氧化型低密度脂蛋白中不同氧化产物对小鼠腹腔巨噬细胞溶酶体胆固醇蓄积的影响

为研究氧化型低密度脂蛋白中不同氧化产物对小鼠腹腔巨噬细胞溶酶体胆固醇蓄积的影响。分别用1 0 0mg L的铜氧化的低密度脂蛋白和次氯酸钠氧化的低密度脂蛋白处理小鼠腹腔巨噬细胞 2 4h ,分别测定巨噬细胞溶酶体中胆固醇和总蛋白的含量以及溶酶体中组织蛋白酶L的活性。结果发现 ,铜氧化型低密度脂蛋白和次氯酸钠氧化型低密度脂蛋白均可引起总胆固醇和总蛋白在溶酶体蓄积 (实验组总胆固醇分别为 1 6 .90± 0 .1 5 μg和1 5 .1 1± 0 .5 4 μg ,对照组为 3.2 8± 0 .0 8μg ,P <0 .0 1 ;实验组总蛋白分别为 1 7.93± 1 .6 6 μg和 2 1 .0 0± 1 .6 8μg ,对照组为 1 3.39± 2 .6 4 μg ,P <0 .0 1 )。但蓄积的胆固醇类型有所不同 ,前者以游离胆固醇为主 (游离胆固醇为 1 4 .1 3± 0 .1 4μg ,胆固醇酯为 4 .77± 0 .33μg) ;后者则以胆固醇酯为主 (游离胆固醇为 5 .0 1± 0 .30 μg ,胆固醇酯为 1 0 .1 0± 0 .4 8μg)。铜氧化低密度脂蛋白可造成溶酶体组织蛋白酶L活性明显下降 (1 1 .1± 2 .3kau g比 73.2± 1 5 .0kau g ,P <0 .0 1 ) ,而次氯酸钠氧化低密度脂蛋白的作用不明显 (73.6± 9.5比 73.2± 1 5 .0 ,P >0 .0 5 )。以上结果提示 ,不同氧化产物引起溶酶体胆固醇蓄积的种类不同 ,而蛋白降解受阻可     

载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积与血清抗氧化低密度脂蛋白的抗体水平

背景：低密度脂蛋白的氧化是动脉粥样硬化发生和发展过程中关键的影响因素，血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法对动脉粥样硬化斑块的评估价值如何?目的：探讨载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法，并分析血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积的评估价值。设计：单因素方差分析(分组对照实验)。单位：一所大学的营养与代谢性疾病实验室。对象：apoE基因缺陷小鼠作为阳性组(品系C57BL／6J，n=15)，正常小鼠作为对照组(品系C57BL／6J，n=15)。干预：两组实验小鼠在层流架中分笼喂养，自由饮水摄食，16周后自小鼠眼眶静脉采血，分离小鼠血清。分离载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠血清，用酶联免疫吸附法检测血清氧化低密度脂蛋白抗体水平；用油红O染色法和图像分析法测量小鼠动脉粥样硬化斑块面积。主要观察指标：载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠小鼠氧化低密度脂蛋白的水平和动脉粥样斑块面积。结果：apoE基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白的水平显著高于正常小鼠的水平[(0．079&;#177;0．028)％，[0．012&;#177;0．001)％，F=10．666，P&;lt;0．01]；载脂蛋白E基因缺陷小鼠的动脉粥样硬化斑块面积[(26．25&;#177;9．20)％]也显著高于正常小鼠(0％)，且二者之间呈显著性相关，r=0．638，P&;lt;0．01。结论：载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平与其动脉粥样斑块面积的大小密切相关，是载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成的一个重要指标。     

气管切开术后专用一次性护理包的设计

临床常规对气管切开术后的患者每天需做气管切开护理2次,在气管切开护理操作前,需在治疗室准备一次性换药碗,并打开置于治疗盘上,将包内用物进行整理和添加棉球、倾倒消毒液;同时还需要备齐包外用物;在护理过程中,治疗盘为     

