中国地鼠线粒体DNA 16S rRNA基因序列分析及分子系统发育研究?

目的 实验通过克隆分析中国地鼠16S基因的部分序列，对中国地鼠16S基因的结构和功能进行初步探索和揭示。方法 从GeneBank中已报到的啮齿动物16S基因保守区设计一对引物，进行PCR扩增，测序。用Blastn与Genbank中7种啮齿类动物的16S基因进行序列比较，分析其碱基组成及变异情况，并用邻接法(NJ)、非加权组平均法(UPGMA)构建分子系统树，在分子水平上探讨中国地鼠和其它啮齿类动物的进化关系，对中国地鼠的种属地位进行了进一步验证。结果 获得了中国地鼠线粒体16S基因的部分序列；进化树表明，中国地鼠、金黄地鼠与欧洲仓鼠先聚为一支，小鼠与大鼠先聚为一支，东方田鼠、台湾田鼠与东欧田鼠先聚为一支。结论 中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近，与传统的分类地位基本吻合。     

五味子乙素对染矽大鼠肺组织MAPKs和NF-κB信号转导通路的影响

目的 探讨五味子乙素(Sch-B)对SiO2致大鼠肺损伤过程中肺组织丝裂素活化蛋白激酶(MAPKs)和核因子-κΒ(nuclear factor-κΒ,NF-κΒ)信号转导通路的影响.方法 92只大鼠随机分为对照组(20只)、染尘组(30只)、Sch-B干预1组(24只)和Sch-B干预2组(18只).非暴露气管法建立大鼠矽肺模型,Sch-B干预1组造模后第1天起连续灌胃(80mg/kg Sch-B)21 d,Sch-B干预2组造模后第8天起连续灌胃(80mg/kg Sch-B)21 d.Sch-B干预1组在第3、7、14和21天,Sch-B干预2组在第14、21和28天随机取6只,在第3、7、14、21和28天随机取对照组4只,染尘组6只,处死取其肺组织.右肺用于蛋白质提取,通过免疫印迹(Western bloting)法测定肺组织MAPKs家族中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38的磷酸化水平;用免疫组化法测定NF-κΒ核转移率.结果 Sch-B干预1组第3、7、14和21天,Sch-B干预2组第21和28天肺组织ERK1/2磷酸化水平(0.974±0.169、0.987±0.149、0.920±0.092、0.884±0.078、1.167±0.083、1.002±0.060)均明显低于染尘组,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);Sch-B干预1组在第7天肺组织JNK1磷酸化水平达到最高峰后持续下降,与染尘组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),而Sch-B干预2组第14、21和28天肺组织JNK1磷酸化水平(0.882±0.064、0.802±0.061、0.792±0.015)均低于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01);Sch-B干预1组第3天p38磷酸化水平为0.309±0.045,高于染尘组,Sch-B干预1组和2组第14天p38磷化水平为0.667±0.072和0.650±0.066,均明显低于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01).Sch-B干预1组大鼠肺组织第3、7、14和21天NF-κΒ核转移率为(13.54±5.36)%,(21.01±6.43)%,(30.55±6.44)%,(37.39±9.32)%,Sch-B干预2组第21天核转移率为(44.33±22.88)%,明显均低于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01),而在第28天Sch-B干预2组核转移率为(58.52±14.57)%,明显高于染尘组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ch-B对SiO2诱导的肺组织损伤过程中MAPKs家族3个成员活化都有一定的抑制作用.在染矽初期给予Sch-B干预可抑制NF-κΒ活化.Sch-B对SiO2诱导的大鼠肺损伤保护作用可能通过MAPKs和NF-κΒ信号转导通路.     

