重组人乳头瘤病毒58型L1蛋白在Sf9细胞中的表达条件优化

Objective To select the optimum conditions for amplification and expression of the recombinant human papillomavirus 58 (HPV58) LI gene using baculovirus-insect cell expression system. Methods The Sf9 insect cells at logarithmic phase was used to amplify virus at different multiplicities of infection (MOI). Titers of the virus were determined by plaque assay. The expression of recombinant protein was identified by indirect immunofluorescence assay, and the expression of recombinant protein at different MOI and time was determined by Western blot. Results Recombinant baculovirus containing HPV58 LI gene were amplified at MOI of 0.5 for 48 h when the Sf9 insect cells were at logarithmic phase, and the highest titers of the virus reached 5×108 pfu/ml. The optimum conditions for expressing the recombinant protein were that the recombinant baculovirus was inoculated at MOI of 5.0 and the protein was expressed within 72 h. Conclusion The optimum conditions for amplifying the virus and expressing the recombinant protein are determined.     

重组人乳头瘤病毒16型L1 VLP的初步纯化、鉴定及免疫效果的初步研究

目的 对昆虫细胞-杆状病毒系统表达的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型L1蛋白病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)进行初步纯化研究,并在小鼠中检测纯化VLP的免疫原性.方法 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化方法纯化HPV16 LI VLP.对纯化得到的VLP分别进行蛋白印迹法、十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及电镜鉴定.然后用VLP免疫6周龄BALB/c小鼠.将小鼠随机分成6组(3个剂量组、2个佐剂组和1个对照组),间隔2周免疫3次,3次剂量相同.取血分离血清,采用间接ELISA法检测抗HPV16 L1 VLP抗体滴度.结果 经蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化后,用SDS-PAGE鉴定纯化的HPV16 LI VLP,纯度达到90%.电镜观察可见完整的VLP颗粒.间接EUSA检测结果显示,剂量组及佐剂组小鼠血清中均可检测到特异性抗HPV16 L1 VLP抗体,且抗体滴度随针次和剂量的增加而增高.结论 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化法得到的HPV16 L1 VLP可用于免疫学初步研究.通过昆虫细胞表达产生的HPV16 LI VLP 具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强的体液免疫应答.     

原发性痛经本科生的归因方式与人格及焦虑的相关性研究

目的：了解原发性痛经本科生的归因方式,并探讨其归因方式与人格及焦虑的相关性。方法采用归因方式问卷、中国大五人格问卷简式版、焦虑自评量表对235名原发性痛经本科生进行调查。结果原发性痛经本科生对正性事件的归因得分为（12.36±3.69）分,对负性事件的归因得分为（12.37±2.70）分;对负性事件的归因与神经质呈正相关（P<0.01）,与宜人性呈负相关（P<0.05）;对正性事件的归因与宜人性呈正相关（P<0.05）;对负性事件的归因与焦虑呈正相关（P<0.01）。结论原发性痛经本科生的总体归因方式较消极,对负性事件的归因与神经质及焦虑密切相关。管理者需及时评估原发性痛经本科生归因方式,帮助其减少消极的归因方式,培养积极的归因方式,减轻焦虑情绪对原发性痛经的影响。     

我国中学生艾滋病认知状况研究的文献分析

[目的]了解我国中学生艾滋病认知的研究现状,为相关方面的研究及今后健康教育工作方向提供参考.[方法]利用中国期刊全文数据库检索,采用"主题词"检索项,以"中学生"和"艾滋病"为检索词位对1990～2006年的文献进行检索,符合纳入标准的有173篇.[结果]载文频次居前3位的期刊是<中国学校卫生>、 <中国校医>、<中国健康教育>,共计82篇,在173篇中占47.4%;山东、广东、北京、浙江、云南地区发文88篇,占50.9%.研究多以问卷调查为主,研究机构主要为学校和疾控中心.其中疾控中心有86篇,占49.7%.其次是学校,有62篇,占35.8%.[结论]我国对中学生艾滋病认知方面的研究虽日益增多,但健康教育的方法及其评价手段单一、学生认知水平仍总体偏低、部分地区对中学生艾滋病健康教育没有引起足够的重视仍是突出问题.     

