咳必清中毒误诊为中枢神经系统疾病的教训

咳必清中毒误诊为中枢神经系统疾病的教训南京市第一医院［２１０００６］孔晓红，熊玉玲，黎书实，刘琴病例：女，４岁．因３小时内反复抽搐入院．抽搐为全身性，每次持续２～３分钟，间隔约１０分钟，无发热、咳嗽，无恶心、吐泻．在当地医院诊为中枢神经系统感染，经吸...     

Rh(D)阴性血型孕妇预存式自体输血的临床应用

目的探讨产科中Rh(D)阴性血型有产后出血危险因素妊娠晚期孕妇预存式自体输血的临床应用。方法对Rh(D)阴性血型有产后出血危险因素的孕妇在产前3周内进行自体备血1～2次,每次200mL,采血期间加强营养,口服铁剂,采血前后及输血后检测各项血液指标,采血过程中进行胎心监护。结果采血过程孕妇和胎儿生命体征正常,产后或术后母婴健康;采血前后及输血后各项血液指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Rh(D)阴性血型孕妇预存式自体输血是一种安全、经济、有效的输血方式,值得临床推广。     

大鼠脊髓损伤后脊髓组织中基质细胞衍生因子1α的时空分布

目的:观察Wistar大鼠脊髓损伤后脊髓组织中基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的表达及分布变化,探讨SDF-1α在脊髓损伤后脊髓中的时空分布特点.方法:取成年雌性Wistar大鼠90只,随机分成3组:正常组(n=10),假手术组(单纯椎板切除,n=10)和损伤组(n=70).损伤组根据损伤后取材时间点不同分为1、2、3、4、7、14、28d组.损伤组按改良的Impactor modelⅡ法,暴露T10脊髓节段,将10g条形重物从2.5cm高度垂直打击该段脊髓,制作脊髓损伤模型.按设定的时间点将大鼠在多聚甲醛灌注下取以T10为中心的2cm脊髓组织,取离损伤中心2mm和7mm处脊髓组织横断切片,使用HE及免疫组织化学法进行染色,观察并分析脊髓形态学变化和SDF-1α表达的时空分布特点.结果:正常组和假手术组的脊髓形态结构完整,损伤组中灰质神经元数量减少,白质纤维结构紊乱.免疫组化染色正常组和假手术组的脊髓中均匀分布少量SDF-1α,损伤组脊髓损伤中心近端(2mm)和远端(7mm)SDF-1α表达量都明显上升,损伤近端的SDF-1α阳性细胞数量增幅远多于远端;脊髓灰质中阳性细胞明显多于白质(P＜0.05).在大鼠脊髓损伤后1d脊髓组织中的SDF-1α阳性细胞数量开始上升,到损伤后2d时脊髓灰质中SDF-1α阳性细胞达到高峰,之后逐渐下降,损伤后7d时损伤近端SDF-1 α阳性细胞数量高于正常组和假手术组(P＜0.05),远端与正常组和假手术组无统计学差异(P＞0.05);到损伤后14d和28d时近端和远端与正常组和假手术组均无统计学差异(P＞0.05).结论:SDF-1α在Wistar大鼠脊髓损伤后脊髓组织中表达活跃,呈现出明显的时空分布特点.     

慢病毒介导的shRNA干扰PTEN表达促皮层神经元轴突再生及脊髓损伤修复

 目的 观察慢病毒介导特异性短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）干扰第l0号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN）表达对皮层神经元轴突再生及脊髓损伤修复的影响。方法 体内实验和体外实验两部分各分四组：阴性对照组（DMEM）、空载慢病毒组（Lenti��control）、空白载体组（Lenti��scramble）、慢病毒介导shRNA组（Lenti��shRNA）。体外神经元转染72 h后,Western blot检测各组PTEN表达情况,免疫荧光检测神经元轴突再生能力;体内载体注射1周后,Western blot检测各组PTEN表达情况;6周后荧光显微镜观察皮质脊髓束穿越脊髓损伤局部周围增强绿色荧光蛋白荧光强度及突触素表达情况。采用大鼠脊髓损伤评分评价大鼠后肢运动恢复情况。结果 慢病毒介导shRNA组体外转染神经元后PTEN表达水平比阴性对照组下降83.75%±2.85%,与其他组比较具有统计学意义（F=4277,P< 0.05）;轴突长度（249.70±10.70）μm,大于阴性对照组（95.71±20.24） μm、空载慢病毒组（97.00 ± 22.82）μm及空白载体组（87.57±19.34）μm,差异具有统计学意义（F=84.74,P< 0.05）;每个神经元一级突起数量（5.800±0.359）个,大于阴性对照组（2.800±0.678）个、空载慢病毒组（2.900±0.389）个及空白载体组（3.000±0.877）个,其差异具有统计学意义（F=16.47,P< 0.05）;神经元突起穿越硫酸软骨素蛋白多糖基质的百分比20.60%±1.80%,大于阴性对照组6.70%±1.45%、空载慢病毒组5.50%±1.69%、空白载体组5.60%±1.77%,其差异具有统计学意义（F=94.90,P<0.05）。慢病毒介导shRNA注射大脑皮层运动区后,第6周大鼠脊髓损伤评分达（13.29±0.42）分,高于阴性对照组（7.00±1.48）分,空载慢病毒组（6.43±1.43）分,空白载体组（6.29±1.22）分,其差异具有统计学意义（F=44.85,P< 0.05）。皮层组织PTEN表达水平下降84.57%±1.87%,损伤中心尾端见绿色荧光,突触素染色阳性面积明显增大。结论 慢病毒介导shRNA下调PTEN基因表达后可明显提高脊髓损伤后轴突再生能力,促进神经功能修复。     

