组织蛋白酶B-RNAi-LV载体构建及其对小鼠脑微血管内皮细胞系bEND.3的影响

目的 构建组织蛋白酶B(Cathepsin B,CTSB)小RNA（siRNA）慢病毒载体,并探讨其对小鼠脑微血管内皮细胞（bEND.3）的影响。方法 设计并合成含有干扰Cathesin B基因的19 nt的双链寡DNA片段,将此片段克隆到携有绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒表达载体质粒pGCSIL-GFP上,经测序正确后,命名为pGCSIL-GFP-CTSB,将慢病毒表达载体pGCSIL-GFP-CTSB、慢病毒包装载体pHelper1.0和pHelper2.0 3质粒共同转染于293T细胞,获得携带Cathepsin B基因的 RNAi慢病毒（Cathesin B-RNAi-Lentivirus,即CTSB-RNAi-LV）,通过Real time-PCR和Western blotting方法观察CTSB-RNAi-LV对bEND.3的影响。结果1.pGCSIL-GFP-CTSB中携带有正确的Cathesin B siRNA基因;2.目的基因Cathepsin B siRNA被RNAi慢病毒高效地转导入靶细胞bEND.3内,并达到稳定的表达;3.CTSB-RNAi-LV能有效降低bEND.3中Cathepsin B mRNA和蛋白表达。结论成功构建了RNAi慢病毒载体pGCSIL-GFP-CTSB;并成功包装了RNAi慢病毒CTSB-RNAi-LV;CTSB-RNAi-LV能有效地抑制bEND.3中Cathepsin B mRNA和蛋白表达水平下调。     

23G玻璃体切除术治疗增殖性糖尿病视网膜病变中的临床观察

<正>近年来,眼科医生对微创玻璃体切除术的进展非常关注[1]。2005年Eckardt[2]首先报道23G经结膜无缝合玻璃体切割系统应用于临床,它与25G相比玻璃体切除效率更高,可以像20G一样处理周边部玻璃体和视网膜,同时具有25G免缝合、愈合快等优点。以往的研究表明,传统的20G玻璃体手术对治疗糖尿病视网壁病变(PDR)疗效显著。为评估     

膀胱尿路上皮癌中FHIT的表达及其与预后的关系

目的 探讨膀胱尿路上皮癌中脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白的表达状况与临床预后的关系.方法 利用免疫组织化学SP法检测62例膀胱尿路上皮癌和35例正常膀胱组织中FHIT蛋白的表达,并对62例膀胱癌进行随访,对其随访资料进行Kaplan-Meier生存分析.结果 膀胱尿路上皮癌FHIT蛋白表达的阳性率为41.94%(26/62);正常膀胱组织为97.14%(34/35);FHIT蛋白表达的阳性率在癌组织分级中Ⅰ级癌中为54.05%(20/37),Ⅱ-Ⅲ级癌24.00%(6/25);FHIT蛋白表达的阳性率在病理分期Tis-T1和T2-T4分别是46.15%(18/39)和34.78%(8/23);各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).在膀胱尿路上皮癌的5年随访中,FHIT蛋白表达阳性与阴性的存活率分别为47.16%和52.83%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 FHIT蛋白表达与膀胱尿路上皮癌组织学分级、病理分期及5年存活率密切相关,提示FHIT在膀胱尿路上皮癌的演化和进展过程中起着重要作用.     

CA-074 Me对体外类毛细血管形成的影响

目的 观察CA-074 Me对体外类毛细血管形成的影响.方法 将脐静脉内皮细胞分为0.5、1、5、10μmol/L组,各组再分为实验组与对照组.实验组给予相应剂量的CA-074 Me,对照组给予等量的DMSO.免疫细胞化学观察组织蛋白酶B（Cathepsin B）在脐静脉内皮细胞的分布;MTT法检测各组存活率;测定各组Cathepsin B活性;体外类毛细血管形成实验测定各组类毛细血管结构的形成.结果 Cathepsin B主要分布在脐静脉内皮细胞的核周;不同剂量的CA-074 Me对脐静脉内皮细胞干预后各组存活率无明显变化;不同剂量的CA-074 Me对脐静脉内皮细胞干预后,各组细胞内和培养基内Cathepsin B活性有不同程度的下降,体外类毛细血管长度、面积、分支均受到抑制.结论 CA-074 Me对脐静脉内皮细胞体外类毛细血管的形成有抑制作用.     

十堰地区农村居民两周患病率与影响因素分析

目的:了解十堰地区农村居民两周患病率与影响因素。方法:于2001年7月对湖北十堰地区农村居民651人进行分层整群随机抽样家庭调查。结果:两周患病率为14.90%,以消化系统、呼吸系统和血液系统疾病为主,占总构成的53.61%。经Logistic逐步回归分析,两周患病率影响因素有慢性病、年龄、住房面积、人均月收入、饮水类型。慢性病患病率达15.99%,影响慢性病患病率的主要因素有年龄、受教育程度和居住位置。结论:调查地区两周患病率、慢性病患病率偏高,其影响因素有特殊性,该地卫生服务需求量较大。     

