急性心肌梗塞心电图诊断的几个问题

急性心肌梗塞心电图诊断的几个问题卢永昕，杨钧国体表心电图对心肌梗塞（ＭＩ）的诊断具有重要意义，本文拟对急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的心电图诊断的几个问题进行讨论。１Ｑ波形成条件近年的病理和实验资料表明：ＭＩ时病理性Ｑ波形成需具备以下三点：①梗塞直径＞３ｃｍ...     

成肌细胞表达异源心钠素基因的研究

目的研究成肌细胞表达异源心钠素(atrial natriuretic factor,ANF)基因的可行性,为其在心血管疾病中的应用提供依据.方法以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增人的心钠素基因,将其与质粒pcDNA3.0连接,构建质粒pcDNA3.0/ANF.将pcDNA3.0/ANF及对照pcDNA3.0分别转染体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞,筛选以获得稳定表达异源心钠素基因的细胞.收集筛选后的细胞培养基以放射免疫分析法检测心钠素的表达水平,第14d以定量PCR的方法检测成肌细胞内心钠素mRNA的水平.结果pcDNA3.0/ANF组重组心钠素的表达水平为174.19 52.43pg/ml,成肌细胞内mRNA含量(灰度值)为254.62 10.86,与对照组比较均有显著性差异,P＜0.01.结论成肌细胞可以表达异源心钠素基因,这一方法有可能应用于心血管疾病的基因治疗.     

高血压左室肥厚与外周血淋巴细胞β受体密度的关系

目的观察高血压左室肥厚与外周血淋巴细胞β受体密度的关系。方法４１例高血压患者和２３例正常人进行超声心动图检查，并采用放射配体结合法测定外周血β受体密度。结果高血压左室肥厚组（ｎ＝２１）βｍａｘ高于正常对照组，高血压无左室肥厚组（ｎ＝２０）βｍａｘ低于正常对照组。高血压左室肥厚组βｍａｘ与左室肌重指数呈正相关（ｒ＝０．７６５，Ｐ＜０．０１）。结论在高血压肥厚发展期，外周血淋巴细胞β受体密度降低，心室肥厚一旦形成，淋巴细胞β受体密度反而增高。     

反复发热、消瘦伴脑损害并表现为感染性心内膜炎可能的艾滋病一例

患者女,26岁,农民.因"反复咳嗽、咳痰伴乏力、间断发热2个月余"入院.起病初在当地按"感冒"治疗可缓解,约1个月后突然出现头昏、吐词不清、右侧肢体乏力,右侧颜面感觉迟钝,在当地医院行头颅CT检查提示左基底节、丘脑、内囊及顶叶多发性梗塞,给予脱水治疗.2天后出现咳嗽、咳痰伴每日午后发热,最高达41℃,持续1周.胸片检查提示右下肺感染,直背综合征.反复使用青霉素、先锋霉素等治疗约半个月,体温仍有波动.患者自发病以来,体重下降约5 kg.体格检查:体温36.3℃,心率72次/分,律齐,胸骨左缘第3肋间可闻及舒张期叹气样杂音,右下肺可闻及少许细湿哕音,肝脾肋下未触及,双下肢不肿.     

人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰成肌细胞移植心肌梗死大鼠心肌细胞胰岛素样生长因子Ⅰ及端粒酶反转录酶mRNA的表达

目的：检测人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植后，心肌梗死大鼠血浆及心肌组织内胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白浓度的变化，以及心肌细胞内胰岛素样生长因子Ⅰ和端粒酶反转录酶mRNA水平的表达。 方法：人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞、未转染的正常鼠骨骼肌成肌细胞均由实验室前期制备。健康雄性SD大鼠90只，取12只作为假手术组，剩余大鼠结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型，结扎后24 h存活36只，随机分为对照组和实验组，18只/组。造模后24 h，实验组在动物后肢局部分多点注射总量为0.1 mL的人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞悬液,（2~4）×1010 L-1细胞；对照组和假手术组给予等量未转染的正常鼠骨骼肌成肌细胞悬液。应用ELISA法检测血浆和心肌组织胰岛素样生长因子Ⅰ的表达，RT-PCR检测心肌细胞中胰岛素样生长因子Ⅰ与端粒酶反转录酶mRNA水平。 结果：①细胞移植后1，2，4周，假手术组血浆和心肌组织内鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的表达无明显变化（P > 0.05）；与假手术组比较，实验组和对照组血浆中鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的质量浓度均显著降低（P < 0.01），心肌组织中鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的含量均明显升高，于第2周达峰值（P < 0.01），且实验组较对照组升高更为显著（P < 0.01）。②细胞移植后1，2，4周，假手术组和对照组大鼠血浆和心肌组织内均未检测到人胰岛素样生长因子Ⅰ的表达；实验组于第1周即表达人胰岛素样生长因子Ⅰ，含量显著高于其余两组（P < 0.01）。③细胞移植后第1周，实验组和对照组心肌细胞鼠胰岛素样生长因子ⅠmRNA相对表达量明显高于假手术组（P < 0.01）；至第2周实验组达峰值，显著高于对照组（P < 0.01），然后逐步下降。实验组和对照组心肌细胞端粒酶反转录酶mRNA的表达均逐渐呈升高趋势，且实验组更为显著（P < 0.01）。 结论：人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死大鼠体内1周后，能有效合成和分泌胰岛素样生长因子Ⅰ，明显促进心肌梗死早期大鼠心肌细胞鼠胰岛素样生长因子Ⅰ及端粒酶反转录酶mRNA的表达，同时可持续促进心肌及全身其他组织鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的分泌。     

