偶氮胂Ⅲ测定血清镁

目的 :建立简便、灵敏的偶氮胂Ⅲ (ArsenanoⅢ )血清镁测定法。方法 :在碱性条件下 ,用EGTA消除钙的干扰 ,偶氮胂Ⅲ与镁离子形成蓝紫色络合物 ,以分光光度法测定血清镁。结果 :偶氮胂Ⅲ -镁反应液的最大吸收峰为 6 15nm ,反应最适pH8 8,偶氮胂Ⅲ最适浓度为 15 0umol/L ,EGTA加入量为 2 0 0umol/L。本法批内CV及批间CV(n =2 0 )分别为 1 70～ 2 10 %、2 17～ 2 5 7%。平均回收率为 99 3% ,线性 0～ 3 0mmol/L。胆红素 (5 0 0umol/L以内 ) ,血红蛋白 (7g/L)。脂肪乳剂Interlipid(4g/L)对测定无干扰。该法与MTB法对照 ,结果无显著差异。 (P >0 0 5 )。结论 :偶氮胂Ⅲ测定血清镁简便、快速、灵敏、可靠 ,适于手工分析和自动化分析     

丹参液在体外对血小板活化的抑制作用研究

目的：探讨丹参液在体外对血小板活化的抑制作用。方法：用流式细胞仪三色分析测定丹参液在体外对血小板活化膜表面纤维蛋白原受体(FIB-R)和P-选择素(CD42P)的表达。结果：丹参液有保护血小板FIB-R和CD42P被活化，同时部份抑制ADP活化血小板。结论：丹参液是一种较强的抗血小板活化药物，在血栓性疾病的防治中有积极作用。     

抑制端粒保护蛋白TPP1表达诱导ATM依赖的DNA损伤反应

目的:构建端粒保护蛋白TPP1短发夹RNA表达载体,探讨抑制TPP1表达后对端粒DNA损伤及细胞增殖的影响.方法:体外构建端粒保护蛋白TPP1 shRNA逆转录病毒表达载体shTPP1-01,shTPP1-02,与表达外源性TPP1的TPP1-HA质粒共同转染293T细胞,Western Blot检测shTPP1抑制外源性TPP1蛋白表达;RT-PCR检测shTPP1抑制小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast, MEF)内源性TPP1 mRNA的表达. 再用shTPP1分别感染ATM / MEF和ATM-/- MEF细胞后,分别采用细胞生长曲线和BrdU掺入法检测细胞增殖,免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交法(IF/PNA-FISH)检测端粒功能障碍诱导损伤灶(TIF)的形成.结果:shTPP1-01和shTPP1-02均能明显抑制外源性TPP1蛋白和内源性TPP1mRNA的表达,shTPP1-01和shTPP1-02作用于原代培养的MEFs后细胞生长缓慢,BrdU阳性细胞数量分别占8.0%和8.7%,显著低于对照细胞的29.3%(P＜0.01, P＜0.01);而细胞表现为体积变大,形态扁平等类似细胞衰老的形态学改变;IF/PNA-FISH法检测结果显示,shTPP1作用于ATM / MEF细胞后导致端粒DNA损伤标志物-磷酸化的H2AX(γ-H2AX)和53BP1损伤灶(TIF)的形成,定量结果显示约50%的ATM / 细胞中出现至少5个TIF;而在shTPP1作用后的ATM-/-细胞中,端粒γ-H2AX 和53BP1形成的TIF数量显著减少,出现5个TIF的细胞数量不足5%,与对照组细胞相比无显著性差异.结论:抑制TPP1表达后诱发端粒ATM依赖的DNA损伤反应,进而抑制细胞增殖,促进细胞衰老.     

冠心病患者血清残粒脂蛋白胆固醇变化及其临床意义的研究

本研究通过测定冠心病（CHD）患血清残粒脂蛋白胆固醇（RLP-C）的变化，以探讨RLP-C浓度与CHD之间的关系，为CHD的发病机理提供新的依据。     

流式细胞术测定T淋巴细胞亚群不同商家试剂的比较

T淋巴细胞亚群的测定在临床医学中越来越受到重视。应用流式细胞分析技术来检测人外周血T淋巴细胞亚群 ,具有简便、快速 ,计数细胞量大 ,相对精度好等优点。但是 ,由于流式细胞技术进入临床应用时间短 ,在操作技术规范、试剂质量指标等诸多方面还无严格标准可循 ,因而造成测定结果差异较大 ,可比性差。本文用国外的 3个商家试剂在流式细胞仪上测定T淋巴细胞亚群进行比较 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　仪器　美国B D公司FASCCalibur流式细胞仪。1 2　试剂　试剂① :B D公司三色标记T亚群试剂CD4FITC/CD8PE/CD3Percp、阴…     

