Huwe1-shRNA 靶向沉默L2.3神经干细胞的Huwe1表达

【摘要】 目的 探讨Huwe1 shRNA通过慢病毒载体转染L23神经干细胞,是否可以靶向沉默L23神经干细胞的Huwe1基因。方法 将体外培养的L23神经干细胞分成3组：huwe1 shRNA未转染组（control 组）、阴性序列转染组（control shRNA组）、huwe1 shRNA转染组（Huwe1 shRNA组）。Control组：仅常规体外培养L23神经干细胞。不将阴性序列和Huwe1 shRNA通过慢病毒载体转染L23神经干细胞。Control shRNA组：阴性序列通过慢病毒转染体外培养的L23神经干细胞。Huwe1 shRNA组：Huwe1 shRNA通过慢病毒载体成功感染体外培养L23神经干细胞。分别收集三组体外培养的L23神经干细胞,应用western blot 方法分别检测三组L23神经干细胞Huwe1蛋白的表达。 结果 与control组、control shRNA组比, Huwe1shRNA组体外培养的L23神经干细胞huwe1蛋白表达条带显著减弱、变细（P < 005）。与control组Huwe1蛋白的相对表达量比,Huwe1shRNA组Huwe1蛋白的相对表达量是control组的25%（P < 005）。与control 组比,control shRNA组和Huwe1shRNA组在慢病毒载体转染L23神经干细胞,L23神经干细胞存活率无明显下降（P>005) 结论 Huwe1 shRNA通过慢病毒载体转染L23神经干细胞,可以靶向沉默L23神经干细胞Huwe1基因,却不影响L23神经干细胞的存活率。     

多巴酚丁胺负荷超声心动图对老年冠心病的预后评价

目的 探讨多巴酚丁胺负荷超声心动图（DSE）对老年冠心病（CAD）病人各种心血管危险因素和左室容积变化的预后评价。方法 DSE采用负荷分级方法,LVV采用动态三维超声心动图（3－DE）测定,随访自DSE之日开始,终点为出现心血管事件。结果 病例组中年龄≥65岁者与＜65岁者相比,收缩末期容积（ESV）、射血分数（EF）在静息状态、最大负荷及随访时均存在显著性差异,两组免于全部心脏事件的累积生存率也存在差异（P＜0．01）;≥65岁、DSE（＋）、ESV的异常变化以及静息时EF＜0．40是Cox比例风险模型中心脏事件的独立预测指标。结论 年龄≥65岁、DSE（＋）、ESV的异常变化可以提供CAD病人预后方面的重要信息。     

阴道斜隔误诊为盆腔包块1例分析

对阴道斜隔误诊为盆腔包块1例分析如下。 1摘历摘要。 女，15岁。因停经41d，腹痛1周，检查发现盆腔包块3h于2008—07—30T15：00以盆腔包块收入普外科住院治疗。患者月经史：14岁初潮，周期28～30d，经期6～7d，经量中等，近2个月有痛经史，     

心脏肿瘤的超声病理学改变

心脏肿瘤的超声病理学改变徐州医学院附院陈清枝，吴兰芬，李东野本文２５例心脏占位性肿瘤中，女性１２例，男１３例，左房粘液瘤１８例，右房粘液瘤４例，左室流出道粘液瘤１例，经手术和病理证实，瘤重１４．５～２０８克。超声所见：左房粘液瘤：左房左室间见异常活动...     

人胚胎干细胞无血清无饲养层培养体系的建立

背景:研究表明FGF2,TGFβ/activin/nodal和IGF信号通路是人胚胎干细胞保持其多能性所必需的,然而直接添加外源性碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β和胰岛素是否能够维持人胚胎干细胞的自我更新目前尚无报道.目的:拟建立人胚胎干细胞无饲养层无血清条件下的培养体系.设计,时间及地点:细胞学体外观察,于2007-09/2009-02在中国科学院昆明动物研究所完成.材料:12.5～13.5d龄清洁级ICR孕鼠2只,由昆明医学院动物中心提供.人胚胎干细胞株BG02购自美国Bresagen公司.方法:①消化离心BG02细胞,重悬于无饲养层过渡培养基后接种,常规培养5～7 d,挑去分化的人胚胎干细胞,加入分散酶消化,切割成小团块,离心重悬后按1:3比例重新接种预铺层粘连蛋白的4孔板,此时培养基换成无血清无饲养层培养基,由80%DMEM/F12、20%KSR、2 mmol/L glutamine、1%非必需氨基酸、0.1 mmol/L β-巯基乙醇、ITS(×1)、10~6 U/L青霉素、100 mg/L 链霉素、4 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、0.12 μg/L转化生长因子β1组成.②无菌条件下取出ICR胎鼠,组织块胰酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞,接种在0.1%明胶包被的6孔板中即为饲养层.将生长在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上的人胚胎干细胞株BG02预铺至有层粘连蛋白的培养板上,加入含碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1及ITS的无血清培养基连续培养.主要观察指标:观察BG02细胞在无血清无饲养层培养体系中的形态,采用细胞免疫组化法检测人胚胎干细胞特异性分子标志的表达,检测BG02细胞体外分化能力及其核型,比较BG02细胞在无血清无饲养层和小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系中的生长情况、细胞集落分化率.结果:在无血清无饲养层培养体系中,BG02细胞连续传代20代,细胞呈典型的人胚胎干细胞形态特征;BG02细胞表达SSEA-4,SSEA-3,TRA-1-60,TRA-1-81,Oct-4,但不表达SSEA-1;培养20 d后,BG02细胞进一步分化成3个胚层的细胞,分化细胞能够表达甲胎蛋白、巢蛋白、α-肌动蛋白;培养至20代细胞核型均正常(46XY).与在饲养层培养体系下比较,无血清无饲养层条件下BG02细胞BG02细胞生长速度减慢,细胞倍增时间明显延长(P＜0.05),集落分化率明显升高(P＜0.05).结论:实验初步建立了入胚胎干细胞无血清无饲养层的培养体系,添加碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1和ITS可以维持人胚胎干细胞的自我更新.     