胰岛素样生长因子Ⅰ抑制氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的体外试验

目的：胰岛素样生长因子Ⅰ作为重要的促细胞生长因子之一，其对内皮细胞凋亡影响的报道不多。实验拟验证和探讨胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用及可能机制。 方法：实验于2006—12／2007—07在华中科技大学同济医学院协和医院心血管疾病研究所完成。①实验材料及分组处理：取人新鲜脐带（产妇或家属签署知情同意书）分离培养人脐静脉内皮细胞，分为：胰岛素样生长因子Ⅰ组（1×10^-9mmol／L）、氧化型低密度脂蛋白（200mg／L）＋胰岛素样生长因子Ⅰ组（1×10^-9mmol／L）、氧化型低密度脂蛋白（200mg／L）组、正常对照组。分别在细胞培养24h后加入。②实验评估：采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞活力；DAPI细胞核荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化及细胞凋亡率的测定；并进行内皮细胞caspase-3活性的检测。 结果：①氧化型低密度脂蛋白可明显抑制人脐静脉内皮细胞增殖，胰岛素样生长因子Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白共同加入后，细胞增殖率明显上升（P〈0．05）。②氧化型低密度脂蛋白可诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡，而加入胰岛素样生长因子I刺激后细胞凋亡率降低（P〈0．05）。③caspase-3活性检测表明与对照组相比，氧化型低密度脂蛋白能明显上调caspase-3的表达，而胰岛素样生长因子Ⅰ＋氧化型低密度脂蛋白组caspase-3活性则降低（P〈0．05）。 结论：胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡具有抑制作用，可能与其下调caspase-3蛋白表达有关。     

同种异体骨髓间质干细胞移植联合血管内皮细胞生长因子基因转染治疗心肌梗死

背景:骨髓间质干细胞和血管内皮细胞生长因子移植具有促进血管再生、改善心功能的作用,但是二者联合应用是否优于单独应用尚不清楚。目的:观察同种异体骨髓间质干细胞移植联合血管内皮生长因子基因转染对大鼠急性心肌梗死血管再生和心功能的影响。设计:大鼠骨髓间质干细胞培养采用单一样本观察;细胞移植和基因转染采用随机对照动物实验。单位:华中科技大学协和医院心内科,同济医学院心血管病研究所。材料:健康雄性Wistar大鼠94只。表达载体PAdTrack/VEGF165。方法:实验于2004-06/2005-06在同济医学院心血管病研究所实验室完成。①体外分离、纯化、培养大鼠骨髓间质干细胞,以5-溴-2’-脱氧尿苷标记细胞。②制备、抽提、纯化、鉴定质粒PAdTrack/VEGF165。③结扎冠状动脉建立急性心肌梗死模型2周后,随机将其分为4组,每组均为12只,干细胞 质粒组、干细胞组、质粒组、对照组,分别进行心肌内大鼠骨髓间质干细胞移植和/或VEGF165转染、DMEM注射。④4周后行免疫组织化学和超声心动图检查。主要观察指标:①各组大鼠梗死及缺血区免疫组织化学和苏木精-伊红染色检查。②血管计数。③超声心动图检查。结果:48只大鼠进入结果分析。①干细胞 质粒组和干细胞组梗死及缺血心肌处可见大量5-溴-2’-脱氧尿苷标记的移植细胞,其中缺血心肌处部分移植细胞分化为血管内皮细胞并形成新生毛细血管。②Ⅷ因子染色阳性的新生血管密度分布为干细胞 质粒组>质粒组>干细胞组>对照组(P均<0.01)。③细胞移植和基因转染治疗后室壁厚度和室壁运动幅度改善,射血分数值增加幅度为干细胞 质粒组>干细胞组>质粒组>对照组(P均<0.01)。结论:同种异体骨髓间质干细胞移植联合血管内皮生长因子基因转染能进一步增强大鼠梗死缺血区血管再生、改善室壁厚度和心功能。     

犬骨骼肌成肌细胞体外分离、纯化及培养方法改良探索

目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性.方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进行原代和传代培养,免疫细胞化学染色鉴定.结果:改良后的培养方法适于获取犬骨骼肌成肌细胞,SKGM培养基适于犬骨骼肌成肌细胞的体外培养.SkMs在细胞密集或低血清分化培养基作用下可融合成肌管.结蛋白(desmin)单克隆抗体(mAb)细胞化学染色鉴定SkMs呈阳性,纯度在90%以上.结论:通过改良后的双酶一步消化法获得的SkMs在合适的培养条件下能够增殖、分化并保持其生物学特性,为其在基因治疗和组织工程中的应用奠定了基础.     