转基因雪旺细胞与壳聚糖的相容性

大量动物实验证实：将体外培养的雪旺细胞（SC）移植入脊髓损伤区能促进神经元再生，但SC在体外培养和移植过程中，缺乏有效载体。本实验拟建立SC体外分离培养的方法，将神经生长因子（NGF）基因转入SC，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测NGF在转染前后的分泌情况；使用壳聚糖作为载体，种植转基因SC，并对两者的相容性进行观察，探讨转基因和壳聚糖在脊髓损伤治疗中的作用。     

自体激活雪旺细胞移植治疗急性脊髓损伤的实验研究

目的 探讨自体激活雪旺细胞（autologous activated Schwann cells,AASCs）移植治疗急性脊髓损伤的疗效.方法 通过结扎单侧隐神经从而激活自体雪旺细胞并进行体外分离、培养及纯化,测定其不同培养时期培养基中神经生长因子、脑源性神经营养因子含量的变化.Wistar大鼠90只,以纽约大学脊髓损伤打击器建立T10急性脊髓损伤模型.随机分为3组,每组30只：单纯DMEM移植对照组、自体未激活雪旺细胞（autologous Schwann cells,ASCs）移植组和AASCs移植组.对各组实验动物脊髓损伤后肢体功能的恢复情况进行行为学评分（BBB评分）、体感诱发电位与运动诱发电位（somatosensory evoked potential and motor evoked potentials,SEP ＆ MEP）、生物素标记的葡聚糖胺示踪皮质脊髓束（corticospinal tract,CST）观察,比较各组差异.结果 BBB评分4周以后组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）,其中细胞移植组明显高于对照组（P＜0.05）;SEP、MEP潜伏期和波幅值8、12周后组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;CST标记距离损伤中心向头端方向0.6、1.2、1.8、2.4mm和距离损伤中心向尾端方向0.6、1.2、1.8mm组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 AASCs可分泌大量神经营养因子,并能明显促进急性脊髓损伤后的轴突再生和肢体功能恢复.     

神经生物膜介导神经干细胞联合雪旺细胞移植治疗脊髓损伤

目的探讨以壳聚糖-胶原偶联生物膜为载体，联合移植雪旺细胞（SCs）与神经干细胞（NSCs）在治疗脊髓损伤中的作用，并评价该方法的疗效。方法大鼠孕鼠体内取出胎鼠分离获得原代NSCs进行体外培养，大鼠乳鼠坐骨神经中分离获得原代SCs进行体外培养，分别传代4代获得大量细胞。40只Wistar大鼠建立大鼠脊髓半横断动物模型并随机分为4组：空白对照组，SCs移植组，NSCs移植组，NSCs联合SCs移植组。将胎鼠NSCs和乳鼠SCs共同种植于胶原-壳聚糖偶联的神经生物膜上，移植入大鼠脊髓半横断模型的脊髓损伤部位，对动物进行BBB脊髓功能评分，BDA神经示踪标记，标记2周后处死动物取出动物脊髓组织进行Cy3荧光素染色，p75免疫荧光染色及脊髓组织苏木素-伊红（HE）染色。结果4组实验动物BBB评分组间比较差异有统计学意义（ANOVA，P〈0．05），p75免疫荧光染色阳性物面积比较各组之间差异有统计学意义（ANOVA，P〈0．05）。结论NSCs和SCs能够在胶原-壳聚糖偶联的神经生物膜上共同生长分化，并且SCs能够诱导NSCs产生轴突定向生长。壳聚糖-胶原生物膜介导的SCs联和NSCs移植治疗脊髓损伤可使神经部分再通。     

酚妥拉明不同给药方法对新生儿肺炎患儿的影响63例分析

目的 :分析讨论酚妥拉明采用直接静脉注射或静脉点滴给药时 ,何种方法更易对新生儿肺炎患儿造成不良影响。方法 :5 0例酚妥拉明剂量为每次 0 .3～ 0 .5mg·kg-1,其中 45例加 5 %或 10 %葡萄糖水 2～ 5ml直接静脉注射 (1ml·min-1) ,5例加 10 %葡萄糖水 3 0ml静脉点滴 ,每隔 6、8、12h 1次 ;13例剂量为 0 .2～ 0 .3mg·kg-1·次 -1,加 10 %葡萄糖水 3 0ml静脉点滴 ,每隔 8、12h 1次。病情好转后逐渐停用 ,疗程 3～ 5d。结果 :直接静脉注射者 2 0例出现鼻塞 ,其中 6例因重度鼻塞出现早期心衰 ;静脉点滴者无鼻塞。 63例均无其他严重副反应。结论 :酚妥拉明鼻塞副作用的发生与其给药方法关系密切 :较大剂量 (0 .3～ 0 .5mg·kg-1·次 -1)加少量葡萄糖水 (2～ 5ml)稀释后直接静脉注射时极易发生 ;上述剂量加葡萄糖水 3 0ml静脉点滴或较小剂量 (0 .2～ 0 .3mg·kg-1·次 -1)加葡萄糖水 2～ 5ml静脉注射时很少或不发生。