13例小儿横纹肌肉瘤疗效分析

目的：分析小儿横纹肌肉瘤疗效,特别是大剂量化疗的效果。方法：对该院1998年1月至2005年10月收治的13例横纹肌肉瘤患儿临床资料进行分析。男8例,女5例;年龄7个月至12岁;依据美国横纹肌肉瘤研究组(IRS)的分期标准 Ⅰ期2例、Ⅱ期2例、Ⅲ期3例、Ⅳ期6例。所有患儿均经病理活检确诊,其中胚胎型12例,腺泡型1例。1例手术,1例手术加放疗,1例手术加化疗,10例手术加放疗及化疗。2002年前的病例化疗以VDCA、VAC和VadrC为主;2002年后采取了美国COG治疗横纹肌肉瘤的化疗方案,Ⅲ期采取CDV+IE方案治疗,Ⅳ期采用CT+VAC或CT+VAC+VCT方案治疗。结果：10例接受手术加放疗及化疗联合治疗的患儿2年生存率为60%,另外3例没有接受联合治疗的患儿全部死亡。2002年后患儿生存率（60%,3/5）高于2002年前生存率（37.5%,3/8）。患儿2年生存率2002年前为37.5%(3/8),2002年后为60%（3/5）,平均为46.2%(6/13)。结论：儿童横纹肌肉瘤病理类型以胚胎型为主,恶性程度高。晚期病例采取手术联合放、化疗,特别是大剂量化疗可取得较好疗效。     

儿童侵袭性真菌感染临床分析

目的 分析、总结儿童侵袭性真菌感染的临床特点,以利早期诊断,改善预后.方法 回顾分析2001年至2007年住院确诊侵袭性真菌感染的6例患儿临床资料.结果 全部患儿伴有基础疾病,并且都有发热.肺部感染4例,CT扫描出现新月征或气环征2例.肺外感染2例.半乳甘露聚糖试验1/5患儿阳性.4/6患儿为曲霉菌感染.主要以二性霉素B或二性霉素B脂质体治疗,4/6患儿治愈,1例死亡.结论 恶性血液系统疾病和严重免疫抑制是儿童侵袭性真菌感染发病的重要因素.患儿临床表现缺乏特异性,应结合影像学及实验室检查全面考虑进行诊断,曲霉菌感染常见.二性霉素B治疗儿童侵袭性真菌感染有效.     

晚期神经母细胞瘤患儿伴发凝血障碍:附 12例分析

目的 研究晚期神经母细胞瘤凝血象的变化。方法 选取12例Ⅳ期神经母细胞瘤患儿,以凝固法测定血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及纤维蛋白原(FIB),以ELISA双抗体夹心法测定血浆D-二聚体(DD)。结果 6例活动期Ⅳ期神经母细胞瘤患儿,凝血检查结果均出现异常。而5例处于静止期或完全缓解期(CR)的患儿除1例血浆DD轻度增高外,凝血检查结果均在正常范围。血浆DD为更敏感的指标,总阳性率为58．3％(7／12例),其中复发或活动期患儿85．7％(6／7例)出现异常,而处于静止期或CR期的患儿仅20．0％(1／5例)增高。结论 晚期神经母细胞瘤患儿在活动期和复发期伴有明显的凝血障碍,血浆DD是检测凝血异常的敏感指标,并对了解病情严重度、临床分期及疗效观察有重要价值。     

