人肝癌细胞系中miR-20a-5p的表达及对肝癌细胞Bel-7402增殖及凋亡的影响

【摘要】 目的 探讨miR 20a 5p在人肝癌细胞系中表达及其对肝癌细胞Bel 7402增殖及凋亡的影响。方法 通过反转录实时定量聚合酶链反应（RT qPCR）考察miR 20a在肝细胞L 02和7种肝癌细胞中的表达;构建过表达或沉默miR 20a 5p的人肝癌Bel 7402细胞株;通过噻唑蓝（MTT）实验考察过表达或沉默miR 20a 5p后对细胞增殖的影响;通过AnnexinV FITC/PI流式实验考察对细胞凋亡的影响,并进一步通过蛋白质免疫印迹试验考察对凋亡相关基因蛋白表达水平的影响。结果 与人肝细胞L 02相比,6种细胞系的miR 20a 5p表达水平较低。过表达miR 20a 5p后细胞增殖能力显著下降（P=0.011）,沉默后显著上升（P=0.007）。高表达miR 20a 5p后细胞凋亡和早期凋亡比例均显著增加（P=0.009、0.017）,沉默miR 20a 5p均明显降低（P=0.012、0.007）。高表达miR 20a 5p后细胞中凋亡抑制蛋白XIAP、Survivin、Bcl 2表达下调,凋亡促进蛋白Bax表达上调;沉默miR 20a 5p后XIAP、Survivin、Bcl 2表达上调,Bax表达下调。结论 miR 20a 5p在6种肝癌细胞中低表达,可促进肝癌细胞Bel 7402凋亡,抑制细胞增殖能力。     

不可修复巨大肩袖撕裂的认识和治疗体会

[视频简介] 不可修复巨大肩袖撕裂概念最早由Gerber提出,其认为在术中经过充分松解后,外展<60°仍无法完成后上肩袖肌腱止点修复即视为不可修复的巨大肩袖撕裂.目前文献观点认为:不可修复巨大肩袖撕裂包含两层含义,一是根据术中探查松解后无法完成修复的.     

肺硬化性血管瘤的影像学表现(附15例报告)

目的:探讨不同检查方法下肺硬化性血管瘤的影像学表现与特征,旨在提高对其影像诊断及鉴别诊断的能力?方法:回顾性分析15例经手术及病理证实的肺硬化性血管瘤的影像学表现,包括CT平扫?CT增强扫描及PET/CT扫描?结果:本组15例患者平均年龄为51.2岁,其中女性占93.3%(14/15),均为单侧?单发肺实性病灶,两肺各叶均可发生,平均直径约23.9 mm;大部分为圆形或类圆形,边界清晰,密度较均匀,少数病灶可见囊性变?钙化灶?分叶征及周围见渗出影,部分病灶有跨膜生长倾向,仅1例可见胸膜牵拉凹陷表现,符合偏良性肺肿瘤的影像学表现?7例增强扫描CT图像均可见贴边血管征有助于本病诊断?5例PET/CT扫描患者的诊断准确率为40.0%,肺硬化性血管瘤对FDG摄取无特异性?结论:CT平扫结合增强CT对于肺硬化性血管瘤具有较好的诊断价值?18F-FDG PET/CT对病灶转移情况以及细胞异形性有一定的提示作用?     

泪道探通的一点体会

泪道探通是诊治泪道疾病的常用方法,如果操作不当,或者造成假道,或者损伤泪道粘膜,会使病情加重。一般探通方法多用泪道探针垂直插入泪小管垂直部1～2mm,向外下方牵拉下睑的同时,将探针变为水平方向插入泪小管水平部,当探针碰到泪囊窝之骨壁时,把探针柄向上转90度,紧贴眉毛内端将泪囊内的探针垂直向下,并稍向后、外方插入鼻泪管。按这样操作一般不易形成假道。但是有时也不能避免穿破泪小管而造成假道。近年来我们把探针水平方向插入泪     

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对乳腺癌细胞的杀伤作用

目的:对一种热休克蛋白90抑制剂即17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌细胞生长的影响及相关机制进行初步探讨。方法:MTT法检测药物对人乳腺癌细胞SKB r3的生长抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化;免疫组化法检测药物处理前后SKB r3细胞中HER2的表达变化情况。结果:17-AAG对人乳腺癌细胞株SKB r3生长有抑制作用,随着用药浓度的增加,抑制作用明显增强,呈明显的剂量依赖性,其IC50浓度为3.09μg/m l。SKB r3细胞经17-AAG处理48 h后,流式细胞仪分析可见在0、0.625、1.250、2.500、5.000和10.000μg/m l浓度下,SKB r3细胞的凋亡率分别为(1.03±0.08)%、(3.68±0.67)%、(7.06±1.12)%、(11.23±1.36)%、(20.32±1.98)%和(31.65±2.96)%;G0/Gl期细胞分别为58.61%、54.34%、49.55%、43.73%、35.52%和27.46%;S期细胞分别为:29.57%、25.21%、19.65%、22.98%、19.71%和15.46%;G2/M期细胞分别为11.82%、20.45%、30.18%、33.29%、44.77%和57.08%;同时17-AAG处理后的SKB r3细胞人类表皮生长因子受体2(HER2)表达明显减少。结论:17-AAG能够抑制人乳腺癌细胞SKB r3的生长并促进其凋亡,提示17-AAG是一种很有前景的抗肿瘤药物。     

