三七总苷对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质分泌及降解的影响

目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株HK-2。应用消化法检测HK-2细胞培养上清液中羟脯氨酸水平,EL ISA方法检测HK-2细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)、金属蛋白酶-1(MM P-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(T IM P-1)蛋白分泌量,RT-PCR方法检测MM P-1和T IM P-1 mRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,HK-2细胞培养上清液中胶原蛋白和FN分泌量显著增高,MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值降低,而PN S 400、600、800 m g/L可使尿毒血清增加的HK-2培养上清液胶原蛋白分泌量回降;200、400、600、800 m g/L可使FN分泌量回降;100、200、400、600、800m g/L可使尿毒血清降低的MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值回升。结论在体外实验中,PN S可降低尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞胶原蛋白及FN的分泌,升高MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值,促进ECM降解,从而有效延缓人肾小管-间质纤维化的进展。     

三七总苷对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质分泌及降解的影响

目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株HK-2。应用消化法检测HK-2细胞培养上清液中羟脯氨酸水平,EL ISA方法检测HK-2细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)、金属蛋白酶-1(MM P-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(T IM P-1)蛋白分泌量,RT-PCR方法检测MM P-1和T IM P-1 mRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,HK-2细胞培养上清液中胶原蛋白和FN分泌量显著增高,MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值降低,而PN S 400、600、800 m g/L可使尿毒血清增加的HK-2培养上清液胶原蛋白分泌量回降;200、400、600、800 m g/L可使FN分泌量回降;100、200、400、600、800m g/L可使尿毒血清降低的MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值回升。结论在体外实验中,PN S可降低尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞胶原蛋白及FN的分泌,升高MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值,促进ECM降解,从而有效延缓人肾小管-间质纤维化的进展。     

游离脂肪酸对肾小管上皮细胞TIMP-1、PAI-1表达及细胞外基质分泌的影响

目的探讨游离脂肪酸（Free fatty acids，FFAs）对人肾小管上皮细胞（renal tubular epithelial cells，RTECs）细胞外基质降解酶抑制剂[tissue inhibitor of metalloproteinase 1（TIMP-1）、plasminogen activator inhibitor 1（PAI-1）]表达及细胞外基质[纤维连接蛋（fibronectin，FN）、胶原]分泌的影响。方法用去脂牛血清白蛋白（defatty bovine serum albumin，d-BsA）为油酸（Oil acids，OA）载体，用不同浓度OA刺激培养RTECs，以不加d-BSA及只加普通培养液的细胞作对照组，应用反转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测RTECs TIMP-1mRNA、PAI-1mRNA的表达水平，酶联免疫吸附法（FLISA法）、羟脯氨酸消化法分别检测培养上清FN、胶原的蛋白水平。结果d-BSA组与空白对照组RTECs的细胞外基质降解酶抑制剂（TIMP-1mRNA、PAI-1mRNA）表达及细胞外基质蛋白（FN、胶原）分泌比较差异无显著性（P＞0．05），而不同浓度OA组与空白对照组比较差异有显著性（P＜0．05）；且随着OA浓度增加，对RTECs TIMP-1mRNA、PAI-1mRNA表达以及对FN、胶原蛋白分泌的促进作用有增强趋势。结论FFAs通过促进细胞外基质（FN、胶原）的生成及抑制其降解，使其沉积在肾间质，进而在肾小管间质纤维化发生发展中起着重要的作用。     

肺巴西奴卡氏菌病(1例报告及文献复习)

奴卡氏菌属引起的局限性或全身性化脓性疾病,国内已报道16例。大多数病例由星形奴卡氏菌引起。本例是该菌引起肺部感染后血内感染,从血中分离出巴西奴卡氏菌确诊。者男,55岁。因咳嗽、咯浓痰、发热及畏寒1周于1988年3月5日入院。30年前患过“肺炎”,经住院“治愈”。体检:T 39℃、P98、R20,B P 17.3/11.5kPa。神清,体瘦,巩膜轻度黄染,右下肺可闻湿性罗音。心脏听诊无异常。肝右肋下5.5 cm、质软、边钝,轻度压痛。辅助检查:血象:WB C16.5×10~9/L,N82%、L18%、Hb     

BMP-7对油酸诱导的肾小管上皮细胞转分化的预防作用

目的探讨BMP-7对油酸诱导的人肾小管上皮细胞转分化的预防作用。方法应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株（HK-2细胞）。先用不同浓度BMP-7预处理HK-2细胞,再用400μmol/L油酸刺激HK-2细胞,采用RT-PCR法和ELISA法检测转化生长因子-β1的表达,采用RT-PCR法检测α-平滑肌动蛋白的表达。结果不同浓度BMP-7预处理对静息培养的肾小管上皮细胞TGF-β1和α-SMA的表达无显著影响。而一定浓度BMP-7可以显著下调油酸诱导的肾小管上皮细胞TGF-β1和α-SMA的表达,并下调TGF-β1的分泌。结论BMP-7可以预防油酸诱导的肾小管上皮细胞转分化。     

