杭州地区急性呼吸道感染患儿人博卡病毒的检测及分析

目的了解杭州地区人博卡病毒(HBoV)的流行情况和基因变异情况。方法对杭州地区160例儿童急性呼吸道感染患者咽拭子样本进行HBoV检测,并对阳性样本进行常见呼吸道病毒的检测,最终选取HBoV单一阳性的HZ1株和HZ2株进行VP1基因扩增,将获得的序列上传Genbank并与其他国家和地区的8株HBoV的VP1基因进行序列比对和分析。结果杭州地区HBoV的检出率为6.9%(11/160),与其他常见呼吸道病毒的合并感染率达到45.5%(5/11),HZ1株和HZ2株与其他国家和地区的8株HBoV的VP1基因相似性达到99%以上。结论研究证明杭州地区急性呼吸道感染患儿中存在HBoV的感染,与其他呼吸道病毒有较高的合并感染,从分离到的HZ1株和HZ2株来看,杭州地区流行的是ST2基因型,其外壳蛋白VP1基因变异很小。     

杭州市肠道病毒71型的分离与VP1区域序列分析

目的了解杭州市2008年和2011年肠道病毒71型(EV71)流行株VP1基因特征。方法手足口病患者咽拭子、粪便等样本先通过荧光RT-PCR方法初筛,然后选部分肠道病毒71型阳性样本进行病毒分离、培养;通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定上述培养物,并扩增VP1区全长基因和序列测定,利用生物信息学软件对序列进行分析,构建基因进化树。结果从2008年和2011年手足口样本中分离到EV71阳性毒株各4株,VP1基因全序列测定结果显示其与C4亚型代表株核苷酸和氨基酸的相似性最高,分别为93.8%～95.2%、99.0%～99.7%。结论杭州市手足口病患者感染EV71病毒的流行株属C基因型的C4亚型。     

机械通气相关性肺炎31例临床分析

随着ICu建立与机械通气在临床广泛应用,与机械通气相关的院内感染性肺炎,也称为呼吸机相关性肺炎(VAP)日渐增多.VAP是机械通气患者的常见并发症和重要致死原因.为探索机械通气相关性肺炎的临床特点,加强防治,对我院ICU中行气管插管或气管切开机械通气(MV)期间出现的VAP31例作一回顾性分析,以达到早期诊断与治疗,降低VAP发生率的目的.     

O139群霍乱弧菌的核糖体基因分型及其与药物抗性相关性研究

目的了解杭州市及浙江省部分地区O139群霍乱弧菌分离株的核糖体基因分型特征及其与抗生素抗性关系。方法对1994~2004年杭州市分离的105株及2000年浙江省部分地区分离的5株O139群菌株,PCR法检测ctxA和tcpA基因,纸片扩散法测定抗生素抗性,应用核糖体基因分型技术进行分子分型;并与1997~2001年分离的20株O1群霍乱弧菌流行株代表菌株的分子分型结果进行比较。结果杭州市105株O139群菌株中,95株ctxA阳性菌株分为8个型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅷ型),其中Ⅱ型菌株为2000年后的优势克隆群(占73.7%,70/95),并于2004年引起一起较大规模的爆发;10株ctxA阴性菌株被分为3个型(α、β和γ型)。2000年浙江绍兴市4株ctxA阳性O139群分离株属Ⅱ型,浙江湖州市1株ctxA阴性分离株属γ型。20株O1群流行代表菌株被分为5个型(A、B、C、D和E型),其中A型和B型分别与O139群中的Ⅵ型和Ⅶ型的带谱相同。ctxA阳性和ctxA阴性O139群菌株间的耐药谱显著不同。67株Ⅱ型O139群菌株中共有28种耐药谱,最少的仅对2种抗生素同时耐药,最多对11种抗生素同时耐药;分别有对11种和10种抗生素耐药的菌株在2002~2004年间成为优势菌(81.5%,22/27)。结论1994~2004年间多种核糖体基因型O139群霍乱弧菌在杭州同时或替换流行,多重耐药的核糖体基因型Ⅱ型O139群菌株于2002~2004年间成了杭州优势流行菌株。     

婴幼儿疑似甲型H1N1重症病例及门诊流感样病例中鼻病毒的检测分析

目的 了解鼻病毒在婴幼儿疑似甲型H1N1重症病例及门诊流感样病例中的分布、分子进化特征,及与其他呼吸道病毒的合并感染情况。方法 样本有两种来源：疑似甲流重症病例样本246份为样本1组,门诊流感样病例样本68份为样本2组。扩增鼻病毒5’非编码区及VP2-VP4区,测序比对,构建进化树。对鼻病毒阳性样本检测其他常见呼吸道病毒。结果 样本1组中鼻病毒阳性率为8.54%(21/246)。样本2组中鼻病毒阳性率为16.2%（11/68）。样本1组和样本2组鼻病毒与其他呼吸道病毒的合并感染率分别为71.4%、9.09%,两者具有显著性差异（P<0.05）。对其中14份样本成功进行了测序,HRV-A、HRV-B、HRV-C基因型所占比例分别为64.3%、7.1%和28.6%。多序列比对分析表明鼻病毒3个基因型间的核苷酸序列一致性为55%～65%。结论 HRV在疑似甲型H1N1流感重症病例中主要是以合并感染为主。杭州地区婴幼儿疑似甲型H1N1流感重症病例及门诊流感样病例中鼻病毒感染主要是以HRV-A,HRV-C基因型为主,HRV各型别之间核苷酸变异较大。     

