不同类型造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的监测

目的观察在不同类型造血干细胞移植中巨细胞病毒感染状况。方法应用半巢式PCR技术定期检测了2001-03~2003-07苏州大学附属第一医院住院病人55例移植病人外周血标本,比较不同类型移植CMV-DNA阳性率的差别。结果在检测的462份标本中,有285份为阳性,33/55(60%)患者CMV-DNA阳性,非清髓性造血干细胞移植(NST)的阳性检出率为15/17(88·2%),亲缘间外周血造血干细胞移植(PBSCT)的阳性检出率为3/7(42·9%),非亲缘性骨髓移植(UR-BMT)的阳性检出率为7/11(63·6%),亲缘性骨髓移植(R-BMT)的阳性检出率为8/20(40·0%)。NST与PBSCT、R-BMT的巨细胞病毒感染率差别显著(χ~2=5·44,P<0·05;χ~2=9·14,P<0·05),NST与UR-BMT(χ~2=2·39,P>0·05)间的差别无统计学意义。结论巨细胞病毒感染在不同的造血干细胞移植方式可能存在差异。     

预激方案诱导治疗老年性急性髓系白血病的疗效观察

老年性急性髓系白血病(AML)是一类在生物学上和临床表现上不同的白血病，很多老年性AML由骨髓增生异常综合征(MDS)转化而来，常规化疗耐药，骨髓抑制期长，合并症多，治疗相关死亡率高达25％，完全缓解(CR)率仅为45％，而非老年AMLCR率约60％-80％。老年性AML的无病生存率(DFS)仅为20％，总的长期生存率不到10％。     

PARG基因沉默在六价铬诱导细胞周期改变中的作用北大核心CSCD

目的深入了解PARG的功能及探讨PARG基因沉默在调节六价铬诱导细胞周期改变的作用。方法使用前期构建的PARG基因缺陷细胞(sh PARG细胞)和正常16HBE细胞作为研究对象,进行0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L的六价铬[Cr(Ⅵ)]溶液染毒处理24 h,利用免疫荧光法检测PAR的表达、流式细胞仪观察细胞周期、RTPCR分析ATM和P53基因mRNA水平的表达。结果 Cr(Ⅵ)染毒处理后,正常16HBE细胞的S期明显延长,0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L剂量组S期细胞比例分别为18.3%、21.6%、26.0%、30.9%、38.8%和43.2%,G2期明显缩短;sh PARG细胞的S期延长,但比例增幅远小于正常16HBE细胞,0、0.3、0.6、1.2、2.5和5.0μmol/L剂量组S期细胞比例分别为17.0%、19.0%、20.1%、21.2%、24.5%和31.3%。正常16HBE细胞内P53基因表达随Cr(Ⅵ)作用剂量的增加而逐渐升高,PARG缺陷细胞内P53基因表达改变不明显(与对照组相比,P>0.05);Cr(Ⅵ)染毒处理后,两种细胞内ATM基因的表达均增加,但正常16HBE细胞内增加更明显,如:5.0μmol/L的Cr(Ⅵ)作用时,正常16HBE细胞内ATM基因的表达升高可达6.67倍(与对照组相比,P<0.01),而sh PARG细胞内ATM基因表达仅升高2.27倍(与对照组相比,P<0.01)。结论 PARG基因沉默可对抗Cr(Ⅵ)诱导的细胞周期时相改变。     

造血干细胞移植合并感染8例临床分析

我院１９８８年１２月至１９９７年３月采用造血干细胞移植治疗恶性血液病１７例。其中自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）１０例，自体外周血干细胞移植（ＡＰＢＳＣＴ）５例，异基因外周血干细胞移植（Ａｌｏ－ＰＢＳＣＴ）２例。１７例患者中合并感染８例，现报道如下。１资料与...     

母供子非去T细胞性单倍体异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

目的:对18例恶性血液病进行母供子非去T细胞性单倍体异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗,探讨其疗效及毒性反应。方法:6例急性髓系白血病(AML-M23例,AML-M41例,AML-M5b2例),3例慢性粒细胞白血病(伴骨髓纤维化1例),8例急性淋巴细胞白血病(ALL),非霍奇金淋巴瘤(Ⅳ期B组)1例,以母亲为供者进行非去T细胞性单倍体Allo-HSCT。供者动员方案:G-CSF300μg/12h×5d后采集造血干细胞。输注D34 细胞(3.58~8.90)×106/kg。预处理方案为:MeCCNC250mg·m-2·d-1×1d,Ara-C4g·m-2·d-1×2d,Bu4mg·kg-1·d-1×3d,CTX1.8g·m-2·d-1×2d。ALL患者以全身放疗(TBI)代替Bu。以CsA、MMF、MTX和ALG预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果:所有患者均顺利完成预处理。移植后发生急性GVHD16例、慢性GVHD10例,出血性膀胱炎1例。全部患者在移植后10~20d获造血重建。18例患者中12例存活。结论:非去T细胞性单倍体Allo-HSCT是治疗恶性血液病的一种安全、有效的方法;同时提示在以后的单倍体异基因造血干细胞移植中优先选择母亲供体,对降低GVHD的严重程度、提高移植成功率是有帮助的。     