水消毒副产物卤代苯醌的 化学特征、环境暴露和毒性评估现状

卤代苯醌（HBQs）是近年来发现的一类新型的未受监管的消毒副产物,广泛存在于经过处理的饮用水和游泳池水中。定量结构毒性关系分析预测HBQs是潜在的膀胱致癌物,因此近年来其逐渐引起人们的重视。本文将对卤代苯醌的化学特征、环境暴露和毒性评估作一综述,为进一步研究其毒理学机制、人群暴露水平,以及充分了解由HBQ暴露引起的潜在不良健康影响和癌症风险提供参考。     

组织蛋白酶B和血管内皮生长因子在高氧诱导的视网膜新生血管中的作用

背景 血管内皮生长因子(VEGF)在血管发育和新生血管形成中起着关键作用.研究表明,组织蛋白酶B(Cathepsin B)参与新生血管的生成,但其具体机制尚不明确. 目的 探讨Cathepsin B和VEGF在高氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达及二者之间的关系. 方法 应用随机数字表法将44只7日龄清洁级C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、高氧诱导组、空白对照(NC)-绿色荧光蛋白(GFP)-慢病毒(Lv)组和Cathepsin B-RNA干扰(RNAi)-Lv组,每组11只小鼠22只眼.正常对照组小鼠在自然环境中生长;其余3个组7日龄小鼠置于氧体积分数为(75±2)％的密闭氧箱内饲养5d,之后返回到正常环境中.高氧诱导组的12日龄小鼠不给予任何药物干预;NC-GFP-Lv组和Cathepsin B-RNAi-Lv组的12日龄小鼠分别给予玻璃体腔注射NC-GFP-Lv和Cathepsin B-RNAi-Lv各1μl.取各组17日龄小鼠,颈椎脱臼法处死后剥取视网膜,分别采用real-time PCR和Western blot法检测小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF mRNA及蛋白的相对表达量.结果 荧光显微镜下Cathepsin B-RNAi-Lv组视网膜新生血管分层和分支均较高氧诱导组和NC-GFP-Lv组少.各组Cathepsin B和VEGF mRNA总体比较,差异均有统计学意义(F=444.89,P=0.00;F=519.78,P=0.00),其中高氧诱导组、NC-GFP-Lv组和Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGFmRNA的相对表达量均明显高于正常对照组,Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF mRNA的相对表达量均明显低于高氧诱导组和NC-GFP-Lv组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).各组Cathepsin B和VEGF蛋白总体比较,差异均有统计学意义(F=54.37,P=0.00;F=79.65,P=0.00),其中高氧诱导组、NC-GFP-Lv组和Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF蛋白的相对表达水平均明显高于正常对照组,Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF蛋白的相对表达水平均明显低于高氧诱导组和NC-GFP-Lv组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 高氧诱导的视网膜新生血管中Cathepsin B和VEGF高表达,Cathepsin B-RNAi-Lv可以抑制Cathepsin B和VEGF mRNA和蛋白的表达水平,VEGF表达的改变可能是受Cathepsin B表达的影响.     

深圳市2016年生活饮用水水质影响因素

目的 分析深圳市生活饮用水水质的影响因素。方法 全市2016年枯水期和丰水期共采集出厂水样101份、末梢水样218份和二次供水样20份,合计339份饮用水样进行水质检测分析。水样的采集和检验按照《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750-2006)进行。水样的评价按照《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006)进行。使用SPSS 18.0进行水质影响因素的Logistic回归分析,构成比及率的比较用χ²检验。结果 深圳市2016年饮用水样品合格率为94.39%,项次合格率为99.86%。饮用水水质影响单因素和多因素分析结果表明,水源类型、水期类型、水厂供水能力、饮用水消毒方式、水厂是否进行深度和特殊处理以及水样检测指标数量是影响饮用水水质结果的重要因素(P<0.05)。其中制水环节消毒方式的OR值为3.246,对水质的影响程度最大。结论 饮用水从源水到末端龙头水,存在多环节多次污染的风险,影响水质合格率的因素众多,应加强饮用水的系统和全面管理,确保饮用水水质。     

酪氨酸激酶及其抑制剂在视网膜新生血管形成机制及治疗中的研究进展

视网膜新生血管的发生与发展涉及多种生长因子及其受体复杂的生物学过程,许多生长因子的受体均为蛋白酪氨酸激酶受体.蛋白酪氨酸激酶在新生血管的发生与发展中起非常重要的作用,生长因子生物学活性的表达需要与其靶细胞受体结合并激活受体酪氨酸激酶,引起其结构改变从而产生酶催化效应,引起生物学效应,促进新生血管形成.通过寻找选择性的酪氨酸酶抑制剂,来阻断或调控由于这些信号通路异常激活产生的疾病,是抗新生血管药物的研究策略.     

视网膜新生血管形成中Cathepsin B的变化

目的通过观察Cathepsin B的变化,探讨视网膜新生血管的发病机制。方法取C57BL/6J7d龄小鼠30只,随机分为对照组和实验组,实验组在缺氧环境中建立视网膜新生血管动物模型。采用苏木精-伊红染色、视网膜ADP酶染色铺片及免疫组织化学法进行检测,同时测定眼组织Cathepsin B活性。结果组织病理学见突破内膜新生血管内皮细胞核数,无血管区面积及无血管区面积/视网膜面积,实验组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);对照组与实验组Cathepsin B平均光密度、Cathepsin B活性比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论C57BL/6J构建小鼠视网膜新生血管动物模型后,小鼠视网膜组织Cathepsin B表达增加、活性增强,CathepsinB可能是视网膜新生血管产生的一个重要因素。