乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群检测

目的　探讨乙型病毒性肝炎 (简称乙肝 )患者机体细胞免疫功能紊乱与HBV感染复制的关系。　方法　 4 8例乙肝患者 ,应用流式细胞分析技术检测外周血T淋巴细胞亚群 ,实时荧光定量聚合酶链反应检测HBVDNA载量。　结果　乙肝患者外周血淋巴细胞与正常对照组相比较CD3 + 、CD3 + CD4+ 百分比显著下降 (P <0 .0 5 ) ,而CD3 + CD8+ 百分比变化不明显 ,CD3 + CD4+ /CD3 + CD8+ 比值下降 (P <0 .0 1) ,乙肝HBVDNA阳性与HBVDNA阴性患者比较 ,CD3 + 、CD3 + CD4+ 、CD3 + CD8+ 、CD3 + CD4+ /CD3 + CD8+ 比值差异均无显著性意义 (P >0 .0 5 )。　结论　乙肝患者存在细胞免疫功能紊乱 ,提示细胞免疫参与乙肝发病和进展。     

乙肝患者血清中HBeAg特异性循环免疫复合物的检测及意义

为了解循环免疫复合物在乙肝发病及转归中的意义，采用ＥＬＩＳＡ法测定ＨＢｅＡｇ特异性免疫复合物，并与非特异性循环免疫复合物结果相比较。检测乙肝病毒感染不同时期１２０名病全和４０名健康成人。结果：１．ＨＢｃ－ＩＣ与ＨＢＶ复制有关，其血清学标志的转换可作为预后的指标之一；２．ＣＩＣ与复制水平有关，ＨＢｅ－ＩＣ仅为ＣＩＣ的组成部分之一。     

论实习带教老师的教书育人

本指出在临床教学中带教老师的教书育人工作的重要性。各级领导必须严格管理，重视都书育人工作，并将教书育人列入计划中，使其做到正常化、制度化和规范化。     

花粉重组变应原的研究现状

分子克隆技术应用以来，出现了许多具有免疫活性的花粉重组变应原，这不仅改进了花粉过敏性疾病的诊断和特异性免疫治疗方法，也使花粉变应原的分子和生化特征的鉴定取得了很大进展。本文综述了变应原已被克隆和测序的树木(tree)花粉、牧草(grass)花粉和杂草(weed)花粉的研究现状。     

慢性乙型肝炎患者血清IL-10与HBVDNA复制水平检测及临床意义

检测慢性乙型肝炎 (CHB)患者血清IL - 10与HBVDNA、ALT水平 ,探讨乙型肝炎慢性化的机理。检测 77例CHB临床血清标本 ,用实时荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)测HBVDNA含量 ;用双抗体夹心ELISA法定量检测血清IL - 10水平。CHB患者血清IL - 10浓度明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,HBVDNA阳性组高于HBVDNA阴性组 ;CHB组患者血清ALT异常者的IL - 10浓度明显高于ALT正常组 ;IL - 10水平与HBVDNA复制程度呈正相关。CHB患者血清IL - 10水平升高与HBV持续感染、HBVDNA高复制合并肝损害有关。     

乙肝患者血清HBV cccDNA的临床意义

目的:探讨血清HBV cccDNA与肝组织HBV cccDNA、血清HBV DNA的关系及临床意义.方法:采用荧光定量PCR (FQ-PCR),对69例乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌血清及15例肝组织的HBVcccDNA、HBV DNA进行检测,化学发光免疫分析定量检测血清HBsAg.结果:(1)肝组织HBV cccDNA阳性检出率为86.7％,高于血清HBV cccDNA阳性检出率(66.7％,P＜0.05);(2)血清中HBV cccDNA与肝组织HBV cccDNA水平呈正相关(r=0.72,P＜ 0.05);(3)血清HBV cccDNA拷贝数随HBV DNA水平升高而增大,且两者水平呈正相关(r=0.82,P＜0.05);且HBV DNA高水平组(HBV DNA≥105 copies/mL)的血清HBV cccDNA的阳性检出率(96.6％)高于低水平组(103 copies/mL≤HBV DNA＜l×105 copies/mL)(67.5％) (P＜ 0.05);(4)血清HBVcccDNA检出率随着病程进展而升高,在乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌中检出率分别为33.3％、83.3％、87.0％、87.5％,具有显著差异(P＜0.05).结论:血清HBV cccDNA可间接反映患者肝组织内HBV cccDNA情况,且与血清HBV复制指标HBV DNA显著相关;并与乙肝不同病程有关.     