人巨细胞病毒先天性感染大鼠海马空间学习记忆功能受损

目的 探讨先天性感染人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的子代大鼠空间学习记忆情况及其影响机制. 方法 40只12周龄无特定病原体级Sprague-Dawley大鼠按雌雄3∶1合笼.用随机数字表法将受精大鼠分为研究组和对照组,每组15只.研究组妊娠3d腹腔接种组织半数感染量为1×10-6的病毒悬液0.5 ml;对照组同时腹腔注射人胚肺成纤维细胞上清液0.5 ml.接种后l周检测2组孕鼠外周血HCMV特异性抗体IgM和IgG.于临产前,取研究组和对照组孕鼠各3只行剖宫产,用随机数字表法在2组剖宫产所获仔鼠中各取5只,取双侧海马组织进行病毒分离.仔鼠饲养至28日龄时,从各组随机选择6只进行神经行为学检测(包括Morris水迷宫学习后的定位航行试验和空间探索试验).取完成神经行为学检测的大鼠脑组织,HE染色切片,光镜下观察;取仔鼠海马组织块透射电镜下观察、摄片.Morris水迷宫空间学习记忆测试数据采用广义混合线性模型,并用Origin 8.0绘制结果图.采用秩和检验、独立样本t检验和x2检验进行统计学分析. 结果 (1)研究组15只雌鼠中,11只成功分娩;对照组15只均成功分娩.研究组母鼠的产仔量低于对照组[(5.5±2.4)只与(8.7±3.1)只,t=2.366,P=0.033),仔鼠生后1周内死亡率高于对照组[26.1％(18/69)与4.9％(6/122),x2=191.020,P=0.000].研究组7只次海马病毒分离阳性,对照组均为阴性.(2)研究组第1～4天逃避潜伏期均长于对照组,差异有统计学意义(广义混合线性模型检验,F=499.473,P=0.000).研究组第1～4天的总路程长于对照组(广义混合线性模型检验,F=440.167,P=0.000).空间探索能力方面,研究组穿越平台次数少于对照组[(4.2l±1.44)次与(7.50±1.72)次,t=7.182,P=0.003],目标象限游泳时间占总时间比例少于对照组[(26±4)％与(47±5)％,t=15.487,P=0.000].(3)光镜观察可见研究组大鼠脑组织存在不同程度皮层液化坏死,空泡变性较多,海马结构紊乱;电镜下可见研究组大鼠脑组织存在典型的陈旧性髓鞘损伤及崩解. 结论 HCMV先天性感染仔鼠出现较明显的空间学习记忆功能下降,其病理机制主要与皮层和海马结构损伤有关.     

双侧经椎弓根入路与单侧经椎弓根外极外侧入路在椎体成形术中的应用比较

目的:分析经双侧椎弓根穿刺和经单侧椎弓根外极外侧穿刺入路治疗骨质疏松症性椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fractures,OVCFs)的优缺点。方法:对2008年1月至2010年12月收治的54例骨质疏松症性椎体压缩骨折的临床资料进行回顾性分析,男24例,女30例;年龄59～88岁,平均66.9岁。其中采用双侧椎弓根入路者26例(双侧组),采用单侧椎弓根外极外侧穿刺入路者28例(单侧组),对两组入路的骨水泥注入量、术中放射投照次数、手术时间、骨水泥渗漏率、血管神经并发症等进行观察,通过VAS评分对两组患者临床疗效进行比较,通过影像学资料观察伤椎局部后凸Cobb角、椎体前缘压缩比率并评估畸形恢复情况。结果:双侧组和单侧组的骨水泥注入量、术中放射投照次数、手术时间、VAS评分分别为(6.6±0.8)ml和(6.8±1.5)ml,(21.7±4.0)次和(17.9±3.6)次,(40.5±5.5)min和(31.6±9.1)min,(2.8±0.6)分和(3.1±0.5)分;影像学指标局部后凸Cobb角和椎体前缘压缩比率分别为(7.6±2.0)°和(6.9±2.6)°,(18.1±5.8)%和(16.5±6.1)%。两组均无血管神经并发症,骨水泥渗漏率双侧组3例(11%),单侧组3例(10%);两组在VAS评分、椎体高度恢复、Cobb角、骨水泥注入量、骨水泥渗漏率等方面比较差异无统计学意义,但在术中放射投照次数、手术时间方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经双侧椎弓根入路和经单侧椎弓根外入路均能治疗骨质疏松性椎体压缩骨折,但经单侧椎弓根外穿刺途径可缩短手术时间,减少术中医源性放射线损伤。     