32P-玻璃微球间质给药体内生物学分布与代谢

目的 观察32P-玻璃微球(32P-GMS)间质给药后体内生物学分布与代谢.方法 120只小鼠分别经肝脏或肌肉注射32P-GMS,每只(1.80±0.05)MBq/50μl,不同时间点处死取血及脏器计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g);12只大鼠肝脏、肌肉每只注射(18.0±0.5)MBq/0.5 ml,收集排泄物测累积排泄率.结果 小鼠肝脏组给药肝叶%ID/g 0时最高为1.38,15 nin降至0.71,非给药肝叶峰值15 min为0.52,4 h之后左右肝叶无区别;肺组织计数率值1 h内上升,肝肺累积分流率为37.9%.肌肉组注射点%ID/g0时为31.47,15 nin～8 h为25.06～11.92(中值20.97),12 h为8.70,24 h～14 d为3.54～2.02(中值2.51),其他主要脏器放射性接近本底水平.大鼠肝脏组粪便和尿液14 d累积排泄率分别为0.0751%和0.0586%;肌肉组分别为0.0401%和0.0385%.结论 32P-GMS间质注射适用于除肝脏以外的体内组织脏器恶性实体瘤的治疗.     

膝关节髌下皱襞的临床意义

目的:观察膝关节镜下髌下皱襞结构的变化,探讨膝关节髌下皱襞的临床意义。方法:回顾性总结分析膝关节镜手术病例400例,男177例,女223例;年龄9⁷9岁,平均42岁。术前均有膝关节疼痛、肿胀和交锁等现象,保守治疗无效,行膝关节镜检查及镜下手术。术中证实单纯的髌下皱襞病变11例,术前有膝前区疼痛症状者8例,疼痛区域模糊不定者3例,膝关节反复肿胀、积液者2例;术前诊断为半月板损伤4例,关节软骨损伤2例,髌股关节骨性关节炎1例,髌下脂肪垫损伤4例。11例均行膝关节镜下髌下皱襞切除术。结果:400例膝关节镜手术中发现有髌下皱襞结构的284例（71%）;有髌下皱襞病变的52例（13%）,其中单纯的髌下皱襞病变11例（2.75%）。髌下皱襞病变镜下表现为髌下皱襞肿胀、增厚、纤维化、丧失弹性,与髁间凹产生撞击。11例单纯髌下皱襞病变均行关节镜下髌下皱襞切除术,术后随访9例,2例失访,随访时间3²4个月,平均14个月。疗效评定优7例,良1例,可1例,差0例,优良率88.89%。结论:髌下皱襞具有明确的临床意义,其病变可以引起临床症状。     

成纤维生长因子软膏治疗重症褥疮16例

目的:研究用成纤维生长因子(FGF)软膏治疗重症褥疮。因为长期卧床的老年病人明显增加,重症褥疮时有发生,成为基础护理中的难题。方法:用自制FGF软膏治疗重症褥疮16例,褥疮平均面积3.1～80.9cm~2,深度:Ⅱ度8处占20％,Ⅲ度20处占50％,Ⅳ度12处占30％。结果:经3周治疗后,Ⅲ度以上褥疮愈合率11/21(52.4％),显效5/21(23.8％),好转5/21(23.8％),总有效率(愈合+显效+好转)为100％。对照组仅3例好转(27.3％),两组差异极为明显。结论:FGF软膏能加速重症褥疮的愈合,FGF是与以往治疗褥疮的传统药物完全不同的新一代制剂。     

黄萱益肝丸质量标准研究

目的 建立黄萱益肝丸的质量控制方法。方法 用薄层色谱法对处方中土大黄、丹参、南五味子、甘草进行定性鉴别，用高效液相色谱法测定大黄素的含量。结果 几味药均可用薄层色谱法鉴别，大黄素的回收率为99．20％，RSD=2．16％。结论 所用方法能准确、快速地对黄萱益肝丸进行定性、定量检测，可用于该制剂的质量控制。     

人颌骨间充质干细胞的外泌体在巨噬细胞调控中的作用

目的:探讨颌骨骨髓间充质干细胞分泌的外泌体(OMMSCs-Exo)的特性及其在调控巨噬细胞功能中可能发挥的作用.方法:体外培养OMMSCs,检测其克隆形成及多向分化能力.提取上清液中外泌体,透射电镜观察其形态,蛋白印迹法检测其表面特异标志CD63、CD81.将外泌体与巨噬细胞作用24 h后用共聚焦显微镜观察两者的作用方式,实时定量PCR检测外泌体内免疫相关miR-223和miR-let-7c表达及与共培养后巨噬细胞中miRNA表达.结果:人OMMSCs符合间充质干细胞特性,OMMSCs-Exo分泌的外泌体近似圆形,直径在60~160 nm 之间,表达表面标志CD63、CD81:内含有与巨噬细胞调控相关的miRNA 如miR-223 和miR-let-7c 等,能被巨噬细胞吞噬,共培养后巨噬细胞中miR-223含量增加.结论:人OMMSCs-Exo及其携带的miRNA可能参与了巨噬细胞功能的调控.