反向聚合酶链式反应测定Ewing肉瘤患者骨髓微小残留病变

目的　建立以EWS FLI 1融合基因为标志 ,用反向聚合酶链式反应 (PCR)测定骨髓Ewing肉瘤细胞的体系。方法　用RPMI 16 40培养液培养Ewing肉瘤T1细胞系 ,将其与正常人骨髓单个核细胞按比例混合 ,使T1细胞浓度依次为 10 0 % ,10 -3 ,10 -4 ,10 -5,10 -6,10 -7,0 ,提取总RNA ,合成cDNA ,PCR扩增EWS FLI 1;同时选择 5例骨髓转移的Ewing肉瘤患者 ,测定诊断时及缓解后骨髓EWS FLI 1融合基因。结果　T1细胞浓度为 10 0 % ,10 -3 ～ 10 -6时 ,EWS FLI 1均阳性 ;10 -7及 0时阴性。 5例患者诊断时骨髓EWS FLI 1均阳性 ,完全缓解后 2例转阴。结论　以EWS FLI 1融合基因为标志的反向PCR测定骨髓Ewing肉瘤细胞的灵敏度为 10 -6,它是测定骨髓Ewing肉瘤细胞高度敏感的方法 ;Ewing肉瘤患者完全缓解时 ,部分患者骨髓仍存在肿瘤细胞。     

移植物化学修饰减轻小鼠半相合骨髓移植后的急性移植物抗宿主病

背景:甲氧基聚乙二醇是一种无免疫原性的兼性聚合分子,可以共价结合方式修饰各种蛋白质,减少其免疫原性.因此,在进行半相合造血干细胞移植时,若能用甲氧基聚乙二醇对移植物的T细胞进行化学修饰,阻断其激活的途径,就可能减轻移植物抗宿主病反应,提高移植成功率.目的:构建小鼠半相合骨髓移植模型,观察甲氧基聚乙二醇修饰移植物对小鼠H2半相合骨髓移植后移植物抗宿主病的影响.设计、时间及地点:随机化配对设计实验,于2003-03/11在解放军总医院医学动物实验中心和小儿内科实验室完成.材料:纳入20只8～10周龄雄性近交系BALB/cH-2d小鼠作为供鼠,60只8-10周龄杂交获得的雌性CB6 F1代".m小鼠作为受鼠.甲氧基聚乙二醇为美国Sigma公司产品.方法:常规制备供鼠骨髓及脾细胞混合悬液.受鼠行总剂量8.0 GY60Co γ射线全身均匀照射,照射后随机分为3组,每组20只.照射对照组每只受鼠经尾静脉输入RPMI-1640培养摹基0.5 mL,单纯移植组照射后12 h内经尾静脉输入未处理的半相合供鼠骨髓及脾细胞混合悬液0.5 mL,修饰移植组照射后12 h内经尾静脉输入甲氧基聚乙二醇修饰的半相合供鼠骨髓及脾细胞混合悬液0.5mL.主要观察指标:移植后观察动物存活率、急性移植物抗宿主病理表现及存活小鼠的染色体核型.结果:照射对照组小鼠均在2周内死亡;修饰移植组小鼠30 d存活率显著高于单纯移植组(75%,40%,x2=5.01,P=0.025).取死亡小鼠的爪垫皮肤、肝及小肠肠管作病理组织学检查,修饰移植组急性移植物抗宿主病病理表现减轻,Thomas病理分级轻于单纯移植组.移植后75 d应片j染色体C带显色法检测存活受鼠的嵌合体,证实为完全供者型植入.结论:甲氧基聚乙二醇修饰移植物可明显减轻急性移植物抗宿主病,提高半相合骨髓移植存活率.     

儿童急性巨核细胞白血病

本研究通过实例分析儿童急性巨核细胞白血病（AMKL）的临床、病理和生物学特征。用骨髓细胞涂片观察细胞的形态;用流式细胞技术和免疫组织化学方法检测肿瘤细胞的免疫表型。结果表明：本例以发热、出血、肝脾淋巴结肿大为主要临床症状,白细胞增多伴两系血细胞减少,骨髓干抽,骨髓原始巨核细胞异常增生超过30%,原始细胞的免疫分型为CD41＋CD61＋。骨髓活检显示,髓内增生的单个核大细胞为CD42b＋。最后诊断为急性巨核细胞白血病。结论儿童急性巨核细胞白血病较为少见,容易误诊,预后不好;免疫分型和免疫组织化学检测有助于该病的早期诊断和预后评估。     