一株新的急性髓系白血病细胞系SH-2的建立及其鉴定

Objective To establish and characterize a novel human myeloid leukemia cell line SH-2. Methods Bone marrow mononuclear cells(BMMNC) isolated from a AML-M2 patient, who failed to ob-tain complete remission after chemotherapy and allogenic bone marrow transplantation were passed in a long term IMDM culture medium supplemented with 20% fetal calf serum. Stromal cells were retained and rh-IL-3was added in the culture system. A new human myeloid leukemia cell line SH-2 was successfully established with a cytogeuetic characteristics of a loss of Y chromosome(- Y), a derivative chromosome 16 resulting from unbalanced translocation between chromosome 16 and 17, monosome 17, trisomy 19 and p53 alteration. Vari-ous methods were employed to characterize SH-2 cell line. Results SH-2 cells has been maintained without cytokine and stromal cells for more than 3 years without EB virus and mycoplasma contamination. SH-2 cells had the basically same morphological, immunophenotypic and cytogenetic features as the patient' s leukemia cells did, such as myeloid morphology, an immunophenotype of CD13+ , CD33+ , CD56+ , CD16/56+ and a hypodiploid karyotype of 45, X, - Y, der(16) t(16;17) (q24;q12) , - 17, + 19, which were gradually de-creased and replaced by the near-tetraploid cells with a karyotype of 73 - 102 (80), XX, - Y, - Y, del (lq31) ×2, der(16)t(16;17) (q24;q12) ×2, - 17, - 17, + 19, + 19. FISH and multiple FISH delineated all the abnormalities and revealed a loss of one p53 allele due to monosomy 17. DNA direct sequencing detec-ted a point mutation of CAG to CAT at codon 576 of exon 5 in another p53 allele. RT-PCR showed that SH-2 cells expressed apoptosis-related genes (bcl-2, Fas, GST- π and p21) rather than MDR-related genes. Short tandem repeat PCR provided powerful evidence for the derivation of SH-2 cell line from the patient' s leukemia cells. SH-2 cells had certain colony formation and tumorigenic capacities in nude and SCID mice. Conclu-sion SH-2 is a new myeloid leukemia cell line with a unique biology background, and will provide a useful tool for leukemia research.     

IL-2和IL-15激活供者自然杀伤细胞在异基因造血干细胞移植应用的实验研究

目的 探讨IL-2和IL-15激活的供者自然杀伤(NK)细胞在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中减轻移植物抗宿主病(GVHD)发挥移植物抗白血病效应方面的作用.方法 采用免疫磁珠分选小鼠脾NK细胞,采用添加IL-2和IL-15的培养基扩增NK细胞并测定NK细胞杀伤活力.C57BL/6小鼠作为供鼠,BALB/c小鼠作为受鼠,部分小鼠移植前8天静脉接种EL9611白血病细胞.异基因移植小鼠输注骨髓细胞5×106 和脾细胞5 × 106.NK细胞治疗组输注骨髓细胞和脾细胞各5×106 以及激活的NK细胞1 × 107,并且给予腹腔注射IL-2和IL-15.移植后观察GVHD发生、生存期、嵌合度、免疫重建.结果 分选NK细胞纯度为95.7%～97.1%.培养后NK细胞杀伤活力较静息时增加3倍.单纯异基因骨髓细胞输注组小鼠未见GVHD发生,异基因骨髓及脾细胞移植对照组移植后1周起开始出现GVHD表现.实验组小鼠发生GVHD的严重程度明显低于脾细胞输注小鼠(P＜0.05).单纯全身照射预处理小鼠生存期9.5～14.0 d.白血病模型中对照组移植后100 d生存率10%,其余死于白血病;实验组80%生存期超过100 d,实验组生存期明显长于对照组(P＜0.01).实验组小鼠移植后2周外周血NK细胞占4.8%,对照组外周血NK细胞占2.8%,实验组NK细胞恢复早于对照组(P＜0.05).实验组TRBV基因重建比对照组快,而且TRBV家族基因表达数比对照组多,对照组小鼠多见单克隆及寡克隆表达.结论 IL-2和IL-15在体外可以有效促进NK细胞增殖与激活.allo-HSCT时给予激活的供者NK细胞输注以及相关细胞因子处理可以促进免疫重建、减轻GVHD发生、降低白血病复发.     

硼替佐米联合沙利度胺、地塞米松治疗原发性浆细胞白血病一例

患者,男,47岁,因"双下肢酸痛,乏力1个月,咳嗽10d"于2006年10月来我院就诊,检查发现WBC14.2×109/L,分类示浆细胞0.31,骨髓检查示浆细胞系统异常增生占0.460,其中原始和幼稚浆细胞占0.385.既往无多发性骨髓瘤或其他浆细胞疾病史.入院查体:体温:37.8℃,脉率:80次/min,血压:130/90 mm Hg(1 mmHg=0.133kPa).