抑制Mcl-1表达调控结核感染的小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的机制初探

目的:应用Mcl-1-shRNA质粒抑制不同毒力结核分枝杆菌(MTB)菌株感染的小鼠腹腔巨噬细胞中Mcl-1的表达,通过观察Bcl-2和Bax表达的变化探讨其调控机制。方法:制备不同毒力MTB菌株悬液,分别感染BALB/c小鼠,再用Mcl-1-shRNA质粒处理感染小鼠模型,并同时设立对应的对照组,于处理后1 d、3 d、5 d和7d处死小鼠并收集腹腔巨噬细胞。应用流式细胞术检测不同处理时间、不同毒力菌株感染时小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡率,real-time PCR和Western blot检测Bcl-2和Bax的表达。结果:Mcl-1-shRNA质粒处理后,不同毒力MTB菌株感染的小鼠巨噬细胞凋亡率均比对照组有不同程度的增高,其中以BCG和H37Ra组最明显(P 0. 05); Bcl-2的mRNA和蛋白水平显著减少,而Bax的mRNA和蛋白的表达均显著增加,以BCG感染组较为显著,且二者mRNA的比值与菌株毒力呈负相关(P 0. 05)。结论:抑制Mcl-1的表达可显著促进不同毒力MTB菌株感染的小鼠腹腔巨噬细胞凋亡,其调控机制可能与Bcl-2和Bax蛋白的表达及MTB菌株毒力密切相关。     

不要忽视“微”中风

轻度中风时及早寻求治疗可以防止将来发生重度中风。许多有心脏病发作风险的人中风的风险也较高,由于潜在的动脉粥样硬化的疾病过程有时偶然发生可以阻止流向大脑的血液,和其对心脏的影响一样。虽然很多人都知道,胸痛是因为心脏没有足够的血液供应的标志,但他们可能认识不到脑供血不足的症     

蛛网膜下腔阻滞麻醉在老年髋关节置换术患者中的应用效果

目的：观察蛛网膜下腔阻滞麻醉在老年髋关节置换术患者中的应用效果。方法：选取2018年1月至2021年1月于该院行髋关节置换术的100例老年患者的临床资料进行回顾性分析,按髋关节置换术中麻醉方法不同分为研究组(n=52)和对照组(n=48)。两组均行髋关节置换术,对照组采用全身麻醉,研究组采用蛛网膜下腔阻滞麻醉。比较两组不同时间[麻醉前(T₁)、麻醉后10 min(T₂)、切皮时(T₃)、手术结束(T₄)]血流动力学指标[心率(HR)、收缩压(SBP)]水平、术后24 h视觉模拟评分法(VAS)评分、简易精神状态量表(MMSE)评分、术后谵妄发生率和麻醉不良反应发生率。结果：研究组术后24 h VAS评分为(3.67±1.20)分,明显低于对照组的(4.39±1.33)分,差异有统计学意义(P<0.05);术后1 h,两组MMSE评分均低于术前,但研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);T₁—T₄,两组HR、SBP水平组间比较,差异无...     

以磺胺嘧啶为载体的氟尿嘧啶导向药物的合成

目的合成以磺胺嘧啶为载体的氟尿嘧啶导向药物。方法将氟尿嘧啶与氯甲酰三氯甲酯(TCF)反应生成氯甲酰氟尿嘧啶,再与磺胺嘧啶磺酰胺基端高分子连接臂聚乙二醇(PEG)的羟基反应,使氟尿嘧啶通过PEG与磺胺嘧啶相连。紫外分光光度法检测载药量,紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)及差热分析(DSC)对合成产物进行鉴定。结果合成产物的载药量为3.2%,UV、IR、DSC检测表明氟尿嘧啶成功的接入。结论通过以TCF活化氟尿嘧啶可以使氟尿嘧啶与PEG的末端羟基成功地连接,从而合成氟尿嘧啶导向药物。     

结核分枝杆菌PhoP蛋白的生物信息学分析北大核心CSCD

目的应用生物信息学软件预测结核分枝杆菌PhoP基因编码蛋白的结构和功能。方法从NCBI数据库获取PhoP基本的基因信息及其编码序列氨基酸信息;应用ProtParam软件预测PhoP蛋白的理化性质;利用SignalIP4.1和TMHMM分析其信号肽和跨膜区;利用在线分析Expasy工具分析蛋白二级结构,建立蛋白三级结构模型;采用Bepipred 1.0Server和SYFPEITHI分析蛋白的B细胞及T细胞抗原表位。结果 PhopP蛋白共250个氨基酸,分子式为C1226H1974N346O364S4,原子总数3 914,半衰期为30h,预测该蛋白为稳定性亲水性蛋白;二级结构中α-螺旋、β-转角、β-折叠、无规则卷曲分别占36.03%、10.58%、24.7%和27.94%,预测的B细胞、CTL细胞抗原表位分别为21个和7个;PhoP基因与天蓝色链霉菌同源性较高;其编码蛋白的相互作用蛋白为PhoR、senX3、trcS等。结论生物信息学分析PhoP为稳定蛋白,且含有潜在的B、T细胞抗原表位,是结核病诊断及治疗的潜在候选因子。     

