穿心莲内酯通过Caspase-3/PARP途径诱导人舌癌Tb细胞凋亡作用研究

研究穿心莲内酯对舌癌细胞(Tb细胞)凋亡的作用及其机制。用瑞士吉姆萨染色法、Hoechst 33258荧光染色法、原位Annexin V/PI双染和流式细胞术检测穿心莲内酯对Tb细胞凋亡的作用;Western blot检测穿心莲内酯诱导Tb细胞凋亡的机制。结果显示:穿心莲内酯处理Tb细胞后,与对照组相比,细胞凋亡数明显增加(P<0.05)。Western blot实验结果发现,穿心莲内酯处理组与对照组相比,聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(polyADP-ribosepolymerase,PARP)表达明显增强(P<0.05),表明穿心莲内酯可能通过活化PARP促进Tb细胞的凋亡。     

P-选择素对ApcMin/+小鼠肠道肿瘤的作用

目的: 研究P-选择素(P-selectin)在Apc^Min/+小鼠肠道肿瘤中的作用。方法: 采用P-selectin 基因缺失的基因工程小鼠和肠道肿瘤模型Apc^Min/+小鼠杂交,计数Apc^Min/+小鼠与Apc^Min/+ P-selectin ^-/-杂交小鼠小肠及大肠肿瘤的数目,并测量其肿瘤体积,研究P-selectin对Apc^Min/+小鼠肠道肿瘤的作用。结果: 与Apc^Min/+小鼠相比,Apc^Min/+P-selectin^-/-杂交小鼠在9周龄时肠道肿瘤数目与总负荷明显减少。结论: P-selectin 缺失能够显著抑制Apc^Min/+小鼠肠道肿瘤的生长。     

组织因子单克隆抗体及对照抗体的制备、纯化和鉴定

目的纯化组织因子(TF)单克隆抗体及对照抗体。方法给小鼠腹腔注射杂交瘤8A3和9E10细胞,产生的腹水应用凝胶过滤层析法和Protein A亲和层析法纯化组织因子抗体及对照抗体,并用SDS-PAGE和BCA法检测纯化后单克隆抗体的纯度及蛋白浓度。结果单抗纯化后电泳重链和轻链都呈一条带,TF抗体和对照抗体的最终浓度分别为0.7726mg/ml和0.8592mg/ml。结论应用层析法和凝胶过滤和Protein A亲和分离层析法纯化抗体,能够得到纯度较高的单克隆抗体。