载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积与血清抗氧化低密度脂蛋白的抗体水平

背景低密度脂蛋白的氧化是动脉粥样硬化发生和发展过程中关键的影响因素,血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法对动脉粥样硬化斑块的评估价值如何?目的探讨载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法,并分析血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积的评估价值.设计单因素方差分析(分组对照实验).单位一所大学的营养与代谢性疾病实验室.对象apoE基因缺陷小鼠作为阳性组(品系C57BL/6J,n=15),正常小鼠作为对照组(品系C57BL/6J,n=15).干预两组实验小鼠在层流架中分笼喂养,自由饮水摄食,16周后自小鼠眼眶静脉采血,分离小鼠血清.分离载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠血清,用酶联免疫吸附法检测血清氧化低密度脂蛋白抗体水平;用油红O染色法和图像分析法测量小鼠动脉粥样硬化斑块面积.主要观察指标载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠小鼠氧化低密度脂蛋白的水平和动脉粥样斑块面积.结果apoE基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白的水平显著高于正常小鼠的水平[(0.079±0.028)%,(0.012±0.001)%,F=10.666,P＜0.01];载脂蛋白E基因缺陷小鼠的动脉粥样硬化斑块面积[(26.25±9.20)%]也显著高于正常小鼠(0%),且二者之间呈显著性相关,r=0.638,P＜0.01.结论载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平与其动脉粥样斑块面积的大小密切相关,是载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成的一个重要指标.     

苦参总生物碱对哮喘大鼠气道重建的防治作用

目的探讨苦参总生物碱对哮喘大鼠气道重建的防治作用及其潜在机制。方法随机将40只健康的雄性SD大鼠分为四组,每组10只,分别为:空白组、模型组、给药组(苦参总生物碱组)和阳性对照组(地塞米松组)。采用卵蛋白-氢氧化铝混悬液处理大鼠构建哮喘大鼠模型,空白组以生理盐水替代;给药组在激发后1 h灌胃10 mg/kg苦参总生物碱水溶液,1次/d,共灌胃28 d;地塞米松组在激发后1 h灌胃0. 5 mg/kg地塞米松溶液,1次/d,共灌胃28 d;空白组和模型组灌胃等量生理盐水。药物干预结束后处死大鼠。通过HE染色观察大鼠肺组织的形态变化,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9),酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清中MMP-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量,用蛋白印记法检测大鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1蛋白的表达。结果与空白组相比,模型组大鼠气道周围炎症细胞浸润并伴有平滑肌增生,血清和肺组织中的MMP-9、TIMP-1和TGF-β1水平显著上升(P 0. 05);与模型组相比,对大鼠灌胃苦参总生物碱后,支气管增生细胞和周围炎症细胞的浸润均减少,血清和肺组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达显著下调(P 0. 05),与地塞米松组具相同变化趋势。结论苦参总生物碱可以有效地改善哮喘大鼠气道的重建,其分子机制可能是下调MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达。     

2010—2018年某医院重症监护病房老年病人耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌血流感染危险因素及预后分析

目的探讨重症监护病房( ICU)中老年病人耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌( CRAB)血流感染危险因素及预后相关因素。方法回顾性收集 2010年 1月至 2018年 6月四川大学华西医院 ICU中 239例鲍曼不动杆菌血流感染老年病人的基本情况、疾病相关因素、侵入性操作相关因素、药物使用相关因素、辅助检查相关因素的病历资料。病例组为 157例 CRAB血流感染老年病人,对照组为同时期 82例碳青霉烯类敏感鲍曼不动杆菌( CSAB)血流感染老年病人,分析 CRAB血流感染的危险因素。并根据 30 d预后转归情况,将 239例老年病人进一步分为 114例预后良好组, 125例预后不良组,分析病人预后相关危险因素。结果多因素 logistic回归分析表明:运用碳青霉烯类抗生素、入院后感染前 ≥2种抗菌药物联用、深静脉置管、留置导尿管、是 CRAB血流感染老年病人的独立危险因素( P＜0.05)。影响鲍曼不动杆菌血流感染老年病人 30 d预后相关独立危险因素为: CRAB感染、入住 ICU时急性生理学及慢性健康状况评分系统( APACHⅡ)评分( P＜0.05)。结论运用碳青霉烯类抗生素、入院后感染前 ≥2种抗菌药物联用、深静脉置管、留置导尿管是 CRAB血流感染老年病人的危险因素, CRAB感染、入住 ICU时 APACHⅡ评分高提示老年病人预后差。     

甜菜碱对载脂蛋白E~(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生过程中铜锌超氧化物岐化酶基因甲基化及表达的影响

