LIGHT、IFN-γ基因转染人肝癌HepG2细胞凋亡及其Caspase-3和survivin表达

目的 观察LIGHT、IFN-γ基因转染人肝癌细胞HepG2的凋亡及其Caspaae-3和survivin的表达变化. 方法 用LIGHT、IFN-γ真核细胞表达质粒pcDNA4C-LIGHT-cDNA、pcDNA4C-IFN-γ-cDNA及其转化的E.coli JM-109感受态大肠杆菌,经质粒提取后,转染人肝癌细胞HepG2,同时设对照组(未转染).分别于转染后12、24、48 h收集HepG2细胞.流式细胞仪检测细胞凋亡和Caspase-3、survivin. 结果 转染后细胞凋亡及Caspase-3表达量在对照组、LIGHT单转组、联合转染组呈逐渐递增趋势,survivin表达量呈递减趋势. 结论 LIGHT转染后能通过调节HepG2细胞Caspase-3及survivin的表达来发挥促细胞凋亡作用,INF-γ能增强LIGHT诱导的HepG2细胞凋亡,且显著上调其Caspase-3的表达.     

氨甲环酸不同给药时间对全髋关节置换术中及术后失血量的影响

目的 探讨不同时间给予氨甲环酸静脉滴注对全髋关节置换术(total hip replacement,THA)术中及术后失血量的影响.方法 选取2012年2月至2014年2月我科收治的行单侧THA患者90例,按入院顺序随机分为三组,每组30例.对照组不给予氨甲环酸及同类药物;术前组于术前10 min及6h后分别给予1 g氨甲环酸静脉滴注;术中组于手术结束前10 min、术后6h分别给予1 g氨甲环酸静脉滴注.比较三组患者的术中失血量、术后失血量、术后绝对失血量、血红蛋白含量值变化、深静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)发生率.结果 三组患者术中、术后失血量和术后绝对失血量的差异有统计学意义(P＜0.05),术前组患者的上述指标均最低;三组患者血红蛋白减少值的差异有统计学意义(P＜0.05),术前组患者血红蛋白减少值最低;三组患者DVT发生率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 行THA患者于术前10 min及6h后分别静脉滴注氨甲环酸能很好地减少术中及术后失血量.     

LIGHT基因和干扰素-γ转染诱导肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的 探讨脂质体介导LIGHT基因和IFN-γ转染诱导肝癌HepG2细胞的促凋亡作用.方法 以脂质体介导LIGHT基因和IFN-γ转染肝癌HepG2细胞,设立转染组(单转、联合转染组)和对照组(未转染组).分别于转染后12、24、48 h检测肝癌HepG2细胞的凋亡率、Bcl-2及Caspase-8的表达量,并采用方差分析.结果 (1)细胞凋亡率:单转组转染后12、24、48 h为18.8%±3.5%、25.7%±2.8%、36.4%±3.6%;联合转染组为23.8%±2.4%、31.1%±2.1%、42.5%±4.5%;对照组为8.7%±2.1%、9.3%±1.6%、10.9%±1.2%.3组比较差异有统计学意义(F=15.69,53.33,48.28,P<0.01).(2)Bcl-2表达量:单转组在转染后12、24、48 h为16.4%±5.0%、13.4%±3.5%、8.6%±2.3%;联合转染组为14.7%±3.8%、9.1%±2.0%、4.6%±2.0%;对照组为25.3%±6.3%、19.8%±4.4%、10.1%±3.8%.3组比较差异有统计学意义(F=6.19.12.29,5.81,P<0.05).(3)Caspase-8表达量:单转组在转染后12、24、48 h为19.3%±2.4%、27.2%±1.9%、33.7%±3.0%;联合转染组为22.7%±2.2%、30.9%±3.1%、38.2%±3.2%;对照组为1.2%±0.8%、1.8%±0.6%、3.2%±1.5%.3组比较差异有统计学意义(F=71.54,112.78,101.61,P<0.01).结论 LIGHT基因转染肝癌HepG2细胞后通过调节Bcl-2及Caspase-8的表达来发挥促凋亡作用,IFN-γ能增强LIGHT基因诱导肝癌HepG2细胞的凋亡.     

胆囊三角解剖变异及其临床意义

收集1962～1995年67例尸体解剖标本,对胆囊三角进行外科学解剖观察。结果表明,胆囊动脉起源和走行,胆囊管与胆总监管汇合方式、汇合位置均见变异,类型多样,提示胆囊三角是胆管、十二指肠上部手术的不安全区。针对各种变异特点讨论了外科手术中应采取的操作方法及注意问题。     

阑尾黏液性囊腺瘤一例报告并文献复习

1临床资料 1.1病例报告 患者,男,55岁,因查本发现右下腹占位3个月于2009-08-02收入青岛大学医学院附属医院普外二科,入院查体:腹平坦,未见胃肠型及蠕动波,未见腹壁静脉曲张.     

