老年机械通气患者非结核分枝杆菌肺病的临床分析（附4例报告）

目的：探讨应用机械通气的老年患者非结核分枝杆菌（NTM）肺病的临床特征。方法回顾性分析解放军总医院4例老年机械通气合并NTM肺病患者的病历资料,并复习相关文献。结果4例患者均合并慢性阻塞性肺疾病、特发性间质性肺炎、支气管扩张症等慢性肺部基础病,确诊前均曾被疑诊为肺结核。临床症状无特异性,均有发热和咯痰,1例合并痰中带血。胸部CT表现多样,呈结节影、片状实变影和胸腔积液等,未出现典型的结节支气管扩张型和纤维空洞型征象。分枝杆菌培养均可见快速生长分枝杆菌,菌种鉴定1例为龟分枝杆菌,3例为脓肿分枝杆菌。1例脓肿分枝杆菌肺病患者接受药物治疗,其余3例因多器官功能障碍而未行抗分枝杆菌治疗,4例均死于多器官功能衰竭。结论 NTM是导致老年呼吸机相关肺炎的病原菌,感染症状无特异性,典型NTM肺病影像特征并不常见。对痰抗酸杆菌染色阳性的老年机械通气患者应重视NTM的培养和菌种鉴定。     

心理干预联合药物对吸烟者的戒烟效果评价

目的 评价伐尼克兰在临床实践中对戒烟门诊患者戒烟的有效性.方法 采用前瞻性观察性研究设计,选择符合纳入标准的吸烟者799人,每名患者首诊时进行标准的基线问卷评估,并在第1、第3和第6个月进行随访.由经过培训的医师对每名患者完成面对面的咨询和个体化戒烟干预.接受药物辅助戒烟者定为心理干预联合药物组(n=272),未用药者为单纯心理干预组(n=527).采用意向性分析的统计学方法分析比较两组的7天时点戒烟率、3个月随访时的1个月持续戒烟率和6个月随访时的3个月持续戒烟率.结果 6个月随访时,心理干预联合药物组的7天时点戒烟率显著高于单纯心理干预组(34.6% vs. 23.1%;OR=1.75,95% CI:1.27～2.42;P<0.001),心理干预联合药物组的3个月持续戒烟率也显著高于单纯心理干预组(31.3% vs. 18.2%;OR=2.04,95%CI:1.46～2.86;P<0.001).1和3个月随访时,心理干预联合药物组无论是7天时点戒烟率还是1个月持续戒烟率均高于单纯心理干预组.结论 在真实临床实践的戒烟门诊中,给予戒烟者药物辅助戒烟可有效提高戒烟率.     

急性呼吸窘迫综合征患者外周血单核细胞mCD14的表达及意义

目的观察急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者外周血单核细胞mCD14的表达情况,并探讨其意义。方法对5例ARDS患者及10例健康志愿者,分别分离其外周血单核细胞,用抗生物素-生物素-过氧化酶复合物技术(ABC法)检测其mCD14的表达。结果ARDS组及对照组外周血mCD14阳性单核细胞的百分率分别为94.3%±1.5%、93.6%±1.7%,两组间无统计差别(P>0.05)。结论ARDS患者及健康志愿者外周血单核细胞高表达mCD14,说明它们对LPS具有较高的潜在识别能力,一旦有LPS存在或入侵,这些细胞将可能被激活并释放介质。     

重组Shh因子对海水浸泡肺微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响研究

目的 观察不同剂量重组Shh(recombinant sonic hedgehog,rShh)因子对海水浸泡肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC)的促进增殖及抗凋亡作用.方法 组织块法原代培养大鼠PMVEC,建立大鼠PMVEC海水浸泡模型,加入不同剂量重组Shh因子,采用TUNEL法检测PMVEC凋亡率.采用2,3-苯基溴化四唑(MTT)染色计数法测定细胞增殖活性.结果 海水浸泡可导致PMVEC损伤,表现为PMVEC细胞增殖受到抑制以及凋亡发生率增加.重组Shh能降低海水所致PMVEC增殖抑制率和其凋亡率,在实验剂量范围内,其促增殖和抗凋亡作用呈剂量依赖性.结论 重组Shh可促进海水浸泡PMVEC增殖和抑制其凋亡.     

大鼠静注鞭毛蛋白后不同时相点肺急性炎症损伤的研究

目的 研究经尾静脉注入鞭毛蛋白后,不同时相点大鼠肺水肿以及肺部炎症的发生情况.方法 210只清洁级雄性Wistar大鼠,分三批,每批随机分为对照组和经尾静脉注入鞭毛蛋白致伤,2、4、6、12、24、48 h 时6个不同时相点检测组,共七组.正常对照组大鼠给予生理盐水,致伤组大鼠给予鞭毛蛋白50 μg/kg,静注后分别于2、4、6、12、24、48 h时,测定动脉血氧分压(PaO2);肺毛细血管通透性(Evans blue含量);肺组织湿干比值(W/D);肺泡灌洗液(BALF)细胞计数以及用ELISA法检测外周血、肺组织与BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10细胞因子的含量.结果 静注鞭毛蛋白后,随时间的增加,大鼠PaO2下降;毛细血管通透性增加;肺W/D增加;BALF的细胞计数增加;外周血、肺组织及BALF中,TNF-α、IL-1β含量增加,IL-10含量减少.在致伤组与对照组之间,以上各指标差异有统计学意义(P＜0.05).结论 静注鞭毛蛋白后,致大鼠肺急性炎症损伤具有时间差异性.     

