大鼠溃疡性结肠炎实验模型中核因子-κB p65、COX-2的表达研究

目的探讨NF-κBp65、COX-2在溃疡性结肠炎发病和发展过程中的作用.方法采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)与乙酸复合灌肠法制备大鼠溃疡性结肠炎实验模型,实验动物分为正常组与溃疡性结肠炎模型组两组.采用半定量RT-PCR的方法,在mRNA水平上检测各组结肠组织NF-κBp65、COX-2的表达.结果与正常组相比,溃疡性结肠炎模型组结肠组织中NF-κBp65、COX-2表达显著增高(P＜0.05).在模型组中,NF-κBp65活性与COX-2的表达水平呈正相关关系(P＜0.05).结论在溃疡性结肠炎中,NF-κBp65的激活可能调控COX-2的表达升高,从而导致了溃疡性结肠炎发生、发展.     

溃疡性结肠炎大鼠iNOS真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:构建溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠组织中i NOS基因的真核表达载体,并表达于COS-7细胞,以便进一步研究i NOS在UC发病机制中的作用。方法:从溃疡性结肠炎大鼠结肠组织提取总RNA,经逆转录获得cDNA,以PCR方法克隆i NOS的基因片段,并对其序列进行测定。将测序正确的i NOS编码序列插入pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO中,构建真核表达载体;采用脂质体法转染COS-7细胞,用倒置荧光显微镜和Western blot的方法观察绿色荧光蛋白(Greenfluorescence protein,GFP)的表达。结果:PCR方法扩增出3598bp的基因片段,插入pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO构建真核表达载体后,经以质粒为模板的PCR扩增和测序鉴定表明,克隆出UC大鼠结肠组织i NOS的编码序列同GeneBank收录的序列一致。将重组体转染COS-7细胞后,倒置荧光显微镜观察到绿色荧光,Western blot检测表明细胞中可表达融合蛋白。结论:本研究成功构建了pcD-NA3.1/CT-GFP-TOPO-i NOS重组质粒,并能高效转染COS-7细胞,为下一步i NOS基因功能研究及其在UC发病机制中的研究奠定了基础。     

Gαq/11在油酸型ALI大鼠脾脏的动态表达

目的：研究Gαq／11在急性肺损伤（acutelunginjury，ALI）大鼠脾脏的动态表达及意义。方法：40只Wister大鼠随机分为对照组（C组）和油酸组（OA组），后者用尾静脉注射油酸法复制ALl模型，并按不同时点分为30、60、90、120min4个亚组，免疫印迹法检测脾脏Gαq／11含量；检测血浆和脾脏组织的超氧化物歧化酶（SOD）活性与丙二醛（MDA）含量。结果：与c组相比，OA组除OA30min外，Gαq／11含量随时间延长升高（P〈0．05或0．01），血浆和脾脏的SOD活性降低（P〈0．01），MDA含量增高（P〈0．05或0．01）；OA组PaO2、MAP逐渐降低（P〈0．05或0．01）。结论：Gαq／11上调可能在ALI时脾脏受损中发挥一定作用，且其介导的信号转导系统的改变可能参与了ALI的发生发展。     

异常胆液质证大鼠尿液代谢组分的变化及其意义

目的：基于代谢组学方法研究异常胆液质证大鼠尿液中的差异性代谢组分,并通过差异性代谢组分结果 探讨异常胆液质证的分子基础。方法：选用Wistar大鼠,通过干热环境、干热性饲料、慢性电刺激等多复合因素建立 维吾尔医学异常胆液质载体动物模型,通过代谢组学方法检测尿液中的差异性代谢物。结果：异常胆液质证大鼠尿 液具有显著性高峰度代谢物为异亮氨酸、亮氨酸、糖蛋白,具有显著性低峰度代谢物为谷氨酰胺、肌酸、柠檬酸、 苯丙氨酸。结论：多因素复合刺激可促进异常胆液质的产生,异常胆液质证大鼠存在三大营养物质及能量代谢障 碍,可能是异常胆液质证的分子基础。     

"妇产科学"网络直播课堂教学模式的教学效果评价

目的:对"妇产科学"网络直播课堂的教学模式进行评价,为"妇产科学"多元化教学提供理论基础.方法:选取2019年参加"妇产科学"课程学习的针灸推拿专业学生148名为网络直播教学组,采用网络直播模式教学.选取2018年参加"妇产科学"课程学习的针灸推拿专业学生166名为LBL教学组,采用LBL教学模式教学.采用问卷星调查软件对2组学生"妇产科学"课程教学情况进行调查.结果:2组在教学效果、学习形式、课堂氛围、课程难度、课程讨论形式的满意度及到课次数、考核成绩方面比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),但在课程时长安排与后续课程安排方面,网络直播教学组的满意度明显高于LBL教学组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:网络直播与现场教学效果相当.日常教学或者特殊时期,网络直播可作为"妇产科学"课程的教学方式,值得推广.     