药物生产车间污染微生物的快速鉴定和污染微生物资源及信息库的建立

目的:利用分子生物学方法快速检测无菌药品生产企业生产过程中的污染微生物,并建立污染微生物资源及信息库,为药品生产企业追寻污染溯源提供相应的技术指导。方法:对某家药厂口服固体制剂、制药用水、工作人员及生产环境等环节进行为时半年的微生物监控。应用传统法及分子生物学法16Sr DNA序列比对鉴定污染微生物,并对结果进行分析与整理,初步建立药物污染微生物资源及信息库。结果:共收集294株微生物,其中生产环境微生物污染率最高,占全部污染源的92.5%;其次是口服固体制剂(3.7%)、制药用水(2.0%)、工作人员(1.7%)。污染微生物主要分布于20个属,35个种,其中葡萄球菌污染率最高达到56.3%;其次为芽胞杆菌(Bacillus)(17.6%)、微球菌(Micrococcus)(15.8%)和微细菌(Microbacteria)(4.0%)。根据鉴定结果从污染来源、培养特性、形态染色及菌株登录号四方面进行归纳总结,并用Excel及Word电子文档建立药物污染微生物资源库。结论:本研究在多个药物生产环节检测到种类繁杂的污染微生物。因此,建立制药企业污染微生物资源及信息库,能够为今后开展污染水平的风险评估和不良事件调查提供技术平台。     

乳腺癌患者心理一致感与生活质量的相关性及影响因素研究

目的探讨乳腺癌患者心理一致感和生活质量的相关性,为制定提高乳腺癌患者生活质量的干预措施提供理论依据。方法采用自制一般资料调查问卷、心理一致感量表、生命质量测定量表对2014年2—5月在天津市肿瘤医院乳腺科住院和门诊就诊的748例乳腺癌患者进行问卷调查。结果 748例乳腺癌患者心理一致感的总体平均分为(51.14±6.99)分,生活质量的总体平均分为(79.30±14.14)分,心理一致感与生活质量呈正相关性(r=0.111,P0.05)。不同文化程度(F=4.282,P=0.005)、人均月收入(F=12.445,P=0.000)以及手术方式(F=2.940,P=0.02)的乳腺癌患者心理一致感总分差异有统计学意义,不同医疗保险(F=3.354,P=0.035)、病理类型(F=5.752,P=0.003)、手术方式(F=6.429,P=0.000)以及化疗周期(F=8.153,P=0.000)的乳腺癌患者生活质量总分差异有统计学意义。结论心理一致感可预测生活质量,但乳腺癌患者心理一致感水平较低,重视患者对周围支持系统的利用度,增强其回归社会的信心,从而提高乳腺癌患者的生活质量。     

活性氧在极低频电磁场生物效应机制中的研究进展

随着电力、电器设备的普遍使用,环境中极低频电磁场(extremely low frequency electromagnetic fields,ELF-EMF),尤其是工频电磁场的分布也越来越广泛.1979年,Wertheimer 和Leeper首次报道了儿童白血病发病率的增加可能与住宅附近的高压输变电设备有关.这一发现不仅使学者对于极低频电磁场潜在健康风险产生了极大兴趣,与其密切相关的公共卫生问题也引起了全社会的日益关注.随后几十年间陆续进行的研究结果表明,ELF-EMF暴露可能与多种肿瘤的发病率升高存在一定的相关性[1-2].     

幽门螺杆菌对克拉霉素、甲硝唑和左氧氟沙星的耐药率及其相关耐药基因突变特征

检测幽门螺杆菌（Hp）对3种常见抗生素的耐药率,探讨其相关耐药基因突变形式,为阐明其耐药分子机制提供依据。     

基于RNA-seq技术的雏鸡晚期离焦识别转录组学研究

目的: 探讨晚期离焦识别的分子机制。方法: 实验研究。将30只7 d龄白来航鸡随机分为负镜组、正镜组和对照组, 分别给予雏鸡右眼-10 D/+10 D/0 D透镜诱导, 干预时间为6 d。所有动物均在光学干预前后测量屈光度、眼轴和后极部各组织厚度等生物学参数。采用单因素方差分析对数据进行分析。眼球生物学参数测量完毕后分离眼后极部组织, 提取RNA, 应用RNA-seq技术筛选差异表达基因, 并对其进行GO功能注释、KEGG通路分析及PPI网络分析, 观察离焦干预对雏鸡后极部各组织转录组的影响。结果: 负镜组、正镜组雏鸡的屈光度、眼轴长度以及脉络膜厚度, 与对照组相比, 差异具有统计学意义(P<0.05);以P<0.05和|log2FC|>1为筛选标准, 负镜组与对照组相比, 视网膜有203个差异表达基因, 脉络膜有757个差异表达基因, 巩膜有1 509个差异表达基因;正镜组与对照组相比, 视网膜有191个差异表达基因, 脉络膜有378个差异表达基因, 巩膜有1 918个差异表达基因。与对照组比, 负镜组与正镜组的重叠基因除LOC121112941外均表现出相同的差异...