化疗对肝癌患者T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ的影响

目的探讨化疗对肝癌患者T淋巴细胞内的白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响.方法应用单克隆抗体和流式细胞术(FCM)分析31例肝癌患者化疗前后T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ水平的变化.结果肝癌患者化疗后T淋巴细跑内IL-2和IFN-γ均较化疗前降低(P＜0.05);静脉化疗组与介入化疗组化疗前后T淋巴细胞内IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05);不同临床分期化疗前后IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05).结论化疗药物可通过降低T淋巴细胞内的IL-2、IFN-γ水平而影响细胞免疫功能,导致机体免疫功能降低.     

子痫前期患者血清瘦素及可溶性瘦素受体水平变化及临床意义

目的:探讨子痫前期血清瘦素及可溶性瘦素受体水平与子痫前期发病之间的关系及其临床意义. 方法:40例子痫前期孕妇及43例正常妊娠孕妇,取术前及术后7 d外周静脉血,应用放射免疫法检测瘦素水平,应用ELISA法检测可溶性瘦素受体水平,并与子痫前期的血压值进行相关分析. 结果:子痫前期组和正常妊娠组术后瘦素水平均低于术前;子痫前期组术前瘦素水平高于正常妊娠组,可溶性瘦素受体水平低于正常妊娠组;子痫前期组术前瘦素水平与可溶性瘦素受体水平呈负相关,与收缩压和舒张压呈正相关;子痫前期组术前可溶性瘦素受体水平与收缩压和舒张压均呈负相关. 结论:子痫前期升高的瘦素可能来源于胎盘,并可能参与子痫前期的病理生理过程. 血清中瘦素及可溶性瘦素受体水平可作为反映疾病程度的临床指标.     

DEHP对大鼠睾丸支持细胞间隙连接蛋白43表达和间隙连接通讯功能的影响

目的 通过对原代培养的大鼠睾丸支持细胞进行邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)染毒,探讨DEHP体外对大鼠睾丸支持细胞间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达及间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)功能的影响.方法 体外分离和原代培养大鼠睾丸支持细胞,应用不同浓度的DEHP(10、50、100nmol/L)作用于支持细胞24h,应用荧光定量PCR法检测Cx43基因mRNA表达,用Weastern blot方法检测Cx43蛋白表达,划痕标记荧光染料示踪方法检测GJIC功能.结果 与对照组相比,DEHP各组支持细胞Cx43基因mRNA和蛋白表达均下降(P＜0.05),呈浓度依赖关系,同时支持细胞GJIC功能降低.结论 DEHP在体外可通过抑制大鼠睾丸支持细胞Cx43基因表达而抑制GJIC功能,进而影响支持细胞功能.     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷调控RASSF1A基因表达对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR）对人子宫内膜癌（Hu－man endometrial cancer,HEC）-1-B细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制。方法：应用不同浓度的 5-Aza-CdR处理HEC-1-B细胞,甲基化特异 PCR（Methylation-specific polymerase chain reaction,MSP）法检测处理前后RAS相关域家族1A（RAS association domain family 1A,RASSF1A）基因甲基化状态,应用 RT-PCR方法检测 RASSF1A基因 mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：HEC-1-B细胞 RASSF1A基因启动子区呈高甲基化状态,经过 5-Aza-CdR处理后,RASSF1A基因启动子区呈去甲基化状态,其 mRNA重新表达,细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加。结论：5-Aza-CdR能够逆转RASSF1A基因甲基化状态,调控RASSF1A基因表达,并能有效地抑制HEC-1-B细胞的增殖和诱导细胞调亡。     

RNA干扰HDAC1提高人宫颈癌HeLa细胞化疗敏感性研究

目的探讨体外应用RNA干扰技术抑制组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)表达,提高人宫颈癌HeLa细胞对顺铂敏感性的作用及机制。方法体外合成针对HDAC1的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染HeLa细胞,将其分为正常对照组(无干预措施)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)及siRNA干扰组(转染HDAC1基因siRNA)。采用Western blot法检测各组细胞HDAC1蛋白和乙酰化组蛋白H4(Ac-H4)的表达,采用聚合酶链反应(PCR)法检测HDAC1基因和NF-κB基因mRNA表达。HeLa细胞经不同浓度顺铂作用后,采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测对顺铂的敏感性,以及采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与正常对照组及阴性对照组比较,siRNA干扰组HeLa细胞HDAC1基因mRNA和蛋白表达均降低(P0.05或P0.01),细胞内Ac-H4表达增加(P0.05),同时NF-κB基因mRNA表达降低(P0.05)。经不同浓度顺铂作用后,与正常对照组及阴性对照组比较,siRNA干扰组HeLa细胞对顺铂的50%抑制浓度降低(P0.05或P=0.01),细胞凋亡率增加(P0.01)。结论 HDAC1基因siRNA能够提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的敏感性,增加组蛋白乙酰化水平、抑制HDAC1基因及NF-κB基因表达可能是其作用机制。     

