人生长激素基因修饰成肌细胞移植对心肌梗死细胞凋亡及心功能的影响

背景: 骨骼肌细胞移植于损伤心肌可以改善心脏功能,但大部分细胞在移植早期因损伤心肌的缺血及炎性氧化应激环境而发生死亡。研究证实通过细胞预处理或联合基因治疗可以改善移植细胞的生存。 目的：探讨人生长激素基因修饰的成肌细胞移植对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和心功能的影响。 设计、时间及地点：细胞学体内实验,于2007-05/2008-12在山西省长治医学院和华中科技大学同济医学院附属协和医院完成。 材料：SD大鼠30只,随机分为3组：人生长激素组、绿色荧光蛋白组、模型对照组,10只/组。另取1~3 d龄SD乳鼠用于骨骼肌成肌细胞培养。pLghGHSN质粒、pLgGFPSN质粒由本实验室提供。 方法：分别取携带人生长激素基因的pLghGHSN质粒和携带绿色荧光蛋白基因的对照质粒pLgGFPSN,用二步转染法转染E86和PT67包装细胞,G418筛选并扩增阳性克隆。各组大鼠均结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,2周后人生长激素组将转染pLghGHSN的成肌细胞悬液150 μL (含6×106个成肌细胞)分3点注射于心肌梗死区边缘,绿色荧光蛋白组同法注射等量转染pLgGFPSN的成肌细胞悬液,模型对照组注射等体积无血清培养基。 主要观察指标：细胞移植4周后,超声心动图和血流动力学检查各组心功能变化;苏木精-伊红染色检测心肌梗死面积,天狼星红染色检测胶原纤维容积分数;Western blot法检测心肌组织Bax,Bcl-2,人生长激素和caspase3蛋白的表达。 结果：与模型对照组比较,人生长激素组左室腔变小,左室游离壁厚度增加,左室舒张末期内径和左室收缩末期内径均显著减小 (P < 0.05),短轴缩短率显著增加(P < 0.05)。与绿色荧光蛋白组、模型对照组比较,人生长激素组大鼠左室压力最大上升速率、左室压力最大下降速率绝对值、左室收缩末压均显著升高(P < 0.05),左室舒张末压显著降低(P < 0.05);血清中类胰岛素样生长因子1质量浓度显著升高(P < 0.05);心肌梗死面积明显减小(P < 0.05);bax,caspase3蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平增加,人生长激素蛋白呈阳性表达。 结论：人生长激素基因修饰的成肌细胞移植可以抑制心肌细胞凋亡,与单独成肌细胞移植相比能够更有效地缩小心肌梗死面积,更好地改善心肌梗死大鼠的心功能。     

卡维地络对充血性心力衰竭患者促炎细胞因子的影响

目的：观察卡维地络对充血性心力衰竭（CHF）患者促炎细胞因子浓度的影响。方法：选择66例CHF患者，随机分为常规治疗组和卡维地络治疗组，32例健康体检者为正常对照组。用双抗体夹心ELISA法测定血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）和IL-1β的浓度，分析其与CHF程度的关系。结果：（1）CHF患者三种细胞因子浓度均明显高于正常对照组（P〈0．05或〈0．01），CHF程度越重细胞因子浓度越高（P〈0．01）；（2）治疗后卡维地络组心功能分级左室收缩末内径较治疗前显著降低（P均〈0．05），左室短轴缩短率（LVFS）、每搏量（SV）、左室射血分数（LVEF）较治疗前显著升高（P〈0．05～〈0．01）；常规治疗组仅LVEF显著升高（P〈0．05）；治疗后卡维地络组LVEF、LVFS较常规治疗组显著升高（P〈0．05）；（3）治疗后卡维地络组三种细胞因子浓度显著降低（P〈0．01或〈0．05）；常规治疗组TNF—α、IL-6降低（P〈0．05），而IL-1β水平降低不显著。结论：CHF患者促炎细胞因子浓度升高，可作为判断心衰严重程度的指标。卡维地络能有效抑制促炎细胞因子的产生，改善心功能和心室重构。     

慢性充血性心力衰竭治疗的新进展

心力衰竭是因心脏结构或功能异常导致心脏泵血能力下降的复杂综合征,是影响健康长寿和生活质量的主要原因。在发展中国家,心衰的发病率为1％～2％,诊断时平均年龄为76岁。虽然,心衰住院率的增长已经减缓,但心衰治疗的费用在     

逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子Ⅰ在大鼠成肌细胞中的表达及分泌

目的:将经逆转录病毒载体的介导的人胰岛素样生长因子Ⅰ基因导入大鼠成肌细胞,观察其是否表达,为组织工程人工肌肉体内基因治疗打下基础。方法:实验于2005-10/2006-12在华中科技大学同济医学院协和医院心血管病研究所完成。①实验材料:PLghIGF1SN由本实验室保存,逆转录病毒包装细胞系GP E86购自Clontech公司,包装细胞PT67购自ATCC。②实验方法:选用新生SD乳鼠骨骼肌进行成肌细胞的原代培养,选用新生SD乳鼠心脏进行心肌细胞的培养。通过脂质体2000将人胰岛素样生长因子ⅠcDNA导入逆转录病毒包装细胞PT67,经过G418筛选获取稳定表达病毒的克隆,NIH3T3细胞测定病毒滴度,挑取滴度高的克隆扩增,收取高滴度的病毒上清液,转染成肌细胞。③实验评估:G418筛选转染过的成肌细胞,采用ELISA方法检测其上清液中人胰岛素样生长因子Ⅰ的表达,采用MTT法检测人胰岛素样生长因子Ⅰ的生物学活性。结果:①病毒滴度的测定:利用不同量的病毒上清感染1×105NIH3T3细胞,并经G418筛选,测得不同PT67克隆的培养上清中,病毒滴度最高为8×105cfu/mL。②ELISA方法检测人胰岛素样生长因子Ⅰ的表达:在转染后大鼠成肌细胞分泌的上清液中可以检测到人胰岛素样生长因子Ⅰ的表达,经过G418筛选2周后,收集培养液,人胰岛素样生长因子Ⅰ浓度最高在40μg/L,总量可以达到(150～200)ng/2×106/d。未转染成肌细胞组人胰岛素样生长因子Ⅰ浓度约在0.3μg/L。③MTT法检测人胰岛素样生长因子Ⅰ的生物学活性:转染的成肌细胞培养上清液刺激心肌细胞后,心肌细胞活力明显增加。结论:人胰岛素样生长因子Ⅰ基因可在鼠成肌细胞内稳定表达并具有生物学效应,可用于心血管系统基因治疗的研究。     

急性心力衰竭的治疗原则

进入新千年以来，急性心力衰竭（简称心衰）成为一个医学界关注的热点，相继有EHF1、ADHERE、EHF2三个大规模临床研究的公布及ESC急性心衰治疗指南的推出。急性心衰包括新出现的急性心衰和慢性心衰急性失代偿，两种情况急性期处理原则是一样的。急性心衰的治疗分为4个阶段：紧急治疗期，院内稳定治疗期，出院前规划期及长期治疗期。早期治疗的目的是缓解症状，避免或限制进一步的心肌损伤，逐渐过渡到临床稳定，根据病因制订不同的治疗方案并坚持长期的神经内分泌拮抗剂的治疗。     

女性冠心病防治的新观点

来自国外的资料显示，女性在第5个十年间冠心病的发生率低于男性，第6个十年，与男性相当，第7个十年，高于男性。根据2007年世界卫生组织和高血压联盟的调查报告，我国女性心血管疾病的危险总体略低于男性，在60-69岁组：女性10年发生心血管事件的危险〈10％占72．7％；危险在20％～29．9％占13％；余分布在危险10％～20％和30％以上。而男性60～69岁组，危险〈10％只占50％。     

2007年心力衰竭回顾

2007年心力衰竭(心衰)领域的新进展包括心衰的分子遗传学、生物标志物和治疗几个方面[1～12].心衰的药物治疗没有大的突破,几个大规模临床研究都是中性结果,只有部分有效,从另一个侧面也表明,在现有的有效治疗下,要想取得进一步的疗效是极其困难.心衰的人工装置治疗处于逐渐完善阶段.急性心衰和舒张性心衰是研究的热点,但显效的治疗方法也很有限.对慢性心衰的定义和危险分层虽有不同的看法,减少心衰的危险因素、对存在心脏重构的患者逆转心脏重构越来越被大多数学者所认同.本文将从以下几个方面简述2007年心衰领域的新进展.     

隐匿性预激综合征和早期复极综合征相关性的研究

目的了解隐匿性预激综合征和早期复极综合征的相关性。方法将经心内电生理检查证实为隐匿性预激综合征且心电图上存在早期复极征象的23例患者设为观察组,分析其临床资料及射频导管消融术前和术后的心电图差异;将我院体检中心检查发现心电图上存在早期复极征象但无心动过速病史的30例患者设为对照组,比较观察组和对照组心电图,了解隐匿性预激综合征与早期复极综合征之间的相关性。结果观察组射频导管消融术前和术后心电图无明显差异,观察组和对照组心电图无明显差异。结论隐匿性预激综合征和早期复极综合征的发生无相关性。     

运动试验与冠心病

广义的运动试验有主动及被动运动二大类。主动运动包括等张和等长运动。被动试验是指心房调搏、药物和代谢性运动试验。等张运动是目前最常使用的运动类型,由骨骼肌肌纤维缩短做功,踏车运动、平板试验均以等张运动为主。单独的等长运动(握力试验)应用较少,它主要给心脏以压力负荷,目前多与其它试验相结合,如握力试验加潘生丁超声多谱勒试验等。心房调搏与超声心动图及其它显影技术的结合已成为研究心血管系统对生理和药物应力适应的一种工具。潘生丁运动试验是药物