目的 检测栽脂蛋白E-/-小鼠动脉粥样硬化发生过程中肝脏铜锌超氧化物岐化酶基因启动子区CpG岛甲基化及其表达状态,探讨甜菜碱对动脉粥样硬化的作用及其可能的机刺.方法 将正常的C57BL/6J小鼠作为正常对照组,同品系载脂蛋白E-/-小鼠分为模型组、1%、2%和4%甜菜碱组.用油红O染色法检测小鼠主动脉窦脂质斑块面积,应用甲基化特异性聚合酶链反应检测肝脏钢锌超氧化物岐化酶基因甲基化,荧光定量逆转录聚合酶链反应检测铜锌超氧化物岐化酶mRNA表达,免疫组织化学检测其蛋白表达.结果 饲养至14周,2%和4%甜菜碱组小鼠主动脉窦脂质斑块面积明显少于模型组(P<0.05);各组铜锌超氧化物岐化酶基因CpG岛甲基化状态差异无显著性(P>0.05);各时间段正常对照组铜锌超氧化物岐化酶mBNA表达均高于模型组,7周时1%甜菜碱组mRNA表达高于2%和4%甜菜碱组,14周时1%甜菜碱组mRNA表达高于模型组和2%甜菜碱组;各时间段正常对照组铜锌超氧化物歧化酶蛋白表迭均高于模型组、1%、2%和4%甜菜碱组(P<0.05),但模型组、1%、2%和4%甜菜碱组间无显著性差异.结论 铜锌超氧化物岐化酶基因可能没有参与动脉粥样硬化过程中DNA甲基化的异常改变,补充甜菜碱可以增加肝脏铜锌超氧化物岐化酶mBNA表达,改善载脂蛋白E>-/-小鼠的脂质沉积,减少主动脉窦粥样斑块面积.     

三种海带多糖的降糖作用

海带经酶解 ,季胺盐及乙醇分级沉淀 ,离子交换 ,凝胶层析等处理 ,从中逐级分离到 3种多糖 :粗多糖 ,岩藻半乳多糖硫酸酯 ( FGS) ,FGS的高纯组分之一 F4 。经口 FGS,给药一次 ,对正常小鼠及四氧嘧啶致高血糖小鼠降糖作用不明显 ,但长期给药 ( 2 0 d) ,剂量在每天 80 0 mg· kg-1时 ,粗多糖 ,FGS分别可使四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平降到 82 .3% ( P<0 .0 5)和 76.2 % ( P<0 .0 1)。腹注 F4 ,剂量在 50 0 mg· kg-1,对正常小鼠及四氧嘧啶致高血糖小鼠 ,分别在给药 3h与 7h,使血糖水平降到 68.5%和 52 .8% ,且可在 2 4 h内维持降糖作用。急毒实验证明 :FGS对小鼠无毒害作用。     

人脐静脉内皮细胞体外培养、鉴定与形态学特征观察

目的：建立人血管内皮细胞的培养模型，为体外研究动脉硬化发病机制提供重要的实验手段。方法：采用1．25g／L胰蛋白酶(2．5g／L胰蛋白酶：0．2g／LEDTA：1：1V／V)消化、分离和传代人脐静脉内皮细胞，并用光镜、电镜和免疫组化等方法进行内皮细胞的形态观察和鉴定。结果：原代培养的内皮细胞在接种后约2h开始贴壁生长，光镜下内皮细胞呈铺路石状镶嵌排列；免疫组化可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应；电镜下可见胞浆中有W-P小体，证实培养的细胞为内皮细胞。结论：用胰酶灌注消化脐静脉可获得高纯度的内皮细胞，细胞存活率高。本方法为血管内皮细胞的研究提供了实验模型。     

改良连台手术护理管理措施的临床应用研究

目的结合"优质护理"服务理念,探讨"无缝对接"工作流程在连台手术中的应用。方法选择本科2013年1月~2013年12月开展的硬膜外麻醉连台手术468台作为研究对象,并按开展时段将其分为两组,其中未实施改良安全管理措施的作为对照组,实施了安全管理改进措施的作为干预组,比较两组内患者的手术时长、术间等待时长、差错发生次数、患者及医生满意度之间有无差别。结果两组手术时长比较,差异无统计学意义(P0.05),但干预组的术间等待时长、差错发生次数明显下降,与对照组比较差异均具有统计学意义(均P0.05),且干预组医生和患者满意度明显提高,与对照组比较差异均具有统计学意义(P0.05)。结论结合"优质护理"服务理念,"无缝对接"工作流程应用于连台手术的安全管理可明显缩短术间等待时长,减少差错事故的发生,提高患者及医生的满意度。