上调microRNA-205表达对HeLa细胞生物学特性的影响

【目的】探讨上调microRNA-205（miR-205）表达对HeLa细胞生物学特性的影响。【方法】实验分4组：miR-205上调组,阴性对照组,空白转染组和空白对照组。每种检测重复3次。利用脂质体siPORT NeoFX Transfection Agent,向miR-205上调组细胞转染Pre-miR-hsa-miR-205 miRNA Precursor,阴性对照组细胞转染Cy3 dye labeled PremiR Negative Control。荧光显微镜下评估转染情况,实时定量PCR方法检测miR-205表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和平板克隆形成实验分别检测细胞生长和增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,Transwell小室法检测细胞迁移能力。【结果】实时定量PCR结果显示,miR-205上调组miR-205的表达增加3061.5倍。与空白对照组相比,72hmiR-205上调组与阴性对照组活细胞数分别为（126±41）%,（126±39）%;两组克隆形成率分别为（79±11）%,（63±10）%;凋亡率分别为（4.6±2.1）%,（4.1±2.4）%;S期细胞比例分别为（19.2±3.6）%,（23.4±3.0）%;200倍镜视野下迁移细胞数分别为63±17和68±16。与对照组比,miR-205上调组细胞增殖能力增强但生长曲线不受影响,S期细胞比例降低,而凋亡率不变,细胞迁移能力无明显改变。【结论】上调miR-205表达后,HeLa细胞增殖能力及细胞周期改变,但生长曲线、凋亡率和迁移能力无变化。     

系统保留盆腔自主神经的宫颈癌广泛性子宫切除术对膀胱功能的影响

目的:探讨在宫颈癌患者行广泛性子宫切除术中系统保留盆腔自主神经对膀胱功能的影响.方法:子宫颈癌行广泛性子宫切除术,术中保留盆腔自主神经的宫颈癌患者共38例,取传统广泛性子宫切除术的宫颈癌患者42例作为对照,观察两组患者术后尿动力学变化及膀胱功能恢复时间.结果:保留盆腔自主神经组和传统手术治疗组患者术后10天膀胱无知觉率分别为 10.52%和21.43%,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后10天平均膀胱容量分别为(214.62±45.36)ml和(389.64±49.47)ml,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后膀胱功能恢复正常时间分别为(11.64±2.01)天和(18.64±3.26)天,差异有统计学意义(P<0.05).结论:广泛性子宫切除术发生膀胱功能障碍,主要是盆腔自主神经的损伤;术中系统保留盆腔自主神经可缩短术后尿潴留时间,有利于术后膀胱功能的恢复.     

选择性环氧化酶-2抑制剂在宫颈癌治疗中的应用研究进展

宫颈癌是妇科常见肿瘤，占女性癌症的第二位，放疗或化疗是其主要治疗方式。随着宫颈腺癌以及巨大癌灶的病例增多，放疗和化疗的效果不佳，通过增敏剂来增强放疗和化疗的疗效成为宫颈癌治疗的新途径。环氧化酶-2（cvclooxygenase 2，COX-2）在宫颈癌等多种恶性肿瘤中高表达，与肿瘤的发生、发展和预后密切相关。研究表明，选择性COX-2抑制剂对肿瘤的放疗及化疗有增敏作用。本文就选择性COX-2抑制剂在宫颈癌治疗中应用研究作一综述。     

缺氧诱导滋养细胞转化生长因子3β表达与调控

目的：探讨低氧对滋养细胞转化生长因子3B(TGF-3β)的表达的诱导作用，以及缺氧诱导因子1(HIF-1)对TGF-3β表达的调控作用．方法：滋养细胞来源的BeWo细胞系分4组培养：正常对照组、缺氧组、HIF—1α反义组和HIF-1α正义组．HIF-1α反义组和HIF-α正义组先加入HIF-1α寡核苷酸，常氧条件培养6h，再低氧条件培养48h．48h后，收集细胞，实时定量PCR方法检测TGF-3β和HIF-1α mRNA表达水平，Western blot方法检测TGF-3β和HIF-1α蛋白表达水平．结果：与正常对照组相比，缺氧组的HIF-1α mRNA和蛋白表达增加，TGF-3β mRNA和蛋白表达也升高；与HIF—1α 正义组比较，HIF-1α反义组HIF-1α mRNA和蛋白表达降低，TGF-3β mRNA和蛋白表达也下降．结论：缺氧可以诱导滋养细胞TGF-3β表达，并且缺氧对TGF-3β表达的诱导作用可能通过HIF-1调控．