仙茅提取物体外抗氧化活性研究

目的 探讨仙茅提取物的抗氧化活性.方法 先用80%乙醇,然后用蒸馏水对仙茅进行提取,其中醇提浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取;水提部分经醇沉,制备仙茅粗多糖.分别观察仙茅各提取物对羟基自由基 (·OH)、1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH·)的清除率以及对Fe~(3+)还原力.结果 与抗坏血酸比较,仙茅提取物对自由基均有较强清除作用,对·OH的清除率乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>粗多糖>总醇提物,IC_(50)值分别为0.247、0.358、0.796和0.871 mg/ml;对DPPH·的清除率乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总醇萃取物>氯仿萃取物>石油醚萃取物>粗多糖,其IC_(50)值分别为0.026、0.055、0.620、0.071、0.122和0.275 mg/ml.不同提取物对Fe~(3+)有较强还原能力,还原力大小为:乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总醇提物>氯仿萃取物>石油醚萃取物>粗多糖.结论 仙茅具有明显的抗氧化活性,在抗衰老方面有广泛的应用前景.     

青年高血压病患者血管内皮依赖性舒张功能的无创伤性评价

为了评价无其它动脉粥样硬化因素及粥样斑块的青年高血压病患者的血管内皮依赖性舒张功能 ,用B型超声对 45例 35岁以下的青年高血压病患者和 2 0例健康对照者在反应性充血和舌下含服硝酸甘油后肱动脉内径进行了检测。结果发现 ,青年高血压病患者前臂加压后肱动脉内径增加的比例明显小于对照组 (前者为 12 .32 %± 4.94% ,后者为 16 .6 3%± 5 .87% ,P <0 .0 1) ,而在舌下含服硝酸甘油后肱动脉内径的变化两组间无显著性差异(前者为 18.94%± 6 .5 0 % ,后者为 2 1.0 2 %± 6 .6 5 % ,P >0 .0 5 )。提示青年高血压病患者虽然没有明显的动脉粥样硬化的证据和其它易患因素 ,但已经存在显著的血管内皮依赖性舒张功能障碍。     

静脉注射尼卡地平对重度高血压患者血压和心功能的影响

目的研究静脉注射尼卡地平对重度高血压患者血压和左心功能的影响。方法用尼卡地平持续２４ｈ静脉滴注（１．５～３ｍｇ／ｈ）治疗２０例重度高血压患者，观察给药前后血压、心率、左心功能以及自觉症状变化。结果降压显效率１００％，５ｍｉｎ起效，０．５～１ｈ血压降至理想水平，同时全部病例脑循环障碍症状消失，２４ｈ降压效果平稳，心率轻度增快（＜１０ｍｉｎ－１），左心收缩功能明显改善，而舒张功能未见变化。结论静脉注射尼卡地平可迅速、显著而平稳降低重度高血压患者的血压，改善左心收缩功能。     

改良手术方法治疗结膜松弛症31例

结膜松弛症是由于球结膜过度松弛和(或)下睑缘张力高,造成松弛球结膜堆积在眼球与下睑缘及内、外眦部之间形成皱褶,引起眼表泪液学异常,并伴有眼部不适等症状的疾病[¨.结膜松弛症为老年人的常见病,常累及双眼.患者常有流泪、干涩、异物感等症状,甚至还可出现眼痛、结膜下出血,甚至边缘性角膜溃疡等.它不仅严重影响患者的日常生活,同时还给患者造成美容上的缺陷.严重的结膜松弛症需要手术治疗,目前的手术方法较多,但各有自己的优缺点.本文为改良的结膜梯形切除联合结膜巩膜固定术,在临床上取得了满意的效果.     

高血压病患者血管内皮依赖性舒张功能的无创评价

目的 :应用超声技术评价高血压病患者的血管内皮依赖性舒张功能。方法 :用B型超声对 2 6例高血压病患者和 12例健康对照者在反应性充血和舌下含服硝酸甘油后肱动脉内径的变化情况进行了检测。结果 :高血压病患者前臂加压后肱动脉内径增加的比例明显小于对照组 (12 .5 3%± 4.2 6 %vs 17.76± 6 .0 2 % ,P <0 0 1) ,而在舌下含服硝酸甘油后肱动脉内径的变化两组间无显著性差异 (19.41%± 6 .73%vs 2 1.2 4%± 6 .96 % ,P >0 0 5 )。结论 :高血压病患者虽然还没有明显的动脉粥样硬化的证据 ,但已经存在显著的血管内皮依赖性舒张功能障碍。