胰腺真性囊肿11例诊治报告

分析了11例胰腺真性囊肿的临床诊断及手术治疗情况。认为对胰腺真性囊肿定位主要以B超及腹部CT检查,而定性则以病理学检查为主。手术是其主要治疗方式,单纯囊肿切除适用于单发的孤立囊肿,胰体、尾切除术则适用于胰体尾部多发囊肿,对于有癌变倾向的囊肿,应行胰十二指肠切除术。     

兔骨髓源成骨细胞作为骨组织工程实验细胞的研究

目的探讨兔骨髓来源成骨细胞体外分离培养的条件及生长特征,为骨组织工程学实验研究奠定基础。方法穿刺抽取4个月龄新西兰兔的骨髓,采用离心和贴壁相结合方法,用矿化诱导培养液培养贴壁的骨髓细胞并传代。观察其生物学特征,绘制生长曲线、分裂指数曲线和贴壁率曲线,测定细胞贴壁及延展时间,并将培养细胞进行冻存、复苏,比较细胞特性有无改变。同时,电镜观察细胞在藻酸钙凝胶载体内的生长情况。结果培养细胞在第12代以前生长性状稳定,具有典型的成骨细胞特性;第4天为细胞生长倍增时间,第5～6天细胞达生长高峰;第4天细胞分裂最为旺盛,达18%;传代后10h贴壁率最高,为90%;冻存复苏后的细胞生物学特性无改变。电镜观察细胞在藻酸钙凝胶载体内生长良好,有骨基质分泌。结论本实验方法体外培养的成骨细胞,生长性状稳定,增殖速度快,可保证相关实验的可靠性和准确性;第12代以前,生长3～6d的细胞可作为理想的实验细胞。     

踝关节融合时传统内固定与张力带固定的疗效比较

踝关节融合术一直是治疗踝关节严重病变的最佳方法，因为目前还没有理想的假体来进行踝关节置换术，一个对合良好的融合常会使病人获得无痛性步态，其功能常超出病人的期望。提高融合率的关键技术之一是胫距关节面切除后的固定方式。有钉板法（滑槽内置植骨法、用腓骨作外置自体植骨、钢板法）、U形钉法、交叉螺丝钉及克氏针等传统的固定方法和我科自行设计的张力带法。本文对踝关节融合时的传统方法和张力带法的疗效进行比较，从而为踝关节融合时选择不同的固定方式提供参考。     

理中汤在急危重症中的运用辨析

理中汤为太阴病主方，方以人参、炙甘单补益脾气，于姜温中祛寒，炒白术健脾燥湿，共同组成一个温中祛寒，健脾运湿之温补剂，适用脾胃虚寒所致各证。针对急危重症，单用本方治疗，药力平和，稍显力弱，疗效不显，而以本方为基础方，师其法而小泥其方，结合具体病情，辨证施治，加减或合方治疗，常获良效。后世医家以本方为基础方化裁不少新方，如治下利寒甚，脾肾两虚的棒附理中汤；治下病日久，正虚邪恋休息痢的连理汤；治寒凝气滞胃脘痛的丁萸理中汤.     

Smad4 基因缺陷小鼠耳形态学改变的初步研究

目的研究Smad4基因缺陷小鼠中耳及内耳的病理形态学改变，探讨Smad4基因对中耳及内耳发育的影响。方法利用建立的Smad4基因敲除嵌合体小鼠模型，通过火棉胶包埋HE染色观察Smad4（＋/＋）与Smad4（＋／-）小鼠的情况；通过耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶染色观察Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）小鼠的耳蜗内、外毛细胞数量；应用扫描电镜观察Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）小鼠的内耳超微结构。结果火棉胶包埋HE染色显示：Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）小鼠耳蜗大小、耳蜗转数均未见异常，中耳鼓膜正常，听小骨锤骨、砧骨、镫骨及关节结构正常，骨细胞排列紧密，Smad4（＋／＋）与Smad4（＋／-）之间没有差异。Smad4（＋／＋）小鼠耳蜗Corti器结构完整，未圯异常，血管纹厚薄均匀，血管腔腔径大小均匀。内、外毛细胞及内外柱细胞、支持细胞无异常，螺旋神经节细胞未见缺失；Smad4（＋／-）小鼠耳蜗钩端至-回外毛细胞轮廓不清，呈均质化，细胞核消失。Deiter细胞核下沉或消失，相应的螺旋神经节细胞大量缺失。耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶染色显示：Smad4（＋／-）和Smad4（＋／＋）小鼠均有明显的局限于Corti’S器底同的外毛细胞缺失，其中Smad4（＋／-）小鼠外毛细胞的缺失，比Smad4（＋／＋）小鼠更明显（P〈0．01），两个基因型小鼠的内毛细胞均未见缺失。扫描电镜显示：Smad4（＋／＋）小鼠未见明显病理变化，Smad4（＋／-）小鼠耳蜗钩端外毛细胞静纤毛广泛散在性缺失，外毛细胞的表皮板穿孔、自溶，其周边与指状突小皮板断离。两个基因型小鼠耳蜗内毛细胞纤毛均未见明显改变。结论Smad4基因敲除后内耳形态发生明显改变，表明Smad4基因缺陷导致小鼠内耳细胞损害。