人IL-12 cDNA的克隆

目的: 克隆人IL-12的cDNA。方法：利用RT-PCR从人NC 37淋巴母细胞中克隆出IL-12中两个亚基p35和p40的cDNA并进行序列测定。结果：从NC 37细胞中克隆的p35 cDNA序列(GenBank登录号为AF 101062)与先前登录在GenBank上的M65271 (NC 37细胞来源）和M 65291(RPMI 8866细胞来源,美国专利号：5648467）的p35 cDNA序列分别有2处和1处碱基不同：编码第44位氨基酸残基密码子的第3个碱基M 65291是C,而M 65271和本研究AF 101062的相应序列2是G;编码第244氨基酸残基密码子的第3个碱基,M 65271序列是C,而M 65291和AF 101062的相应序列是T;编码第247氨基酸残基密码子的第2个碱基M 65271序列是C,而M 65291和AF 101062的相应序列是T。此外,本研究克隆的p40 cDNA序列与登录在GenBank的p40 cDNA (M 38444)序列完全相同。结论：尽管本研究克隆的p35 cDNA序列与已知的两种p35 cDNA序列分别有2处和1处碱基不同,但其编码的氨基酸序列却与专利登记的p35 cDNA（M 65291）编码的氨基酸序列完全一致,表明克隆的IL-12基因所表达的蛋白质在理论上是符合目前药用标准的。     

pMCLacⅠ/Neo质粒的构建和基因突变研究的新策略

目的：构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体。方法和结果：设计并构建一种具两个lacⅠ突变靶基因的突变研究载体：pMCLacⅠ/Neo质粒。在该质粒中,一个lacⅠ靶基因受CMV启动子的驱动而使其在人和哺乳动物细胞内能表达,而另一个lacⅠ靶基因则不能表达。将所获得的pMCLacⅠ/Neo质粒经酶切鉴定后,再进行如下功能鉴定：一是分析两个lacⅠ靶基因在大肠杆菌细胞内的功能状态,结果显示这两个lacⅠ基因在DH5α宿主菌内功能正常;二是将其导入NIH3T3细胞内,分析两个靶基因是否能模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。结果表明其中一个lacⅠ靶基因在NIH3T3细胞中处于转录表达状态。结论：本研究构建了一种新型的突变研究载体,位于该载体上的两个lacⅠ靶基因能模拟人和哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。     

lacⅠ靶基因突变子的一种正向选择系统的建立

建立一种能正向选择ｌａｃⅠ靶基因突变子的选择系统。方法比较了 ｌａｃＩ＾－／ｌａｃＺａ型质粒和ｌａｃＩ＾＋／ｌａｃＺａ型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌在ＬＢ完全培养基,以葡萄糖为碳源的Ｍ９基本培养基和以乳糖为碳源的Ｍ９／Ｌ基本培养基内的生长情况。结果组成型ＤＨ１０菌在Ｍ９／Ｌ固体培养其中只需培养２３ｈ便可观察到生长,而诱导型ＤＨ１０Ｂ菌则需培养８８ｈ才可观察到生长,但在ＬＢ和Ｍ９培养基内两的生长速度却相同,     

临床医学检验中影响血液细胞检测质量的有关因素及其控制方法探讨

目的 探究临床医学检验中影响血液细胞检测质量的有关因素及控制方法.方法 选取2018年1月至2019年12月本院收治的150例血型相同且符合血液细胞检测条件的受检者作为研究对象,通过设置不同受检条件,分析影响血液细胞检测质量的因素.结果 稀释比例1:10000的各项血液细胞检测结果均高于1:5000,差异有统计学意义(P<0.05).室温环境下不同放置时间各项血液检测结果比较差异有统计学意义(P<0.05).低温环境下不同放置时间各项血液检测结果比较差异有统计学意义(P<0.05).同一放置时间下,室温与低温环境下的各项血液检测结果差异有统计学意义(P<0.05).结论 血液细胞检测过程中,血液稀释比例、血液样本放置时间和放置温度均会对检测结果产生影响,在未来临床医学检测工作中要严格把控血液细胞检测的各个环节,尽量避免不良因素对检测结果造成影响,确保检测结果的准确性.