山医群体中国地鼠近交E家系RAPD分析

目的　分析山医群体中国地鼠E家系的遗传纯度。方法　应用经过筛选的 3 1条随机引物对中国地鼠E家系 12只个体基因组DNA进行RAPD扩增 ,计算近交个体间的相似系数。结果　所有样品的相似系数0 943 1到 0 9978之间变动 ,平均相似系数为 0 9749,聚类分析得到了这些个体的同源树资料。结论　山医群体E家系有较高的遗传纯度     

健脑益智汤对拟血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

目的 观察健脑益智汤对拟血管性痴(VaD)大鼠的治疗作用,并探讨其机制.方法 采用改进的双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)建立VaD大鼠模型,灌胃给药,用Morris水迷宫法评价健脑益智汤对VaD模型大鼠学习记忆功能的影响,并用免疫组化法检测海马CAI区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达,比较各组结果 之间的差异.结果 (10.6～42.4) g/kg健脑益智汤可以明显改善大鼠的学习记忆功能,健脑益智汤治疗组大鼠海马CAI区神经细胞ChAT的阳性表达明显高于模型组.结论 健脑益智汤对拟VaD大鼠学习记忆功能有一定的改善作用,其机制可能与增强拟VaD大鼠海马CAI区神经细胞ChAT表达有关.     

生物医学研究中的实验动物福利问题

动物福利问题形式多样,涉及科学进步和社会发展的多个层次。在生物医学研究过程中,每位科学家都应正确看待这些问题,增进对问题多样性的了解,倡导人道的使用和管理实验动物,并采取积极有效措施,遵循有关的规章制度和操作要求扩大动物福利,推进我国实验动物标准化进程和生物医学事业的发展。     

多靶点射频热凝修复术治疗椎间盘突出症400例

目的探讨多靶点射频热凝修复术一次性治疗椎间盘突出症的临床实用性和术中热凝靶点定位,以提高疗效及减少并发症。方法400例椎间盘突出症患者接受了多靶点射频热凝治疗。根据临床表现及MRI或/和CT片确定射频热凝的靶点位置和热凝周期,同时设计术中患者体位和穿刺途径。结果400例中优364例(91.0%),良20例(5.0%),可8例(2.0%),差8例(2.0%),优良率96.0%,有效率98.0%。未出现并发症及死亡病例。结论多靶点射频热凝修复术是治疗椎间盘突出症一种安全、微创、优良率高的治疗方法。     

大肠杆菌甲基化缺陷DM1菌株与普通DH5α菌株的感受态转化率的比较

目的 观察甲基化缺陷的大肠杆菌DM1菌株与普通DH5α菌株感受态转化效率的差别.方法 用常规氯化钙法制备二者的感受态细胞,质粒转化后计算转化率.结果 DM1菌株感受态细胞转化率为(2.2±0.3)×106 CFU/μg,DH5α菌株感受态细胞转化率为(6.3±0.5)×106 CFU/μg.结论 成功建立一种高效制备甲基化缺陷菌株DM1感受态细胞的方法,虽然该法制备DM1感受态细胞转化效率比DH5α低2-3倍,但其能够高效满足质粒克隆实验中Dam或Dcm甲基化的限制性位点的使用要求.     

中国地鼠线粒体基因组与微卫星遗传标记的研究

中国地鼠在生物医学研究中占有重要的地位,但中国地鼠的分子遗传标记研究尚少。本研究运用生物信息学和比较基因组学等方法分析了中国地鼠的线粒体基因组的碱基组成、基因组结构、基因进化等特征,为中国地鼠应用于人类疾病动物模型提供基因组数据。建立了中国地鼠近交系遗传质量控制体系,为中国地鼠种质资源科学评估、合理开发利用奠定了基础。     

中国地鼠RAPD分析体系的优化

目的　优化中国地鼠RAPD分析体系。方法　以30条引物对山医群体中国地鼠的两个家系基因组DNA在各种不同条件下进行RAPD ,分析比较扩增结果。结果　在下列反应体系及温度循环参数下结果较好:在2 5 μl的反应体系中含有10×buffer 2 5 μl,dNTP 0 2mmol L ,Mg2 2 0mmol L ,引物0 2 μmol L ,Taq酶1 5U ,模板DNA 15ng ,扩增程序为94℃预变性3min后进入循环体系,94℃变性30s ,36℃退火5 0s ,72℃延伸1min ,4 0个循环后接7min延伸。结论　以上述反应体系及温度循环参数进行中国地鼠RAPD ,扩增结果稳定