多聚丙氨酸链中丙氨酸残基数由正常的15个延长为24个。通过HOXD13基因多聚丙氨酸链延展突变检测和单体型分析，对家系中1女性患者两次怀孕进行产前诊断，发现胎儿均携带突变HOXD13基因。结论首次在中国人典型并多指(趾)大家系中发现HOXD13基因多聚丙氨酸链延展突变；联合HOXD13基因多聚丙氨酸链延展突变检测和单体型分析，首次完成2例并多指(趾)胎儿的产前基因诊断。     

络活喜治疗充血性心力衰竭的临床观察

目的 探讨苯磺酸氨氯地平(络活喜)能否增强ACEI治疗充血性心力衰竭中的疗效.方法 随机选择心功能2～3级心力衰竭患者56例.分两组:对照组单用卡托普利每日75 mg;试验组卡托普利每日75 mg和络活喜片每日5 mg联用,疗程4周.观察治疗前后患者收缩压、左心室射血分数的变化.结果 用药治疗4周后对照组和试验组患者收缩压均比用药前明显下降(均P<0.01),而左室射血分数明显升高(P<0.01),且试验组比对照组改变更为显著(P<0.05).结论 联用络活喜和卡托普利治疗充血性心力衰竭能有效地降低患者血压和改善患者心功能状态.     

Nkx2-5基因与心脏发育

心脏发育是一个极其复杂的过程,它涉及胚胎发育过程中不同时间、不同空间的若干基因的先后表达。大量研究表明Nkx2-5/Csx基因作为与发育密切相关的同源盒基因(homeoboxgene)的一种,在心脏发育过程中起重要作用。本文根据已发表的文献资料,系统地阐述Nkx2-5基因的结构、表达及其在心脏的调节功能与途径,进而在分子水平上对心脏的发生和发病有更深入的了解。     

融合蛋白d-EGF的结构预测及其意义

目的 对融合蛋白d-EGF二级、三级结构进行预测,为构建相应结构重组分子的可能性提供理论指导.方法 以融合蛋白基因序列为基础,用DNAStar软件预测其蛋白质的二级结构;用Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模预测.结果 DNAStar软件的Gamier Robson方法预测融合蛋白d-EGF含较多β-折叠结构;Charge Density-Charge显示其3～22,31～48区段含丰富的正电荷.Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模显示融合蛋白d-EGF存在一个由六个链内二硫键组成的结构域,同时存在3个反向平行的β-折叠结构,这些结构是融合前β-defensin-3,EGF两分子生物学活性所必需的部分.结论 融合蛋白d-EGF的二、三级结构预测结果显示该组合分子可能具有β-defensin-3,EGF两种分子的功能,该方法可以为构建具有相应结构重组蛋白的可能性提供理论基础.     

-80℃条件下不同时间外周血干细胞冻存效果的观察

目的 观察外周血干细胞在-80℃条件下保存时间与细胞活性的关系.方法 采用一种简便的-80℃干细胞冻存方法,其干细胞保护剂终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO),3%羟乙基淀粉(HES)和4%人血白蛋白(HAS),不经程序降温,直接-80℃冰箱冻存,并调整细胞浓度为(2～4)×107/mL,分别对冻存1、3、6、9、12个月干细胞活性进行检测,观察台盼蓝拒染率和MNC、CD34+细胞的回收率.结果 干细胞活性在12个月内均无明显下降,其台盼蓝拒染率和MNC、CD34+ 细胞的回收率都在80%以上.不同时间冻存的干细胞活性比较无明显统计学差异(P＞0.05).结论 5% DMSO、3% HES 和4% HAS作为干细胞冷冻保护剂直接在-80℃冰箱冻存外周血干细胞的方法能有效地保护外周血干细胞活性.     

基底节区生殖细胞瘤2例报告并文献复习

目的探讨基底节区生殖细胞瘤的临床特征,以提高对该病的早期诊断水平。方法回顾性分析2例局限于基底节区经病理学证实的生殖细胞瘤患者的临床资料,并结合相关文献对基底节区生殖细胞瘤的临床表现、影像学检查、组织病理、诊断要点进行分析讨论。结果 2例病人均为男性,年龄11和17岁,显微镜下全切除肿瘤;术后分别随访4年和1.5年,术后未行放射治疗的患者半年后复发,再次来院行肿瘤及全脑放射治疗,放疗中复查MRI示肿瘤明显缩小。结论基底节区生殖细胞瘤临床特征和影像学特点对早期诊断具有重要价值,遇到疑似病例时建议活检或行诊断性放疗以进一步确诊。     

经翼点入路显微手术治疗鞍区肿瘤

目的 将鞍区及垂体血供的显微解剖知识应用于鞍区肿瘤的显微手术中，达到既减少术中血管损伤、又全切除肿瘤。方法 在手术显微镜下经翼点入路鞍区四个解剖间隙切除鞍区肿瘤88例，术中注意保护肿瘤周围的神神经、ICA及发出的垂体上动脉。结果 88例鞍区肿瘤，全切除84例（94．4％），死亡3例（3．4％），复发4例（4．5％）。结论 在经翼点入路行鞍区肿瘤的显微手术中，熟练掌握鞍区四个解剖间隙及垂体血供的显微解剖，是提高全切率、降低死亡及复发率的关键。