偶氮氯膦Ⅰ显色8-羟基喹啉-5-磺酸褪色法测定血清镁

目的建立灵敏度高、选择性好、基本无干扰的血清镁偶氮氯膦Ⅰ显色8-羟基喹啉-5-磺酸褪色测定法。方法在pH9.8的三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲介质中,偶氮氯膦Ⅰ与镁络合显色,加入8-羟基喹啉-5-磺酸使镁解离,测定吸光度的下降来分析血清镁。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果线性范围为0~3.0mmol／L,回收率为98.5％~99.3％,平均98.9％。平均批内变异系数(CV)和批间变异系数(CV)分别为1.10％和1.88％。与甲基麝香草酚蓝比色法(MTB)(X1)比较:Y=1.003X1-0.025,r=0.995;与Calmagite比色法(X2)比较:Y=0.991X2 0.014,r=0.993;胆红素高达420μmol／L,血红蛋白10g／L,钙10.0mmol／L及intralipid高达12g／L时均对该法无显著干扰。结论该法具有简便、快速、基本无干枕和灵敏可靠的优点,适合血清镁的手工测定和自动分析。     

对高密度脂蛋白胆固醇手工直接法测定试剂的评价

高密度脂蛋白胆固醇 (ＨＤＬ Ｃ)的直接测定法因其不需预处理、快速、精密度好和准确度高等优点逐渐取代沉淀法。近几年国内外已先后研制出四类[1～ 4] 可对ＨＤＬ Ｃ作直接测定的方法 ,但这四类方法因测定条件要求较高 ,只适宜于全自动生化分析仪 ,不适宜手工操作和半自动生化分析仪。因此 ,最近东瓯公司研制出适宜于手工操作和半自动生化分析仪的ＨＤＬ Ｃ直接法 ,我们对其性能作初步评价如下。1　原理　　除ＨＤＬ以外的脂蛋白 (ＶＬＤＬ、ＬＤＬ)在聚阴离子作用下被抑制 ,ＨＤＬ在表面活性剂作用下被裂解 ,ＨＤＬ中的胆固醇与酶试剂反应…     

丹参对类风湿关节炎患者滑膜细胞肿瘤坏死因子α表达的影响

目的探讨丹参对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。方法抽取RA患者关节液进行体外培养分离滑膜细胞,在细胞培养至3～5代时,给予丹参处理,在处理48h后收集培养上清,ELISA检测TNF-α的表达水平。结果当丹参浓度依次以0,6.25,12.5,25,50,100mg/L递增时,TNF-α浓度分别为（161.68±7.55）pg/ml、（161.68±8.79）pg/ml、（163.49±25.68）pg/ml、（137.33±35.98）pg/ml、（81.32±22.84）pg/ml和（86.89±28.48）pg/ml。丹参浓度为50mg/L和100mg/L时,与加入丹参前比较差异有统计学意义（P值分别为0.001和0.004）。结论丹参可以抑制RA滑膜细胞TNF-α的分泌,并且这一抑制作用可能是其用于RA治疗的理论基础。     

川东北地区健康成人糖化血红蛋白水平研究

目的 检测川东北地区健康成人的糖化血红蛋白(HbA1c)水平,制订该地区HbA1c水平的参考区间。方法 选取无糖尿病史及其他重大疾病史的494例健康成人为研究对象,检测其静脉血HbA1c水平,同时进行血常规、血糖、血脂、肝功能、肾功能测定。采用正态分布法的双侧95%可信区间确定参考区间。结果 494例健康成人HbA1c水平呈正态分布,参考区间为4.482%~6.012%。不同性别人群HbA1c水平的比较差异无统计学意义(t=-0.905,P=0.336)。20~<35岁人群的HbA1c水平为(5.109±0.150)%,35~<65岁人群的HbA1c水平为(5.224±0.122)%,≥65岁人群的HbA1c水平为(5.444±0.125)%,不同年龄段人群HbA1c水平进行两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HbA1c水平与年龄呈正相关(r=0.338,P<0.01)。结论 不同地区有必要建立各自的HbA1c水平参考区间。     

甘氨脱氧胆酸对肝细胞膜流动性及脂质过氧化的作用研究

目的 研究甘氨脱氧胆酸(GDCA)对肝细胞脂质过氧化及细胞膜流动性的影响,探讨GDCA 肝损伤机理。方法 以 GDCA 为处理因素,体外培养肝细胞。结果 终浓度为250μmol/L 时,GDCA 组培养1～4小时,肝细胞 MDA 含量显著增加(P<0.001),细胞膜流动性显著降低(P<0.02)。随着丙二醛(MDA)的增加和细胞膜流动性的降低,肝细胞释放 ALT 增加,r 分别是0.945和0.986。结论 GDCA 能引起肝细胞 MDA 增加和膜流动性降低,从而导致肝细胞损伤,从新的角度解释了 GDCA 的肝损伤机理。