聚合酶链反应检测间日疟原虫感染的探讨

研究一种适用于流行式人群聚合酶链反应检测间日疟原虫感染的方法。方法：用滤纸片与毛细管两种方法收集血样本，１％Ｔｒｉｏｎｘ－１００裂解，煮沸法处理血样，对全部血样进行ＰＣＲ检测，并与常规镜检作比较。结果２００例血样ＰＣＲ法阳性８．０％高于镜检阳性率３．５％，滤纸血样与毛细管血样ＰＣＲ扩增取得相同的效果。结论ＰＣＲ检测间日疟原虫方法具有快速，敏感，实用性强等优点，有一定的推广应用价值。     

邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗疥疮的疗效观察

邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗门诊疥疮患者75例，1个疗程治愈率为90．67％，分别使用二丁酯-OP乳化剂溶液和疥宁霜治疗体检疥疮患者各80例，1个疗程治愈率分别为92．5％和82．50％，差异有显著性（0。9．00，P〈0．005）。二丁酯-0P乳化剂是一种安全可靠、高效的疥疮治疗药物。     

结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6的构建、鉴定及免疫效应评价

目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染Hela细胞,分别以RT-PCR法检测ESAT-6 mRNA的表达、间接免疫荧光法检测ESAT-6蛋白表达。重组质粒经体内电转染免疫小鼠后,采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ及抗ESAT-6特异性抗体IgG的水平;流式细胞术检测小鼠淋巴细胞增殖水平;ELISPOT检测产生IFN-γ的淋巴细胞频数。结果构建的重组质粒pVAX1/ESAT-6经双酶切于3000 bp和300 bp处各见1条带,测序结果显示插入序列与ESAT-6基因序列无差异。重组质粒转染Hela细胞后,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳于约300 bp处见目的条带,间接免疫荧光检测显示特异性绿色荧光。重组质粒免疫小鼠后,血清中抗ESAT-6特异性抗体IgG水平较对照组(空质粒组和生理盐水对照组)明显升高;血清中IFN-γ水平、小鼠脾淋巴细胞增殖水平及产生IFN-γ的淋巴细胞数明显均高于对照组(空质粒组和生理盐水对照组)。结论成功构建了结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6,该疫苗可有效诱导小鼠产生特异性细胞免疫和体液免疫效应。     

夏枯草口服液在甲状腺功能亢进症患者中的应用

目的：观察夏枯草口服液在甲状腺功能亢进症时对甲状腺大小的影响。方法：56例甲状腺功能亢进(简称甲亢组)患者随机分为经典治疗组(A₁组)和联用夏枯草口服液治疗组(B₁组),治疗前后行甲状腺彩超检查甲状腺大小、实质内的彩色血流清况,同时测量20例正常人作为对照组。结果：治疗前甲状腺大小、甲状腺上动脉管径、血流速度及血流量均明显大于正常组(P<0.001),治疗后,经典治疗组和联用夏枯草口服液治疗组甲状腺均有不同程度缩小,甲状腺上动脉管径变小、血流速度及血流量逐渐下降,但甲状腺大小以联用夏枯草口服液治疗组为明显,此组与正常对照组相比已无明显差异,甲状腺甲状腺上动脉、血流速度及血流量两组之间比较无明显差异。结论：甲状腺功能亢进症时,在经典治疗基础上联用夏枯草口服液治疗甲状腺肿大,疗效肯定,中西医结合治疗优于单纯用西药治疗,值得临床推广应用。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其在感染免疫中的作用

调节性T细胞指的是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群，主要有CD4^＋CD25^＋细胞，CD8^＋细胞，NKT细胞，Trl细胞及TH3细胞等。对于调节性T细胞的研究也已有几十年的历史，但真正掀起对此类T细胞研究热潮的是在上世纪九十年代中期，当时Sakaguehi等报道了一群表达CD25的CD4^＋T细胞，其能避免裸鼠因过继转移CD4^＋CD25^＋细胞而引发的多种自身免疫疾病。后来研究发现这种调节性T细胞在肿瘤免疫，移植免疫及感染免疫等方面都有重要作用。本文主要就CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特性，作用的分子机制及其在感染免疫方面的研究进展作一综述。     

我国首例人体司氏伯特绦虫病——节片形态及流行病学意义

目的:探讨司氏伯特绦虫人体感染在进行病原诊断时对节片的识别及我国发现该绦虫感染的流行病学和公共卫生意义。方法:收集的节片进行活体观察和甲醛固定后观察,测量记录其形态以分析大体标本的形态特点。结果:患者送检节片为数节至10余节甚至数十节相连,呈典型的宽远大于长的特点,在活体时由于虫体遇冷收缩可在一端呈双角状;固定标本每节片平均长0.1cm,宽0.68~1.10cm,外观即显著区别于其它绦虫。结论:司氏伯特绦虫感染者排出的节片因收缩而显著变形,固定后其形态在长宽比例上迥异于其它绦虫,掌握该特征并追溯流行病学线索对诊断具有关键意义。     

