登革Ⅱ型病毒SYBR GreenⅠqRT-PCR方法的建立

目的建立敏感、特异、快速的检测登革Ⅱ型病毒(DENV-2)SYBR GreenⅠqRT-PCR方法。方法根据GenBank上发表的DENV-2株核苷酸序列,应用Primer Express 3.0软件在保守区设计特异性引物,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,利用Sanger测序验证该方法的特异性和敏感性。结果该方法与其他血清型登革病毒、流感病毒等均无交叉反应,最低检出20个病毒拷贝/μl RNA。检测14份已知阳性和阴性血清,结果与预期一致。结论本研究建立的DENV-2 SYBR GreenⅠqRT-PCR特异性强、敏感性高,可用于输入性DENV-2早期感染诊断。     

苓桂术甘汤通过TLR4/Myd88通路改善心衰大鼠心功能

目的探讨苓桂术甘汤对心力衰竭大鼠心功能的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、心力衰竭模型组(CHF)、苓桂术甘汤治疗组(LGZG),每组10只;CHF和LGZG组大鼠均采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷型慢性心力衰竭大鼠模型,LGZG组予苓桂竹甘汤制剂治疗,超声心动图观察各组大鼠心脏结构参数,HE染色、Masson染色观察各组大鼠心脏组织病理变化,ELISA方法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10;Western blot和qPCR方法检测各组大鼠心脏组织中TLR4/Myd88信号通路的蛋白表达。结果与Sham组相比,CHF组大鼠心功能显著降低,心室重构明显,病理学可见心肌细胞明显肿胀,排列紊乱,有大量炎性细胞浸润,血清TNF-α和IL-6水平升高,IL-10降低(P0.05)。给予苓桂术甘汤处理后,心功能与心室重构明显改善,心肌细胞损伤减少,血清TNF-α和IL-6水平明显降低,IL-10明显升高(P0.05),下调心脏组织TLR4、Myd88、NF-κB的表达水平(P0.05)。结论苓桂术甘汤抑制心力衰竭大鼠炎症反应,改善心功能,与调控TLR4/Myd88通路相关。     

艾司西酞普兰对APP/PS1小鼠海马神经元突触功能及对BDNF-TrkB-CREB信号通路的影响

目的探讨艾司西酞普兰对APP/PS-1小鼠海马神经元突触功能及与BDNF-TrkB-CREB信号通路的关系。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组及艾司西酞普兰组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为阴性对照组。给予10 mg/kg艾司西酞普兰灌胃治疗,连续8周,每天一次;对照组及模型组给予等体积生理盐水。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼式染色检测各组小鼠海马DG区尼氏体变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT);Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、BDNF、TrkB、p-TrkB、CREB及p-CREB蛋白表达。结果艾司西酞普兰组改善APP/PS-1小鼠认知功能,小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长,小鼠海马DG区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,下调AChE,上调ChAT表达,且能增加SYN、PSD95及GAP43蛋白表达;此外,艾司西酞普兰还能显著增加小鼠海马区BDNF、p-TrkB及p-CREB蛋白表达,与模型组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论艾司西酞普兰改善小鼠海马神经元突触功能,提高APP/PS-1小鼠的学习记忆能力,可能与调控BDNF-TrkBCREB信号通路相关蛋白表达有关。     

白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制

目的 观察白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及能机制.方法 36只SD大鼠随机分为对照组(control组)、糖尿病肾病模型组(DN组)和白藜芦醇治疗组(Res组),每组12只,采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.于造模成功后第8周,ELISA法检测各组大鼠尿液中24 h尿蛋白(24hT...     

贞芪扶正胶囊介导TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制慢性湿疹小鼠炎症反应

目的 探讨贞芪扶正胶囊对慢性湿疹小鼠炎症反应的抑制作用.方法 SPF级C57BL/6小鼠30只,按随机数字表法随机分为对照组(control组)、模型组(CAD组)与贞芪扶正胶囊组(ZQFZ组).观察各组小鼠双耳肿胀程度、双耳变应评分;HE染色观察病灶处皮肤病理学变化;ELISA法检测血清炎性因子TNF-α、IL-6及...     

瘿瘤合剂联合甲巯咪唑对格雷夫斯病患者甲状腺功能及相关细胞因子的影响

目的:观察瘿瘤合剂联合甲巯咪唑治疗格雷夫斯病的临床疗效及其对患者甲状腺功能、相关细胞因子水平的影响。方法:将174例格雷夫斯病患者随机分为治疗组和对照组,每组87例。对照组予甲巯咪唑治疗,治疗组予瘿瘤合剂联合甲巯咪唑治疗,疗程为12周。评价两组患者的中医证候积分及中医证候疗效,检测并比较两组患者的甲状腺功能指标及相关免疫细胞因子水平的变化。结果:1治疗后,治疗组和对照组的中医证候疗效总有效率分别为94.3%和88.5%,组间临床疗效比较,差异有统计学意义(P0.05)。2治疗后,两组患者的中医证候积分均显著降低(P0.05),且治疗组患者的积分低于对照组(P0.05)。3治疗后,两组患者的血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平显著降低(P0.05),促甲状腺素(TSH)水平显著升高(P0.05),且治疗组患者的FT3、FT4水平低于对照组(P0.05)。4治疗后,治疗组患者的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平显著降低(P0.05),白介素-10(IL-10)、CD4+CD25+T细胞亚群水平显著升高(P0.05);对照组患者的TNF-α水平显著降低(P0.05)。结论:瘿瘤合剂联合甲巯咪唑可有效改善格雷夫斯病患者的临床症状及甲状腺功能,其疗效优于单用甲巯咪唑,或有调节免疫细胞因子的作用。     