茶多酚在食用植物油中的增溶和抗氧化机理

目的：研究茶多酚在食用植物油中的抗氧化性能,并探讨增效茶多酚溶解在植物油听中的抗氧化机理和表面活性剂在非水体中的增溶机理。方法：利用复配非离子表面活性剂作为溶剂,制备了增效脂溶性茶多酚溶液,测定处理植物油的过氧化值（POV),考察抗氧化性能。结果：该茶多酚溶液在植物油中抗氧化活性明显优于合成抗氧化剂二丁基羟基甲苯、叔丁基对苯二酚,在使用浓度范围内,茶多酚的氧化产物不影响植物的色泽和清亮度。结论：茶多酚是一种天然的、优质植物油抗氧化剂。     

脑钠肽在慢性心力衰竭中的作用

目的：研究脑钠肽（BNP）在慢性心力衰竭（CHF）患者的病情评估及疗效评价方面的价值。方法：采用美国博适Triage检测仪,测定148例不同心功能NYHA分级的CHF患者的BNP浓度;及部分心功能NYHAm～Ⅳ级患者常规抗心力衰竭药物治疗后1～4周的BNP水平。结果：不同心功能NYHA分级的CHF患者的BNP水平间有显著性差异[Ⅱ级（362士192）pg／ml,Ⅲ级（792±318）pg／ml,Ⅳ级（2156±1065）pg／ml,P〈0．013;CHF患者经常规治疗后,随着NYHA心功能分级的改善,血液BNP水平明显下降,由（2153±1067）pg／ml降至（1012±564）pg／ml,P〈0．01。结论：BNP作为一客观指标对心力衰竭患者心功能的诊断和预后评估有重要作用。     

miR-181a调控血管紧张素Ⅱ诱导骨桥蛋白在血管平滑肌细胞的表达研究

目的明确miRNA-181a在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)中的骨桥蛋白(OPN)的作用及相关机制。方法分离培养出的VSMCs,使用100 nM AngⅡ处理后,检测不同时间点OPN蛋白表达水平的变化,同时利用q PCR检测miR-181a的变化后,将VSMCs分为空白对照组(不做任何处理)、AngⅡ刺激组(加入100 nM AngⅡ诱导)、阴性miRNA+AngⅡ刺激组(转入阴性miRNA并加入100 nM AngⅡ)以及miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组(转入miR-181a模拟剂并加入100 nM AngⅡ)。48 h后Western blotting检测OPN在蛋白水平的变化,并使用Annexin V/PI方式检测凋亡变化、transwell检测迁移的变化;随后VSMCs被分为CON与miR181a inhibitor组,48 h后使用Western blotting检测p53、Bax、p21变化。结果使用100 nM AngⅡ处理后,VSMCs的OPN蛋白表达水平不断上升;使用100 nM AngⅡ处理24 h后,miRNA-181a相对表达量100 n M组显著低于0 nM组; VSMCs在转入miR-181a模拟剂48 h后,miR-181a模拟剂显著高CON组;在空白对照组、AngⅡ刺激组、阴性miRNA+AngⅡ刺激组以及miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组中,相对于阴性对照组,AngⅡ刺激组OPN表达显著上升,而miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组OPN表达显著低于AngⅡ刺激组,略高于阴性对照组;在细胞凋亡中,与AngⅡ刺激组阴性组和miRNA+AngⅡ刺激组相比,miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组Annexin V阳性细胞比率明显减少,说明能够明显抑制细胞凋亡。在细胞迁移中,miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组能够明显抑制细胞迁移。VSMCs在转入miR-181a inhibitor后,相对于CON组,p53、Bax、p21表达均有明显的上升。结论 miR181-a抑制了AngⅡ诱导VSMCs的OPN,同时抑制了AngⅡ诱导的凋亡与增殖,而miR181-a的抑制所诱导的凋亡与p53通路相关。     

注视方向影响社交焦虑个体对情绪面孔加工的眼动研究

目的 探讨注视方向线索对社交焦虑个体面部表情加工的影响.方法 从安徽医科大学抽取56名本科生,依Liebowitz社交焦虑量表(LSAS)得分将被试分为高社交焦虑组(HSA)和低社交焦虑组(LSA),采用配对的厌恶和中性面孔作为实验刺激材料并记录眼动数据.结果 直视条件下,HSA组注视厌恶面孔的时间为(2311.09±521.41)ms,注视中性面孔的时间为(1910.69±607.59)ms,差异具有统计学意义(P＜0.05),LSA组注视厌恶面孔与中性面孔的时间差异无统计学意义(P＞0.05);斜视条件下,HSA与LSA注视厌恶面孔与中性面孔的时间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 注视方向影响了社交焦虑个体对厌恶表情的加工,表明直视的厌恶面孔对于HSA个体来说是一种社交威胁信息,斜视的厌恶面孔不是明确的社交威胁信息.     

芦荟中微量锌的阳极溶出伏安法测定及电极反应机理

目的：研究微分阳极溶出伏安法测定芦荟中微量锌的方法及电极反应机理。方法：以氯化钾和乙二胺为支持电解质，玻碳电极为工作电极，在-1.80V(vs，SCE)电位下富集2min，测定其循环伏安曲线，且于-1.80V开始快速阳极扫描至-0.35V得溶出峰。结果：于-1.30V处可得一灵敏的微分阳极溶出峰，即峰电位Ep=-1.30V，峰电流Ip与Zn(Ⅱ)的浓度在0.005-0.050μg/ml范围内呈线性关系，最低检出限为0.001μg/ml，电极反应为完全不可逆双电子转移过程。结论：该法用于芦荟中锌含量的测定，简便、快速、准确。