马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤中p53和Caspase-3活性的变化

目的：研究马兜铃酸（AA）对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）毒性作用中053和Caspase-3活性的改变,对其在AA肾毒性作用中的意义进行探讨．方法：用乳酸脱氢酶（LDH）释放试验测AA对HK-2的直接毒性作用,相差显微镜观察细胞形态学改变,Hoechsd3258染色法观察细胞凋亡形态的改变,流式细胞技术测细胞凋亡百分率,RT-PCR法测p53mRNA的表达水平,分光光度法测细胞Caspase-3活性改变．结果：AA浓度为80,160mg／L时,LDH释放率显著增高（P〈0．01）;10mg／LAA可诱导HK-2细胞凋亡百分率显著增高,AA为40mg／L时,细胞凋亡形态改变最明显和细胞凋亡比例最高（P〈0．01）;各组HK-2细胞053mRNA表达水平有统计学差异;40mg／LAA诱导HK-2细胞凋亡时,细胞内Caspase-3活性显著升高（与正常组比较,P〈0．01）．结论：AA能诱导HK-2细胞凋亡,其凋亡途径可能是非053依赖途径;凋亡过程中存在Caspase-3酶的激活．     

环磷酰胺、左旋咪唑与辅酶Q_(10)治疗乙脑的疗效观察(附45例临床分析)

1983～1984年我们对45例流行性乙型脑炎(简称乙脑)在传统的治疗基础上加以调整机体免疫功能,即以环磷酰胺、左旋咪唑与辅酶Q_(10)治疗(简称治疗组),另以100例仍以传统的综合治疗为对照(简称对照组)。根据临床观察两组疗效有显著差异。现报告如下。材料及方法一、病例选择标准(诊断标准): 1.严格的流行季节:全部均在5～7月发病。2.临床表现:突然起病,高热,头痛,呕吐,意识障碍,抽搐。脑膜刺激征较轻。3.全部经腰穿查脑脊液压力升高,白细胞及蛋白均轻度升高,糖、氢化物正常。     

白细胞介素-13对肾小球系膜细胞炎症反应的拮抗作用

目的:探讨白细胞介素-13(IL-13)对肾小球系膜细胞(MC)炎症反应的调节作用。方法:ELISA法测定体外培养MC上清中TNF-α浓度。流式细胞术检测MC膜表面ICAM-1表达。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)评估MCTNF-αmRNA及ICAM-1mRNA表达。结果:未受刺激的MC无TNF-αmRNA及其蛋白表达。经脂多糖(LPS)(10mg/L)刺激后,MC可高表达TNF-αmRNA及其蛋白。IL-13浓度为1μg/L、10μg/L时显著抑制LPS诱导MC表达TNF-αmRNA及其蛋白。IL-13(0.1μg/L)无抑制作用,IL-13(100μg/L)时完全抑制LPS诱导MC分泌TNF-α。无任何刺激时,MC低表达ICAM-1。TNF-α(100μg/L)诱导MC高表达ICAM-1mRNA及其蛋白。IL-13(10μg/L)和TNF-α(100μg/L)共作用MC,各时点均显示IL-13对TNF-α诱导MC表达ICAM-1mRNA及蛋白有抑制作用。结论:IL-13既抑制LPS刺激MC分泌TNF-α,也抑制TNF-α诱导MC表达膜糖蛋白ICAM-1。提示IL-13能从多个环节抑制MC的炎症反应。     

系膜增生性肾炎患者血清IL-4、sIL-6R、IL-10的检测及其临床意义

了解系膜增生性肾炎 (MsPGN )患者血清白细胞介素 4(IL 4)、白细胞介素 10 (IL 10 )和可溶性白细胞介素 6受体 (sIL 6R )水平及其意义。用双抗体夹心ELISA法同步定量测定经肾脏病理活检确诊的 44例MsPGN患者及正常人 40例血清IL 4、sIL 6R及IL 10的水平。MsPGN患者血清中的IL 4、IL 10及sIL 6R明显高于正常人 (P <0 0 1) ;在MsPGN中临床符合原发性肾病综合征 (PNS )的患者血清IL 4水平与其 2 4h尿蛋白定量 (2 4hUPQ )呈正相关 (n =31,r=0 5 0 1,P <0 0 1)。在MsPGN患者的发病机制中 ,IL 4和sIL 6R作为一组致炎症因子介导肾炎的免疫反应过程 ,引起机体的免疫损伤 ;而IL 10则为抑炎症因子 ,对机体可能有保护作用     

罗格列酮对阿霉素致肾小球硬化症大鼠的尿蛋白排泌量及肾小球蛋白(synaptopodin)表达的影响

目的 观察罗格列酮(胰岛素增敏药)对阿霉素致肾病大鼠的尿蛋白排泌量及肾小球蛋白表达的影响.方法 用罗格列酮治疗阿霉素诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠模型;用双缩脲法动态检测大鼠24 h尿蛋白量;分别用荧光实时定量PCR和免疫组织化学法检测大鼠肾组织synaptopodin mRNA和蛋白表达量.结果 罗格列酮能显著减缓FSGS大鼠尿蛋白排泄量的增加(P＜0.05);恢复大鼠肾组织蛋白表达量(P＜0.05),而不影响其mRNA表达量(P＞0.05);FSGS大鼠肾组织蛋白表达量与尿蛋白排泄量呈负相关(P＜0.01).结论 罗格列酮能减轻FSGS模型尿蛋白排泌量,其机制可能部分与维持足细胞足突肌动蛋白微丝骨架系统的稳定有关.