恶性疟原虫抗原对健康人外周血T细胞免疫功能的影响

目的 目的 探讨恶性疟原虫抗原对健康人外周血T淋巴细胞免疫功能的影响。方法 方法 健康成人外周血单个核细胞 （PBMC） 体外分别用恶性疟原虫 （P. f） 抗原 （5 μg/ml） 和正常红细胞 （nRBC） 抗原 （5 μg/ml） 进行刺激, 同时给予IL?2维持细 胞增殖, 另外设立只加IL?2的阴性对照组进行培养。培养12 d时, 刺激组细胞再用对应的抗原刺激20 h, 用流式细胞仪 检测T淋巴细胞亚群分泌IL?4和IFN?γ的情况, 并用羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯 （Carboxyfluorescein diacetate, suc? cinimidyl ester, CFSE） 标记法检测T细胞增殖反应。结果 结果 健康人PBMC经P. f抗原刺激扩增后CD4+ T细胞的增殖指数 （PI） 明显高于nRBC抗原刺激组和阴性对照组 （P均＜0.05）, 但3组γδ T的PI差异无统计学意义 （P＞0.05）。P. f抗原组 分泌IL?4的CD4+ T细胞百分率明显高于nRBC抗原组和阴性对照组 （P均＜0.05）, 但3组分泌IFN?γ的CD4+ T细胞百分 率差异无统计学意义 （P＞0.05）。结论 结论 P. f抗原在体外可刺激健康人外周血CD4+ T细胞增殖活化, 后者通过优先分泌 IL?4而发挥免疫调节作用。     

一种简便高效制备伯氏疟原虫蛋白的实验方法

目的：探讨建立简便有效的大量制备鼠伯氏疟原虫蛋白的方法.方法：采集伯氏疟原虫感染晚期的大鼠外周血经肝素抗凝,通过白细胞滤器过滤去除白细胞,再使用30%阿拉伯胶溶液经密度梯度离心法分离含虫红细胞,经皂素溶血,收集纯化的原虫,虫体经超声波破碎后离心,上清液经SDS-PAGE电泳分析.采用蛋白凝胶灰度扫描方法分析蛋白电泳条带的分布.结果：从大鼠含虫外周血可分离制备出大量的可溶性疟原虫蛋白,对大鼠分离的疟原虫可溶性蛋白与小鼠来源的原虫可溶性蛋白比较,两种蛋白的电泳图谱完全相同.结论：利用大鼠模型可简便高效地制备大鼠伯氏疟原虫,结合超声波破碎法可提取足量的可溶性疟原虫蛋白抗原.     

不同刺激剂对健康人和结核患者外周血T细胞产生γ干扰素和肿瘤坏死因子-α的影响

目的:检测健康人和结核患者外周血经不同刺激剂刺激后T细胞亚群产生γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。方法:12名健康人和12例结核患者的外周血单个核细胞用佛波醇脂(PMA)+钙离子霉素(IM)、结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)、植物血凝素(PHA)刺激,莫能霉素阻断,流式细胞仪检测产生IFN-γ和TNF-α的T细胞亚群比例。结果:PMA+IM刺激健康人外周血αβ T细胞产生IFN-γ的比例明显高于结核患者(P<0.01);PMA+IM、Mtb-HAg和PHA刺激健康人外周血γδ T细胞产生IFN-γ的比例高于结核患者(P<0.05~P<0.01)。PMA+IM和PHA刺激健康人外周血αβ T细胞产生TNF-α的比例均高于结核患者(P<0.05);PMA+IM和PHA刺激健康人外周血γδ T细胞产生TNF-α的比例均高于结核患者(P<0.05)。结论:经不同刺激剂刺激后,健康人γδ T细胞产生IFN-γ的比例高于结核患者γδ T细胞产生IFN-γ的比例。经PMA和PHA刺激后,健康人αβ T和γδ T细胞产生TNF-α的比例高于结核患者。     

ESA刺激华支睾吸虫感染小鼠脾细胞分泌Th1／Th2的动态观察

目的 观察华支睾吸虫分泌排泄抗原（ESA）刺激感染小鼠脾脏单个核细胞Th1／Th2细胞因子的动态变化。方法双抗体夹心ELISA法检测华支睾吸虫感染后不同时间小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ,IL-4的动态变化。结果自感染后1w起IFN-1的表达量开始上升,第4w达高峰（P〈0．05）,此后开始下降,至第12w水平接近正常。与IEN-γ不同,IL4的表达自感染后第1w起持续升高,直至观察结束的12w（P〈0．05）。结论初步结果提示华支睾吸虫感染后急性期转向慢性期的过程中Th1／Th2细胞因子的表达经历了由Th1优势应答向Th2优势应答的转变。