早孕期筛查母血清指标与妊娠高危因素及不良妊娠结局相关性研究

目的:探讨妊娠高危因素与早孕期筛查母血清标志物的关系,并分析不良妊娠结局与以上指标变化的关系.方法:采用时间分辨免疫荧光检测技术,对孕10～13周的252例孕妇,进行早孕期筛查妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、游离β人绒毛促性腺激素(freeβ-HCG)检测,将孕妇分为高龄组、高危组、对照组3组,分别比较妊娠结局.结果:PAPP-A、Freeβ-HCG的中位倍数值(MOM)高危组分别为0.88和0.91,高龄组为1.22和1.17.不良妊娠结局组的中位数MOM值呈现低值,PAPP-A与对照组的MOM值差异有统计学意义.结论:PAPP-A的检测对监测自发性流产、胎儿畸形等不良妊娠结局具有一定的临床价值.     

500例胎儿脐血染色体检查相关因素及脐血管穿刺术安全性分析

目的:评价超声引导下脐血管穿刺术的安全性,探讨胎儿染色体异常临床高危因素,提高脐血管穿刺对胎儿异常染色体核型的检出率?方法:选取本院超声引导下经腹脐血管穿刺并行染色体检查的孕妇500例,进行染色体核型分析,比较不同产前诊断指征组的异常染色体检出率并进行相关因素分析?结果:穿刺成功率99.6%,胎儿脐血管穿刺的主要并发症为穿刺点出血,共86例,占17.2%;胎心心动过缓10例,占2.0%;胎儿丢失1例,占0.2%?共检出异常染色体核型47例,检出率9.4%?同时合并2种以上产前诊断指征者与胎儿染色体异常存在相关性?结论:脐血染色体核型分析能够为临床上诊断胎儿染色体异常提供可靠依据,脐血管穿刺术是一种安全的产前诊断取材技术?同时合并2种以上产前诊断指征者有必要进行产前诊断?     

正常及去势大鼠骨组织形态的比较研究

目的 :比较正常大鼠骨组织形态与去势大鼠的差别 ,探讨绝经后骨质疏松的发生机制。方法 :切除成年雌性大鼠双侧卵巢制成实验性骨质疏松动物模型 ,将股骨远端骨组织经甲基丙烯酸甲酯等包埋切片后观察骨组织形态、测量各项参数。结果 :去势大鼠骨组织皮质及骨小梁变薄 ,骨矿化率增高 ,矿化缘长度增加 ,小梁表面破骨细胞数明显增多。结论 :卵巢功能下降 ,骨吸收 形成失衡是早期骨丢失的主要机制。     

羊水直接扩增快速诊断骨骼发育异常类单基因遗传病

目的：以最原始的羊水样本为起始模板直接进行PCR扩增,建立一种快速、简便的骨骼发育异常单基因遗传病的产前基因诊断方法。方法：对2013年4月—2018年1月于南京医科大学第一附属医院就诊的超声提示骨骼发育异常的38例胎儿行羊膜腔穿刺并进行软骨发育不全、软骨发育低下、致死性发育不全及成骨发育不全4种单基因遗传病诊断,抽取孕妇羊水后不经过胎儿细胞培养,也不经过羊水中胎儿细胞DNA的提取,加入中性盐等物质作为PCR缓冲液,控制缓冲液pH值为8~10,扩增FGFR3及COL1A2基因上的靶标片段,直接在反应体系中加入8 μL羊水进行PCR扩增测序,行产前基因诊断;考察扩增体系中的成分及含量对羊水直接扩增方法的影响。结果：38例胎儿样本中检出单基因遗传病致死性发育不全3例,分别为Ⅰ型1例,Ⅱ型2例;软骨发育不全3例,软骨发育低下1例。中性盐缓冲液、0.20 U/μL Promega Taq DNA聚合酶、每条引物1.2 pmol/μL用于羊水直接扩增效率最佳。结论：本方法省略了羊水细胞培养和羊水中胎儿DNA核酸提取这两步繁琐步骤,无需浓缩羊水即可直接扩增,缩短了诊断时间,节约了诊断成本,可以减少PCR过程中可能出现的样本交叉污染,是一种很有前景的快速产前基因诊断新方法。     

辅助生殖妊娠流产与自然妊娠流产绒毛核型分析比较

目的 观察辅助生殖妊娠后流产与胚胎染色体异常的关系,探讨辅助生殖技术对胚胎染色体异常发生的风险.方法 选择体外受精（IVF）或宫腔内人工受精（IUI）妊娠后自然流产患者51例（辅助生殖组）、自然妊娠后自然流产患者76例（自然妊娠组）,对其绒毛标本进行细胞培养、染色体制备及核型分析.结果 研究对象绒毛标本均进行细胞培养,成功得到核型分析结果122例（辅助生殖组51例,自然妊娠组71例）,成功率为96.1％.辅助生殖组染色体异常28例（IVF 23例、IUI 5例）、自然妊娠组37例,染色体异常率分别为54.9％、52.1％,两组比较P＞0.05.两组出现频率最高的染色体异常类型是常染色体三体.结论 胚胎染色体异常是辅助生殖妊娠后流产的主要原因之一,但辅助生殖技术并未增加染色体异常发生的风险.     