妊娠相关血浆蛋白-A早期诊断急性冠脉综合征的循证评价

[摘要] 目的 评价妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)早期诊断急性冠脉综合征(ACS)的价值。方法 检测ACS患者、ACS疑似患者、健康对照者的PAPP-A、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肌钙蛋白I(CTnI)水平，绘制此三种标志物用于诊断ACS的受试者特征曲线(ROC)曲线，再根据ROC曲线确定三者诊断ACS的cut off值，并对标志物诊断准确度进行比较。结果 ACS患者血清PAPP-A水平明显高于对照组(P<0.01)，据此绘制出的ROC曲线其AUC为0.986(95%CI：0.969~1.003)，与0.5相比差异有显著性(P<0.001)。三种标志物诊断ACS的ROC曲线下面积分别为：AUCPAPP-A 0.978(95%CI：0.956～1.000)， AUChs-CRP0.841(95%CI：0.761～0.920, AUCcTnI0.873(95%CI：0.797～0.948)；依此确定的三种标志物用于诊断ACS的cut off值为：cut offPAPP-A17.225μg/ml, cut offhsCRP6.215mg/L，cut offcTnI1.030ng/ml。其诊断敏感度依次为：0.889, 0.733, 0.689；特异度为0.956, 0.778, 1.000；正确率为0.922, 0.778, 0.833。PAPP-A相较于其他两个指标有较高的敏感度和正确率，特异度在数值上不及cTnI但无统计学意义。结论 血清PAPP-A具有较大的综合诊断价值，可用于ACS的早期诊断。     

尿素酶电极法测定尿素的应用评价

目的对尿素酶电极法测定尿素进行方法学评价.方法应用本法进行测定结果,分析其精密度、准确度、线性范围及干扰因素,并与常用方法酶偶联速率法进行比较.结果尿素酶电极法具有较高的精密度(批内和批间平均变异系数分别为2.0%和3.1%),线性范围为2.18～~18.92mmol/L.回收率为95.5%～98.0%.本法(Y)与酶偶联速率法(X)比较:Y=0.953X-0.322,r=0.999.当血清胆红素浓度为178.2μmol/L,血红蛋白浓度为4g/L,甘油三酯浓度为12.46mmol/L时对本法无明显干扰.结论尿素酶电极法快速、简便、结果准确、具有良好的精密度和线性范围,适于急诊实验室的自动化分析仪应用.     

大鼠GAD65基因的克隆与原核表达

目的构建pGEX-6P-3/GAD65原核表达载体,获得大量纯化的大鼠GAD65蛋白。方法通过RT-PCR技术从大鼠脑组织中扩增GAD65cDNA,克隆至PGEM-Teasy载体上并测序,利用引物上的BamHI与EcoRI酶切位点将GAD65基因插入PGEX-6P-3,转化大肠杆菌BL21,限制性内切酶消化鉴定。IPTG诱导重组菌株表达,用SDS-PAGE与Western-blot对表达产物进行鉴定,并用Sepharose4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScissionProteas酶对融合蛋白进行酶切。结果扩增的GAD65长度为1758bp,测序结果与已知序列吻合。重组子经酶切鉴定,获得PGEX-6P-3GAD65原核表达菌株,获得分子量约91000的PGEX-6P-3/GAD65融合蛋白,分离纯化出约65000的GAD65蛋白,Western-blot表明重组蛋白能被GAD65单克隆抗体特异结合。结论成功获得GAD65蛋白,为研究GAD65生物学作用奠定了基础。