CXCR4在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH上的表达及其对化疗敏感性研究

目的：探讨CXCR4在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH表面的表达及其对化疗药物环磷酰胺（CTX）、吡柔比星（THP）的敏感性。方法：体外培养SK-N-SH神经母细胞瘤细胞,流式细胞仪测定CXCR4在其表面的表达。通过CH50试验明确化疗药物CTX、THP对SK-N-SH细胞的效应剂量。最后通过Real-time PCR及流式细胞术在基因及蛋白水平检测化疗药物对SK-N-SH细胞中CXCR4表达的变化。结果：FACS检测结果表明CXCR4分子在SK-N-SH肿瘤细胞中高表达,但化疗药物不能降低其在蛋白水平的表达。Real-time PCR结果显示化疗药物也不影响CXCR4在mRNA水平的表达。结论：与我们前期报道化疗药物能影响神经母细胞瘤细胞LA-N-5上CXCR4的表达不同,CTX、THP不能显著降低转移相关趋化因子受体CXCR4在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH表面的表达,提示神经母细胞瘤来源不同,其对化疗药物的敏感性不同。     

脂多糖干预小胶质细胞后细胞内促血小板生成素与炎症因子的表达

目的 探讨脂多糖(LPS)干预小胶质细胞后细胞内促血小板生成素(TPO)及炎症因子的表达.方法将BV2细胞分为6组.1.空白12 h组:BV2细胞正常培养12 h,不添加任何干预因素;2.LPS 0.5 mg·L-1 12 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;3.LPS 1.0 mg·L-112 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1;4.空白 24 h组:BV2细胞正常培养24 h,不添加任何干预因素;5.LPS 0.5 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;6.LPS 1.0 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1.采用ELISA法检测BV2细胞内炎症因子(IL-1、IL-6、NF-κB)和TPO的表达;实时荧光定量PCR法检测细胞内IL-1 mRNA、IL-6 mRNA、NF-κB mRNA及TPO mRNA表达水平.结果 LPS 0.5 mg·L-1和1.0 mg·L-1干预BV2细胞后12 h和24 h,IL-1、IL-6、NF-κB和TPO表达水平及其mRNA水平均较空白组升高,且12 h组高于24 h组,但其差异均无统计学意义(Pa>0.05).TPO表达水平与IL-1、IL-6、NF-κB及其mRNA水平的表达均呈显著正相关(Pa<0.01).结论 LPS干预小胶质细胞后IL-1、IL-6、NF-κB和TPO表达升高,参与炎症、凋亡和神经元保护等多种调控机制.     

儿童急性淋巴细胞白血病诱导缓解化疗合并大脑后部可逆性脑病综合征的诊治

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)诱导缓解化疗合并大脑后部可逆性脑病综合征(PRES)的诱发因素,以便早期识别和正确治疗.方法 回顾分析2008年7月-2009年3月收治的4例ALL患儿诱导缓解化疗合并PRES的诊断和治疗.结果 4例PRES患儿的临床表现包括头痛、癫癎、行为异常、认知障碍、昏迷、幻视和皮质盲;头颅MRI检查均显示双侧顶枕叶白质水肿的长T1长T2信号,此外2例额叶受累,1例颞叶受累.4例PRES除可能与联合化疗相关外,2例合并高血压,2例合并败血症.予停化疗、降血压、控制感染等处理,2例临床表现和影像病灶2周内缓解,1例临床表现1周内缓解而影像病灶8个月无明显改善,1例临床表现和影像病灶8个月随访逐渐好转.结论 ALL诱导缓解化疗合并PRES的诱因是多方面的,包括联合化疗、高血压和感染等.行头颅MRI检查以早期确诊并及时去除病因,避免水久性脑损伤.