抗SARS冠状病毒中和活性单克隆抗体的筛选及其结合位点分析

目的 建立能分泌具有中和活性的抗SARS-CoV单克隆抗体（McAb）细胞株，制备有中和活性的抗SARS-CoV MeAb，用于SARS-CoV感染的早期特异诊断和进行SARS-CoV结构蛋白的功能研究。方法 用灭活纯化sARS-c0V（BJ01株）免疫BALB／c小鼠，通过细胞融合技术，建立能稳定分泌SAILS病毒MeAb的杂交瘤细胞系，然后用中和试验进一步筛选分泌具有中和活性的抗SARS-CoV MeAb细胞株。利用SARS-CoV的S和N蛋白的不同长度肽段通过EusA鉴定McAb的特异结合区域，分析S和N蛋白不同区域诱导产生抗体的能力和特性。结果 建立了12株能稳定分泌抗SARS-CoV McAb的杂交瘤细胞株，间接免疫荧光法检测抗体效价在1：320～1：20 480之间，其中6株具有较好的中和SARS-CoV的能力。具有中和活性的McAb中，3株是针对S蛋白的，2株是针对N蛋白的。其中抗S蛋白的中和抗体活性比抗N蛋白的中和抗体活性高，另外1株可能是针对SARS-CoV的其他结构蛋白的。进一步对6株抗S蛋白的McAb的特异抗原结合表位分析，发现其中3株结合位点在S蛋白第12～311氨基酸之间，2株在第310～535氨基酸之间，后者中和效价高于前者，另1株是针对S2蛋白的，SARS病毒的受体结合区正位于第310～535氨基酸这一区段。具有中和活性的McAb通过间接免疫荧光、ELISA、酶标免疫组化法和胶体金方法对SARS病毒进行检测，都显示出高度的特异性和良好亲和力。结论 成功制备了具中和活性的抗SARS-CoV单克隆抗体，并分别测定了McAb对S蛋白和N蛋白的特异抗原结合活性，初步确定了S蛋白的中和表位。为今后SARS病毒的特异诊断、结构蛋白的功能分析和重组疫苗的研制奠定了较好的基础。     

功能锻炼信息核对卡在全髋关节置换术患者中的应用

目的利用照护群集管理方法建立全髋关节置换术患者功能锻炼信息核对卡,规范功能锻炼的内容和流程,提高患者功能锻炼的依从性及正确率。方法将本科室收治的全髋关节置换术患者按入院时间分为观察组196例和对照组181例,观察组患者按照信息核对卡指导功能锻炼,对照组按常规护理指导功能锻炼,统计两组患者功能锻炼的依从性、正确率及Harris髋关节评分,并收集护士和患者对信息核对卡的评价。结果观察组患者功能锻炼依从性、正确率及不同时段Harris髋关节评分明显高于对照组(P0.01)。97.2%的护士认为该信息核对卡有利于提高患者功能锻炼的依从性,96.4%的患者认为该信息核对卡可以指导其按照流程进行功能锻炼。结论使用全髋关节置换术后功能锻炼信息核对卡可以规范功能锻炼内容和流程,提高患者功能锻炼的依从性及正确率,使功能锻炼计划得到有效实施,促进置换髋关节功能的康复。     

布鲁菌病合并脑炎1例

正1临床资料患者男,56岁。因"间歇发热、头痛、乏力1个月,鼻出血、肢体和语言障碍4d"于2017年4月1日入院。患者近1个月间歇发热,体温最高39.0℃,伴乏力、头痛,未予重视。因家中养殖牛羊,怀疑布鲁菌病,入院前1周至当地疾病预防控制中心检测布鲁菌抗体回报试管凝集试验1∶50(++),未用药治疗。4d前患者无明确诱因突发鼻出血,量约600m L,至当地医院诊断"鼻内血管破裂",予对症治疗后出血停止。随     

氨茶碱治疗病态窦房结综合征近况介绍

近年来,氨茶碱治疗病态窦房结综合征（ＳＳＳ）疗效显著,日益受到重视。笔者就其应用方法、临床疗效、治疗原理及注意事项等内容作一简述。１应用方法１．１静脉给药法氨茶碱治疗ＳＳＳ,临床上较多使用静脉给药法,此法起效快,疗效确切。一般用氨茶碱２５０～５００ ｍｇ加入 ５％葡萄糖液 ５００ ｍｌ中缓慢静滴,每日 １次,２０～３０ ｄ为 １个疗程。金文山等［１］用此法治疗１５例,以症状减轻或消失、平均窦性心率增至６０／ｍｉｎ、或窦性心率净增５～１０／ｍｉｎ,窦房结恢复时间（ＳＮＲＴ）≥１５００ ｍｓ,＜２ ０００ ｍ…     

人胚肝单层细胞培养物中成纤维细胞抑制的初步研究

在人胚肝单层细胞的培养中,主要困难是成纤维细胞迅速大量增殖,使上皮样肝细胞的生长受到竞争性抑制。对此,国内、外还未找到一种满意的解决办法。近两年来,我们作了一些探索和研究,现将结果报道如下。 材料和方法 一、材料 1.0.1％胰蛋白酶(1:250):用Hank氏溶液配制成0.3％浓溶液,冻存于-30℃中,用     