海水对肺腺癌细胞株A549细胞蛋白酶激活受体2表达的作用研究

目的 观察海水对肺腺癌细胞株A549细胞的炎性损伤及对蛋白酶激活受体2(PAR-2)表达的影响,探讨海水导致急性肺损伤的作用机制.方法 将培养的A549细胞接种于6孔板中,按随机数字表法把细胞分为对照组及海水处理2、4、8 h组,相应时间点用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测PAR-2的mRNA和蛋白表达;收集细胞培养上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)含量.结果 用海水处理后,A549细胞PAR-2 mRNA和蛋白表达均于2 h显著增加(P均<0.05),4 h达高峰,分别为对照组的1.8倍和2.2倍,随后下降,但仍显著高于对照组(P均<0.01);TNF-α和IL-8含量则于2 h即显著升高并达最高峰[分别为(214.35±20.85)ng/L,(55.86±5.65)ng/L],随后下降,但仍显著高于对照组[分别为(25.86±3.85)ng/L,(6.97±1.77)ng/L,P均<0.01].结论 海水可致A549细胞炎症反应明显,并可诱导A549细胞PAR-2表达增高.     

低氧肺动脉高压时血红素氧合酶基因表达状况的研究

目的 探讨血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)基因在低氧肺动脉高压大鼠肺动脉组织中的表达及一氧化碳(carbon monoxide,CO)对其的影响.方法 60只Wistar大鼠随机分为5组:常氧组;低氧肺动脉高压组;血晶素组;锡原卟啉组;低浓度CO组(n=12).采用紫外分光光度计、逆转录-聚合酶链反应、免疫组织化学染色和原位杂交进行检测.结果 ①HO-1活性:低氧组、血晶素组、低浓度CO组肺动脉组织HO-1活性以胆红素生成量计算,均升高,其中血晶素组最高,与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01).②逆转录-聚合酶链反应:各组大鼠肺动脉HO-2 mRNA表达没有明显变化,均保持稳定.缺氧组、血晶素组、锡原卟啉组和低浓CO组HO-1 mRNA均明显高于正常对照组,以低浓度CO组升高最明显(P<0.01).血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组(P<0.01),而锡原卟啉组低于缺氧组.③免疫组织化学染色:低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高,血晶素组和低浓度CO组更高,锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达.④原位杂交:低氧组肺动脉3层均加深2～3级,低浓度CO组肺动脉外、中、内膜细胞质均明显加深4级.处理前后HO-2的染色变化不大.结论 低氧肺动脉高压时,肺动脉组织HO-1基因的表达升高,可能在肺动脉高压的发生和发展中起一定作用. mRNA均明显高于正常对照组,以低浓度CO组升高最明显(P<0.01).血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组(P<0.01),而锡原卟啉组低于缺氧组.③免疫组织化学染色:低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高,血晶素组和低浓度CO组更高,锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达.④原位杂交:低氧组肺动脉3层均加深2～3级,低浓度CO组肺动脉外、中、内膜细胞质 明显加深4级.处理前后HO-2的染色变化不大.结论 低氧肺动脉高压时,肺动脉组织HO-1基因的表达升高,可能在肺动脉高压的发生和发展中起一定作用. mRNA均明显高于正常对照组,以低浓度CO组升高最明显(P<0.01).血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组(P<0.01),而锡原卟啉组低于缺氧组.③免疫组织化学染色:低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高,血晶素组和低浓度CO组更高,锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达.④原位杂交:低氧组肺动脉3层均加     

戒烟门诊男性吸烟者成功戒烟的影响因素分析

目的 分析影响戒烟门诊男性吸烟者成功戒烟的相关因素。方法 由经培训的医生对自愿在戒烟门诊就医的吸烟者进行面对面咨询和心理干预, 之后进行1 周、1 个月、3 个月和6个月4 次标准化的电话随访干预。6 个月随访时主要分析指标为“7 天时点戒烟率”和“3 个月持续戒烟率”及其相关影响因素。结果 2008 年10 月至2012 年12 月共有355 人入组, 其中255 人完成6 个月随访。符合方案样本（n＝255）的“7 天时点戒烟率”和“3 个月持续戒烟率”分别为34.9%和25.5%, 而意向性分析样本（n＝355）则分别为25.1%和18.3%。logistic 多元分析结果显示, 戒烟成功与首诊呼气一氧化碳测试水平低、戒烟信心自评分高、买烟费用低、伴有医生诊断的烟草相关慢性病呈正相关。戒烟失败的主要原因是无法克服烟瘾、需要用吸烟缓解工作压力、受到身边其他吸烟者的影响, 以及缺乏戒烟的心理准备和毅力等。结论 吸烟量较少、戒烟自信心强、患有烟草相关慢性病的男性吸烟者较易成功戒烟, 应为吸烟者提供定期的随访干预服务, 增强其戒烟动机和创造良好的戒烟环境。     

甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白的分离、纯化和鉴定

目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定。方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化。纯化的蛋白用SDS-PAGE、Westernblot和磷钨酸负染扫描电子显微镜(scanningelectronmicrocopy,SEM)观察并摄片鉴定。考马斯亮蓝法测定所获得鞭毛蛋白的产量。结果SDS-PAGE提示纯化的鞭毛蛋白为一条相对分子质量(Mr)为52×103蛋白带;免疫印迹试验亦提示条带在Mr52×103处;SEM观察发现该鞭毛蛋白呈丝状;三者均证实该蛋白为同一均质蛋白。蛋白定量测得每克湿重的细菌可提取(4.8±0.5)mg鞭毛蛋白。结论经酸裂解法可获得高产量的鞭毛蛋白,且易于纯化和鉴定。