人生长激素基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学的影响

目的：探讨人生长激素（hGH）基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死大鼠血流动力学和血管新生的影响。方法: 结扎大鼠左冠状动脉前降支制作大鼠心力衰竭模型。2周后将冠脉结扎后存活的30只大鼠随机分为3组,hGH基因修饰的成肌细胞移植组（hGH组）、绿色荧光蛋白(GFP)基因修饰的成肌细胞移植组（GFP组）、注射等体积培养液的对照组。治疗4周后,血流动力学检查各组心功能指标;心肌组织进行HE染色检测心肌梗死面积,Ⅷ因子免疫组织化学检测血管新生。RT-PCR检测bax和bcl〖STBX〗-2〖STBZ〗 mRNA的表达。Western blotting检测各组心肌hGH、血管内皮生长因子（VEGF）、caspase-3蛋白表达情况。结果: （1）与对照组和GFP组相比： hGH组血流动力学指标明显改善,心肌梗死面积缩小。（2）心肌组织Ⅷ因子免疫组织化学检查结果显示： hGH组血管密度显著高于GFP组和对照组。（3）RT-PCR检测结果显示hGH组bax mRNA水平显著低于GFP组和对照组, bcl-2 mRNA水平显著高于GFP组和对照组。（4）Western blotting检测结果显示hGH组大鼠心肌组织有hGH蛋白表达,其余两组心肌组织无hGH蛋白表达。与其它两组相比,hGH组caspase-3蛋白表达降低, VEGF蛋白表达增加。结论: hGH基因修饰的成肌细胞移植可以抑制细胞凋亡,与单独成肌细胞治疗相比可以诱导更大的血管化,更好地缩小心肌梗死面积,并改善心肌梗死大鼠血流动力学。成肌细胞治疗联合hGH基因治疗为心肌梗死后心力衰竭的治疗提供了一个新的途径。     

人生长激素基因修饰成肌细胞移植对心肌梗死细胞凋亡及心功能的影响

背景:骨骼肌细胞移植于损伤心肌可以改善心脏功能,但大部分细胞在移植早期因损伤心肌的缺血及炎性氧化应激环境而发生死亡.研究证实通过细胞预处理或联合基因治疗可以改善移植细胞的生存.目的:探讨人生长激素基因修饰的成肌细胞移植对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和心功能的影响.设计、时间及地点:细胞学体内实验,于2007-05/2008 12在山西省长治医学院和华中科技大学同济医学院附属协和医院完成.材料:SD大鼠30只,随机分为3组:人生长激素组、绿色荧光蛋白组、模型对照组,10只,组.另取1-3 d龄SD乳鼠用于骨骼肌成肌细胞培养.pLghGHSN质粒、pLgGFPSN质粒由本实验室提供.方法:分别取携带人生长激素基因的pLghGHSN质粒和携带绿色荧光蛋白基因的对照质粒pLgGFPSN,用二步转染法转染E86和PT67包装细胞,G418筛选并扩增阳性克隆.各组大鼠均结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,2周后人生长激素组将转染pLghGHSN的成肌细胞悬液150 μ L(含6×106个成肌细胞)分3点注射于心肌梗死区边缘,绿色荧光蛋白组同法注射等量转染pLgGFPSN的成肌细胞悬液,模型对照组沣射等体积无血清培养基.主要观察指标:细胞移植4周后,超声心动图和血流动力学检查各组心功能变化:苏木精一伊红染色检测心肌梗死面积,天狼星红染色检测胶原纤维容积分数:western blot法检测心肌组织Bax,Bcl-2,人生长激素和caspase3蛋白的表达.结果:与模型对照组比较,人生长激素组左室腔变小,左室游离壁厚度增加,左室舒张末期内径和左室收缩末期内径均显著减小(P<0.05),短轴缩短率显著增加(P<0.05).与绿色荧光蛋白组、模型对照组比较,人生长激素组大鼠左室压力最大上升速率、左室压力最大下降速率绝对值、左室收缩末压均显著升高(P<0.05),左室舒张末压显著降低(P<0.05):血清中类胰岛素样生长因子1质量浓度显著升高(P<0.05);心肌梗死面积明显减小(P<0.05);bax,caspase3蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平增加,人生长激素蛋白呈阳性表达.结论:人生长激素基因修饰的成肌细胞移植可以抑制心肌细胞凋亡,与单独成肌细胞移植相比能够更有效地缩小心肌梗死面积,更好地改善心肌梗死大鼠的心功能.