正常及去势大鼠骨组织形态的比较研究

目的：比较正常大鼠骨组织形态与去势大鼠的差别，探讨绝经后骨质疏松的发生机制。方法：切除成年雌性大鼠双侧卵巢成实验性骨质疏松动物模型，将股骨远端骨组织经甲基丙烯酸甲酯等包埋切片后观察骨组织形态，测量各项参数。结果：去势大鼠骨组织皮质及骨小梁变薄，骨矿化率增高，矿化缘长度增加，小梁表面破骨细胞数明显增多。结论：卵巢功能下降，骨吸收－形成失衡是早期骨丢失的主要机制。     

染色体核型分析联合CNV-Seq检测在高龄孕妇产前诊断中的临床应用

目的 探讨染色体核型分析联合基因组拷贝数变异测序(CNV-Seq)检测在高龄孕妇羊水产前诊断中的临床应用价值。方法 对2018年1月—2020年1月南京医科大学第一附属医院的368例产前诊断高龄孕妇进行分析,统计产妇的羊水细胞染色体核型结果、CNV-Seq检测结果。结果 368例高龄孕妇中染色体核型检出结果异常30例,异常检出率8.2%(30/368),其中21三体7例,18三体2例,性染色体数目异常8例,嵌合体4例,染色体平衡变异6例,染色体不平衡易位变异3例。CNV-Seq检出结果异常40例,异常检出率10.9%(40/368),其中21三体7例,18三体2例,性染色体数目异常8例,嵌合体4例,≥10 Mb大片段缺失重复3例,<10Mb且致病性CNVs3例,可能致病性CNVs3例,临床意义未明CNVs10例。CNV-seq检测对染色体核型分析异常结果中的6例染色体平衡变异未检出,其余24例异常均检出,此外CNV-seq额外检测出6例致病性及可能致病性CNVs,占比1.6%(6/368)。结论 染色体核型分析联合染色体拷贝数变异检测,可提高染色体异常检出率,两种方法各自有独特的...     

孕妇外周血游离DNA深度测序在胎儿染色体非整倍体无创检测中的应用研究

目的:评估孕妇外周血胎儿游离DNA高通量测序在检测胎儿染色体非整倍体异常中的优势?方法:通过高通量测序技术检测1 000例妊娠13周以上孕妇的外周血中胎儿游离DNA,判断胎儿非整倍体异常,通过传统染色体核型分析及胎儿出生后的临床随访对检测结果进行验证?结果:1 000例标本中1例检测失败,其余999例中共检出18例异常,其中12例21三体,2例18三体,1例13三体,1例X单体,1例X三体,1例XXY?12例21三体阳性病例中,有1例为双胎妊娠,核型分析显示一胎正常,一胎为21三体;1例X三体经核型分析诊断为正常女性,其余检测结果均与染色体核型分析结果相符,对于21三体?18三体?13三体和性染色体非整倍体异常的总阳性检测率94.44%?所有检测结果为阴性者,均进行产后随访新生儿面容?体格发育等情况,未发现有21三体?18三体?13三体等常见染色体非整倍体异常征象,无假阴性病例?结论:孕妇外周血胎儿游离DNA高通量测序对于检测胎儿21三体?18三体和13三体准确度高,对性染色体非整倍体的检测,本技术检测指标有待进一步提高?     

胎儿超声软标记与结构畸形在产前诊断染色体异常中的意义

目的：探讨胎儿超声软标记、结构畸形在产前诊断染色体异常病例中的临床意义。方法：回顾性分析608例行染色体核型分析胎儿的超声征象及染色体检测结果,总结染色体异常胎儿的超声征象特点,比较超声软标记、结构畸形胎儿染色体异常检出率的差异。结果：608例中,染色体核型分析结果异常54例（检出率8.9%）,其中21?三体25例（46.3%）;18?三体9例（16.7%）;13?三体2例（0.04%）;Turner 综合征1例（0.02%）;余17例为其他染色体异常。染色体核型分析结果异常中有31例（57.4%）存在超声征象异常。高危因素为超声因素的检出率（12.3%）明显高于非超声因素的检出率（6.7%）（P＜0.05）。结构畸形的染色体异常检出率（28.6%）明显高于超声软标记的染色体异常检出率（6.7%）（P＜0.01）。结论：发现胎儿存在结构畸形或多个软标记阳性,特别是合并羊水过多或其他高危因素（高龄、血清学检查阳性）时应建议行染色体检查以明确诊断;发现单个超声软标记时,没有必要过分强调其可能的染色体风险,以免引起孕妇精神紧张和过度医疗。