非返性喉返神经的解剖特点及术中损伤的预防

目的研究非返性喉返神经(non-recurrent laryngeal nerve,NRLN)的解剖学特点和变异,探讨甲状腺手术中发现NRLN的方法和总结预防其损伤的经验。方法对北京协和医院于2007年1月至2012年6月期间行单侧或双侧甲状腺腺叶全切手术的2 211例患者的资料进行回顾性分析,同时对国内文献报道的114例NRLN患者的资料进行分析。结果北京协和医院2 211例甲状腺手术中暴露喉返神经3 479条,11条确认为右侧NRLN(0.32%,11/3 479),其中Ⅰ型3例,ⅡA型7例,ⅡB型1例;1例为同时伴有返支和非返支的喉返神经,余10例均为完全型;手术中均未发生神经损伤。文献报道的114例NRLN占报道病例总数的0.14%～4%;其中右侧NRLN 109例,Ⅰ型4例(3.7%,4/109),ⅡA型75例(68.8%,75/109),ⅡB型9例(8.3%,9/109),分型不详21例(19.3%,21/109),同时伴有喉返神经返支3例(2.8%,3/109);左侧NRLN 5例,ⅡA型2例,分型不详3例,其中1例同时伴有喉返神经返支。论著或病例报道的104例患者中,手术导致NRLN麻痹共16例(15.4%,16/104),其中Ⅰ型1例,ⅡA型9例,分型不详6例。结论 NRLN少见,主要发生在右侧,术中易损伤,主要损伤类型为ⅡA型;外科医生应充分认识NRLN及其变异类型,预防其损伤。     

经皮射频消融治疗肝脏巨大血管瘤疗效观察

[摘 要] 目的 观察经皮射频消融术（PRFA）治疗肝脏巨大血管瘤（5 cm≤直径≤15 cm）的安全性及可行性。方法 回顾性分析2014年6月至2017年6月于达州市中心医院行手术治疗的78例肝巨大血管瘤患者的病例资料,其中42例行PRFA治疗（A组）,36例行传统开放手术治疗（B组）,通过比较手术时间、术中出血量、住院时间、住院费用、术后临床治愈率等指标,评价两种方案的疗效,观察两组患者在治疗过程中出现的不良反应或并发症,评估治疗安全性。结果 所有患者在治疗过程中均未发生严重的并发症,无一例死亡。两组术后1个月、6个月临床治愈率、术后并发症发生率无统计学差异（P > 0.05）;但两组在手术时间、术中出血量、住院时间、住院费用上存在差异,且具有统计学意义（P < 0.05）。结论 PRFA和传统开放手术治疗肝巨大血管瘤疗效相当,均具有较好的安全性;经皮射频消融术治疗肝巨大血管瘤具有微创、痛苦小、出血量少、手术时间短、住院费用低的优点。严格掌握手术适应证,选择个体化治疗方式,PRFA可为肝巨大血管瘤患者的治疗提供一种替代选择途径。     

双向电泳质谱法研究女性肺腺癌转移淋巴结的蛋白表达

目的:分析肺腺癌转移淋巴结与正常淋巴结组织蛋白质表达差异.方法:运用蛋白质组技术,对肺腺癌转移淋巴结与正常淋巴结组织蛋白质进行分离和比较分析,并在蛋白质和mRNA水平进行进一步验证.结果:获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,比较分析显示与正常淋巴结蛋白质表达水平相比,肺腺癌转移淋巴结有23个蛋白点的表达量存在明显差异.其中新增蛋白点4个,缺失1个,14个蛋白点表达水平明显上调,4个蛋白点表达水平明显下调.共鉴定了11个肺癌转移相关蛋白,其中,候选蛋白膜联蛋白1(ANX1)、细胞骨架蛋白(CK18)、Rho-GDP解离抑制剂1(GDIR)、原肌球蛋白3(TPMF)、蛋白谷氨酰胺γ-谷氨酰转移酶(TGLC)和白介素18(IL-18)在肺腺癌转移淋巴结显著低表达,而候选蛋白核氯离子通道蛋白1(CLI1)、蛋白质二硫键异构酶(ER60)、肌酸激酶、硫氧还蛋白过氧化物酶1(PDX1)和热休克蛋白60(CH60)在肺腺癌转移淋巴结表达水平比正常淋巴结明显提高.结论:肺腺癌转移淋巴结与正常淋巴结蛋白质表达存在明显差异,这11种蛋白质可能与肺腺癌淋巴结转移机制有关.     

术前营养风险评分与直肠癌前切除术后吻合口瘘的关系

目的探讨直肠癌前切除患者术前营养风险评分与术后吻合口瘘的关系。方法回顾性分析2003年1月至2012年7月间南方医科大学附属南方医院收治的641例直肠癌前切除患者的临床资料,采用营养风险筛查2002（NRS2002）进行术前营养风险评分,通过单因素x。检验和多因素Logistic回归模型来分析NRS2002评分与术后吻合口瘘发生的关系。结果全组术后吻合口瘘发生率为4．1％（26／641）,其中术前NRS2002评分大于或等于3分者与小于3分者术后吻合口瘘发生率分别为6．9％（18／259）和2．1％（8／382）,差异有统计学意义（P=0．002）。校正了年龄、吻合口距肛缘距离和临床病理分期等影响因素后证实,NRS2002评分是直肠癌前切除术后吻合口瘘的独立危险因素（OR=3．198,95％CI：1．324～7．722,P=0．010）。结论术前NRS2002营养风险评分有助于直肠癌前切除术后吻合口瘘的预测,从而为预防性造瘘的适应证选择提供科学依据。     

一期前路病灶清除加植骨术治疗化脓性脊椎炎

抗生素效力的高度发展已使化脓性脊椎炎患者相对少见。然而,随着糖尿病、恶性肿瘤及滥用毒品等患者的增多,化脓性脊椎炎在这些患者中的发病日益增加[1,2]。传统的治疗包括卧床、支具外固定以及静脉应用抗生素;但上述治疗周期较长,且仍有相当一部分患者治疗无效,病变进行性发展,