IL-38对胶原诱导性关节炎大鼠Th17/Treg失衡的调节作用

目的探讨IL-38对胶原诱导性关节炎Th17/Treg失衡的调节作用。方法 SPF级SD大鼠30只,随机分为3组,即正常对照组(CON)、胶原诱导性关节炎大鼠(collagen-induced arthritis rats,CIA)、CIA+IL-38(5ng/g)组;CIA组、IL-38组采用大鼠尾根部皮下注射牛II型胶原乳剂建立CIA大鼠模型;IL-38组于初次免疫后第24天起每天注射IL-38(20-152)5 ng/g,连续给药10d;观察大鼠后足及关节情况,HE染色观察大鼠滑膜组织病理变化,流式检测Th17/Treg细胞变化,ELISA、qRT-PCR检测Th17/Treg相关基因的表达情况。结果 IL-38明显改善胶原诱导性关节炎大鼠的症状、滑膜组织病理情况、调节Th17/Treg细胞的表达水平以及Th17/Treg相关基因的表达水平。结论 IL-38通过调节Th17/Treg失衡对胶原诱导性关节炎大鼠具有保护作用。     

电针对阿尔茨海默病小鼠海马神经元突触损伤及对CREB/BDNF信号通路的影响

目的探讨电针对APP/PS-1转基因小鼠海马神经元突触损伤及对CREB/BDNF信号通路的影响。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组、电针组及药物组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为对照组。电针组针刺百合、印堂穴,并接入电针仪,20 min/次/天,共治疗15天;药物组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗;对照组及模型组不予以治疗。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;筑巢实验检测小鼠智力改变;尼式染色检测各组小鼠海马尼氏体变化;Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、CREB、pCREB及BDNF蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示,与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期增加,穿越平台次数减少,在目标象限停留时间减少;电针及药物组小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长。模型组筑巢分数较对照组明显降低,电针及药物组小鼠筑巢分数明显增加。电针及药物组小鼠海马区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,SYN、PSD95及GAP43蛋白表达增加。电针及药物组小鼠海马区pCREB及BDNF蛋白表达较模型组增加。结论电针减轻小鼠海马神经元突触损伤,改善APP/PS-1转基因小鼠的学习记忆能力,可能与调控CREB/BDNF信号通路相关蛋白表达有关。     

瘿瘤合剂联合甲巯咪唑改善弥漫性毒性甲状腺肿的自身抗体的临床疗效观察

【目的】观察瘿瘤合剂联合甲巯咪唑干预对弥漫性毒性甲状腺肿(Graves’disease,GD)的自身抗体及中医证候的改善情况。【方法】将92例GD患者随机分为治疗组和对照组各46例,2组各失访6例,最终完成试验者各40例。治疗组给予瘿瘤合剂加甲巯咪唑治疗,对照组给予甲巯咪唑治疗,2组疗程均为12周。观察2组治疗前后的甲状腺功能、甲状腺自身抗体、中医证候评分的变化情况,并进行临床疗效评价。【结果】(1)甲状腺功能、甲状腺自身抗体比较:经过12周治疗,治疗组与对照组的血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、促甲状腺素受体抗体(TRAb)均明显下降,促甲状腺激素(TSH)均明显上升,与治疗前比较差异均有统计学意义(P0.01);且治疗组在改善TGAb、TRAb水平方面优于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)临床症状和体征比较:与治疗前比较,2组不同时间点中医证候总积分显著下降(P0.001),且治疗组的下降幅度明显大于对照组(P0.05)。(3)临床总疗效:治疗组总有效率为92.50%,对照组总有效率为82.50%,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。【结论】瘿瘤合剂联合甲巯咪唑治疗GD,可有效改善患者甲状腺功能,降低甲状腺自身抗体,改善患者的临床症状和体征,其疗效优于单用甲巯咪唑。     

肱骨外展动作中肩袖生物力学的有限元分析

目的构建肩关节有限元模型，用于分析肩袖生物力学。 方法采集1名26岁健康男性志愿者右肩CT、MRI数据，构建肩关节有限元模型，包含肩胛骨、肱骨、锁骨，以及肩袖肌群（冈上肌、冈下肌、小圆肌、肩胛下肌）。模拟肱骨在肩胛骨平面外展，分析肩袖肌肉应力变化。 结果肱骨在肩胛骨平面外展0°~30°过程中，各组肌腱与肱骨头连接处的应力均增大。冈上肌腱应力变化速率较快；肩胛骨前方的肩胛下肌对比肩胛骨后方的冈下肌-小圆肌，两组肌腱的应力变化较为同步。当肱骨在肩胛骨平面外展30°时，冈上肌腱、肩胛下肌腱及冈下肌腱-小圆肌腱与肱骨头连接面的平均应力分别为7.894 8、4.721 7、3.768 8 Mpa，冈上肌腱关节面与滑囊面结点平均应力分别为7.931 4、4.099 0 Mpa。冈上肌腱的关节面与滑囊面应力有明显差异，应力差值随肱骨在肩胛骨平面外展而增大，造成的剪切力可造成冈上肌腱撕裂。 结论肩袖对肩关节的活动与稳定性有重要作用，其受力特点易引起肩袖损伤。