静脉输液后不同拔针时机对液体残留量的影响分析

目的 分析静脉输液后不同拔针时机对残留液量的影响.方法 把200例静脉输液患者分成常规组和干预组.在输液至液面距瓶颈2～3cm时,常规组按传统方法拔针.干预组暂时不予拔针,予以调整输液架的高度,在病情允许范围内调大滴速,待液体静止不动时拔针,然后测量两组患者的残余液量.结果 干预组与常规组的差异有显著性(P＜0.05).结论 干预拔针能够减少药液的浪费和损失,保证患者用药量的准确性,对于患者的治疗康复具有重要意义.     

警惕大量输血后引起的低钾血症

目的 探讨短时间内大量输血对血清钾的影响.方法 从2004年1月～2005年12月,收集我院因各种原因需要大量输血的病例25例,分析其在输血前、输血中、输血后血清钾的变化.结果 25例患者在输血前、中、后血清钾分别为(4.2 5±0.7)mmol/L、(3.8 3±0.72)mmol/L、(3.86±0.99)mmol/L,24例未超出正常范围,且数值偏低,其中7例小于3.5 mmol/L.仅2例血清钾大于5.5 mmol/L.结论 短期内大量输血可引起低钾血症.     

穴位推拿在术后留置镇痛管预防尿潴留的效果观察

目的探讨硬膜外麻醉术后留置镇痛管及尿管的患者,配合相应的穴位推拿,对膀胱功能恢复时间及尿潴留发生率的影响。方法从2005年3月-2006年3月,将我区硬膜外麻醉术后留置镇痛管及尿管患者100例随机分成二组。治疗组50例,除执行常规尿管护理外,另加手法穴位推拿;对照组50例,只执行常规护理。结果治疗组膀胱功能恢复时间平均为39.3±7.57小时,尿潴留发生率6%;对照组膀胱功能恢复时间平均49.8±6.98小时,尿潴留发生率22%。结论行相应的穴位推拿对硬膜外麻醉术后留置镇痛管及尿管的患者,能加快膀胱功能的恢复,减少尿潴留的发生。     

miR-486促人脐静脉内皮细胞内皮间质转化的机制研究

目的 探讨微小RNA-486(miR-486)对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）内皮间质转化（End MT）的影响及其调控机制。方法 常规培养HUVECs,并转染miR-486模拟物（mimic）及阴性对照（NC）质粒,实时荧光定量PCR测定miR-486表达;Western blot检测血管内皮细胞钙黏蛋白（VE Cadherin）、Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅢ）、血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)、纤连蛋白（FN）表达;免疫荧光染色检测细胞中CD31与α-SMA表达;Western blot检测磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路相关蛋白表达。使用PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002与miR-486 mimic共作用于HUVECs,Western blot检测VE Cadherin、CollagenⅢ、CD31、α-SMA、FSP1、FN、PTEN及PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达。通过生物信息学在线软件预测miR-486与PTEN的靶向...     

miR-542-5p对1-磷酸鞘氨醇诱导的IEC-6细胞增殖的抑制作用

目的:观察miR-542-5p对1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导的大鼠小肠隐窝上皮IEC-6细胞增殖的影响。方法:建立稳定表达鞘氨醇激酶1(SphK1)的IEC-6细胞系(SphK1-IEC-C1和SphK1-IEC-C2),Western blot检测SphK1蛋白表达,放射性同位素示踪法测定SphK1酶活性和S1P分泌,细胞计数绘制生长曲线观察细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期变化,实时荧光定量PCR检测miR-542-5p表达。结果:与对照细胞相比,细胞系SphK1-IECC1和SphK1-IEC-C2中SphK1蛋白表达显著升高,SphK1酶活性升高,细胞内外S1P浓度升高,细胞生长速度加快,细胞周期中S期细胞所占比例升高,miR-542-5p的表达量降低;在IEC-6细胞的培养液中加入S1P(0.5~10μmol/L),能显著抑制miR-542-5p表达;采用siRNA干扰降低IEC-6细胞的SphK1,可明显升高miR-542-5p表达。升高SphK1-IEC-C1和SphK1-IEC-C2细胞中miR-542-5p水平,则可降低S期细胞比例,抑制细胞增殖。结论:S1P通过降低IEC-6细胞中miR-542-5p水平,引起细胞周期由G1期向S期转换,促进IEC-6细胞增殖。