柴胡皂苷合成途径中三个关键酶基因片段的克隆与序列分析

本文以北柴胡幼嫩根的总RNA为模板,通过RT-PCR方法,克隆出3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)、异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IPPI)和法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的cDNA片断,大小分别为470bp、532bp、466bp,分别编码157、177、155个氨基酸多肽。提交到Gen- Bank上,得到登陆号分别为:HMGR(EU400217)、IPPI(EU400218)、FPS(EU400219)。NCBI在线blast结果表明,推断的北柴胡HMGR、IPPI和FPS基因的氨基酸序列分别与杜仲、三岛柴胡和雷公藤的一致性最高,分别为93%、99%、97%。对HMGR基因和FPS基因进行特征性保守域分析,结果显示,推断的HMGR氨基酸序列存在两个NADPH结合基序,FPS存在三个特征性保守序列:DDIMD、GQMID和KL。构建的植物IPPI的分子进化树表明,北柴胡IPPI基因与...     

亲和阵列-色谱联用筛选中药活性成分新方法：钓鱼法

提出了基于亲和阵列及色谱联用系统的中药及天然产物活性成分高通量筛选方法。相对于先纯化后筛选的方法,利用先亲和再分离鉴定的方法更像从大量的鱼群中钓鱼,钓钩上的鱼饵不同,上钩的鱼会有差异。鱼饵类似于各种不同的生物作用靶点,将各类靶点固定后进行亲和吸附,吸附后的成分再进行色谱分离及色谱联用技术进行结构鉴定,将大大提高生物活性成分筛选的命中率。通过各类靶点亲和柱进行阵列后,可同步提高不同靶点筛选的通量。因此我们称这种筛选方式为：钓鱼法。以此方法为基础,介绍了从中药中筛选血管紧张素转换酶抑制剂的过程。     

显示中枢神经系统MAO和AehE阳性神经元的双重酶染法

<正> 中枢神经系统中按神经元合成和传递神经递质的不同,可将神经细胞划分成不同的类型。近年来组织化学方法、荧光组织化学方法和免疫组织化学方法的发展和进步,使各种类型的神经细胞和核团可以直接或间接地显示。乙酰胆碱酯酶(AchE)组织化学方法是重要的神经组化方法之一。虽然AchE阳性神经元不都是胆碱能神经元,但因其历史长久,操作简便,仍然作为一种重要的标记手段在神经科学的研究中得到广泛地应用。近年来,AchE法与HRP法联合应用在研究中枢神经核团的纤维联系方面取得了良好的效果。单胺氧化酶(MAO)     

介绍一种敏感显示乙酰胆碱酯酶的组织化学方法

介绍一种敏感显示乙酰胆碱酯酶的组织化学方法首都医学院北京神经科学研究所刘玉军，鲁强，佟大山，张国风显示胆碱酯酶阳性神经元的乙酰胆碱酯酶（ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ，ＡＣｈＥ）组织化学方法在组织学、神经解剖学研究中应用广泛。传统染色方法虽...     

针刺肾俞八髎穴治疗尿闭23例体会

尿闭现代医学称之为尿潴留,乃膀胱内充满尿液,不能自行排出的症状。病因比较复杂多数由神经系统疾病引起。其它如老年性前列腺增生亦可引起此病。是临床上比较常见的并发症。笔者自1991年至1993年共收治急性尿潴留者23例。笔者通过针刺对23例尿潴留患者进行治疗,取得良好效果。使病人在短时间内自行排尿,且能避免因导尿引起的泌尿系感染,现报告如下。     

灵长类帕金森病动物模型的建立

灵长类帕金森病动物模型的建立首都医科大学北京神经科学研究所张进禄刘玉军鲁强徐群渊选用恒河猴１０只，体重３～８ｋｇ，分为２组。２组动物均在４０ｍｇ／ｋｇ戊巴比妥腹腔麻醉下，手术暴露颈总动脉。Ａ组为单侧颈总动脉注射，即将ＭＰＴＰ（１．５～３ｍｇ／ｋｇ体重...     

二十二碳六烯酸对神经细胞生长发育的作用

目的 :　观察二十二碳六烯酸 ( DHA)对神经细胞生长发育的作用。方法 :　将无血清培养的新生大鼠大脑神经细胞分为实验组和对照组 ,实验组加入 0 .33mol/ L( 5mol/ 1 5L)乳化DHA40 μl。对两组细胞进行神经细胞活力、蛋白质含量、神经特异性烯醇化酶 ( NSE)活性测定及神经细胞形态学观察。结果 :　实验组大脑神经细胞突起生长速度、胞体面积和直径、神经细胞存活率、NSE和神经细胞活力及蛋白含量均显著高于对照组。结论 :　DHA对神经细胞的生长有促进作用 ,且这一作用可能与促进神经细胞蛋白质合成有关。     

HBV感染者血清前S1抗原检测在医院应用的临床意义

目的探讨HBV感染与血清前S1抗原检测的相关性。方法针对我院收治的184例乙型肝炎病毒（HBv）感染者检测其乙肝两对半及乙肝病毒前S1抗原。结果HBsAg（＋），HBcAg（＋），抗一HBc（＋）者，前S1抗原阳性率为87．7％}HBeAg（＋），抗HBe（＋），抗一HBc（＋）者，前S1热原阳性率为43．6％。结论前S1抗原与肿eAg密切相关，前S1抗原检测可反映其体内HBV病毒的复制情况，具有一定的临床价值。     

乳腺癌改良根治术中保留肋间臂神经的临床意义

目的研究在乳腺癌改良根治术中保留肋间臂神经的临床价值。方法将我院2003年9月至2009年9月行改良根治术的Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者61例分为保留肋间臂神经组（实验组）37例及切除肋间臂神经组（对照组）24例,术后测试患者患侧上臂内后侧及腋部的皮肤感觉功能变化。结果实验组患者术后感觉障碍发生率约16.2%,对照组约75%,差异有统计学意义,而两组术后并发症及局部复发无明显差别。结论对Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者行改良根治术时术中保留肋间臂神经可显著减少术后患者患侧上臂内后侧及腋部皮肤感觉障碍,且手术并发症及术后局部复发无明显差别。